柴胡的研究进展及提取试验方案设计

1、中药化学实验改革答辩中药化学实验改革答辩安徽中医学院安徽中医学院0808中药一班中药一班E E组组组员：崔亚宁、江静怡、刘华佗、马小雷、汪组员：崔亚宁、江静怡、刘华佗、马小雷、汪 勇、郑传柱勇、郑传柱柴胡柴胡柴胡的来源性状柴胡的来源性状柴胡的化学成分柴胡的化学成分柴胡的提取精制柴胡的提取精制柴胡的质量评价柴胡的质量评价含柴胡的中成药含柴胡的中成药柴胡的来源性状柴胡的来源性状 伞形科多年生草本植物柴胡(北柴胡BupleurumchineseDC)和狭叶柴胡(南柴胡Bupleurumscorzonerifolium Willd)的干燥根。原产中国，东北、华北、西北、华东各地。朝鲜、日本、苏联也有分

2、布。 柴胡的来源性状柴胡的来源性状 药材来源药材来源 1. 药材性状药材性状 2.u 北柴胡： 呈圆柱形或长圆锥形，根头膨大顶端残留 3-15个茎基或短 纤维状叶基，下部常分枝。表面黑褐色或浅棕色，具纵皱纹、支根痕及皮孔。质硬而韧，不易折断，断面呈片状纤维性，皮部浅棕色，木部黄白色。气微香，味微苦。u 南柴胡： 圆锥形，较细。根头顶端有多数纤维状叶残基，下部多不分枝或稍分枝。表面红棕色或黑棕色，靠近根头处多具细密环纹。质稍软，易折断，断面略平坦，不显纤维性。具败油气。南柴胡北柴胡二、柴胡化学成分二、柴胡化学成分 柴胡根中主要成份为柴胡皂苷，其次含有植物甾醇、侧金盏花醇，以及少量挥发油、多糖;地

3、上部分主要含黄酮类、少量皂苷类、木脂素类、香豆素类等成分。 皂苷类皂苷类 柴胡中主要含有柴胡皂苷a、c、d;尚含3一0一乙酞基柴胡皂苷a、6一0一乙酞基柴胡皂苷a、柴胡皂苷e、6一0一乙酞柴胡皂苷一a，23一0一乙酞基柴胡皂苷乙一d;6一0一乙基柴胡皂苷一b:，柴胡皂苷一f等。1.皂苷皂苷a（C42H68O13） l 物理性质：本品为结晶粉末，易溶于水，稀醇，特别是热水和热醇，在丁醇和戊醇中溶解性大，难溶或不溶于苯，乙醚，氯仿等溶剂。 l 化学反应：Molish反应阳性，Lieberman-Burchard反应产生紫色。l 药理作用：有抗炎作用和降低血清胆固醇和甘油三酯以及镇静、解热作 用2.

4、皂苷皂苷c（C48H78O17） u 物理性质：易溶于水，稀醇，特别是热水和热醇，在丁醇和戊醇中溶解性大，难溶或不溶于苯，乙醚，氯仿等溶剂。u 化学性质：Molish反应阳性，Lieberman-Burchard反应产生紫色。u 药理作用：保肝、抗细菌内毒素等作用。 3.皂苷皂苷d（C42H68O13） u 物理性质： 白色粉末，易溶于热水、稀醇、热甲醇和热乙醇u 化学性质：Molish反应阳性，Lieberman-Burchard反应产生紫色。u药理作用：有抗炎作用、降低血清胆固醇和甘油三酯等。三、柴胡的提取精制三、柴胡的提取精制1.实验目的实验目的2.实验原理实验原理熟悉三萜皂苷类化合物的

5、熟悉三萜皂苷类化合物的 检识及鉴定方法检识及鉴定方法 三萜皂苷类，由于糖分子的引入，三萜皂苷类，由于糖分子的引入，使极性增大，可溶于水，易溶于热水、使极性增大，可溶于水，易溶于热水、稀醇、热甲醇和热乙醇中，几乎不溶稀醇、热甲醇和热乙醇中，几乎不溶于或难溶于丙酮、乙醚以及石油醚等于或难溶于丙酮、乙醚以及石油醚等极性小的有机溶剂。极性小的有机溶剂。 柴胡皂苷在水饱和的正丁醇中溶柴胡皂苷在水饱和的正丁醇中溶解度较大，且可以与水分成二相，可解度较大，且可以与水分成二相，可利用此性质从水溶液中用正丁醇提取利用此性质从水溶液中用正丁醇提取皂苷，借以与亲水性的糖、蛋白质等皂苷，借以与亲水性的糖、蛋白质等分离

6、。此外为避免原生苷环氧醚键的分离。此外为避免原生苷环氧醚键的断裂，防止皂苷次生化，可在提取溶断裂，防止皂苷次生化，可在提取溶剂中加入剂中加入5%吡啶。吡啶。掌握柴胡中总皂苷的提取掌握柴胡中总皂苷的提取 分离方法及操作分离方法及操作3.实验步骤实验步骤残渣残渣 95%乙醇乙醇溶液溶液400ml含含0.5%吡啶的吡啶的含含0.5%吡啶的吡啶的95%乙醇溶液乙醇溶液300ml回回流流1h抽滤抽滤药材药材50g合并滤液合并滤液蒸馏回收至蒸馏回收至300ml加水搅拌加水搅拌抽滤抽滤200ml水饱和正丁醇水饱和正丁醇萃取萃取1.2.3.取滤液取滤液取上层液取上层液减压蒸馏减压蒸馏回收正丁醇回收正丁醇加入乙

7、醚加入乙醚抽滤抽滤4.5.7.6.8.总皂苷总皂苷浓缩物浓缩物回回流流0.5h抽滤抽滤四、柴胡的定性检识四、柴胡的定性检识理化检识理化检识泡沫试验泡沫试验 取柴胡总皂苷样品适量加水5ml溶解强烈振摇，产生持久性泡沫 (皂苷具有降低水溶液表面张力的作用） 显色反应显色反应uLiebermann-BurchardLiebermann-Burchard反应：反应：取柴胡总皂苷样品适量，加乙酸酐1ml溶解，加浓硫酸-乙酸酐（1:20）数滴产生黄、红、紫、蓝颜色变化-最后褪色。 uMolish反应反应 ：取柴胡总皂苷样品适量，加乙醇1ml溶解，加5%-萘酚乙醇液1-3滴，摇匀后沿试管壁缓缓加入浓硫酸，在

8、两液面间产生紫色光环。 溶血试验溶血试验 取柴胡总皂苷样品适量，加0.9%生理盐水溶解，加几滴2%的红细胞悬浮液，溶液由混浊变澄明，发生溶血现象。（皂苷水溶液与红细胞接触时，红细胞壁上的胆甾醇与皂苷结合，生成不溶于水的复合物沉淀，破坏了血红细胞的正常通透性，使细胞内渗透压增加而发生崩解，从而导致溶血现象） 薄层板：薄层板：硅胶G-CMC-Na板 对照品：对照品：柴胡皂苷a、柴胡皂苷d 展开剂：展开剂：乙酸乙酯-乙醇-水（8：2：1） 显色剂：显色剂：2对二甲氨基苯甲醛的40硫酸溶液 对照品的制备：对照品的制备：精密称取柴胡皂苷a对照品适量,用甲醇制成每毫升含0.5mg的 溶液,作为对照品溶液a

9、。精密称取柴胡皂苷d对照品适量，用 甲醇制成每毫升含0. 5 m g的溶液, 作为对照品溶液。 样品的制备：样品的制备：取柴胡总皂苷样品少量用甲醇溶解作为供试品。 薄层层析薄层层析: 照薄层色谱法实验, 吸取上述各种溶液各5 l ， 分别于同一以羧甲 基纤维钠为粘合剂的硅胶G薄层板上, 以醋酸乙酯- 乙醇- 水( 8： 2： 1)为展开剂展开, 取出, 晾干, 喷以2% 对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸 溶液, 在60 加热至斑点显色清晰，置日光及紫外光灯（365nm） 下检识 观察记录：观察记录：记录图谱并计算Rf值。 薄层色谱检识薄层色谱检识五、含柴胡的中成药五、含柴胡的中成药1.小柴胡颗粒（片）小柴胡颗粒（片）l 组成：柴胡、黄芩、半夏、党参组成：柴胡、黄芩、半夏、党参 、 生姜、甘草、大枣。辅料为生姜、甘草、大枣。辅料为 蔗糖。蔗糖。l 功效：解表散热，疏肝和胃。用于功效：解表散热，疏肝和胃。用于 外感病，邪犯少阳证，症见外感病，邪犯少阳证，症见 寒热往来、胸胁苦满、食欲寒热往来、胸胁苦满、食欲 不振、心烦喜呕、口苦咽干不振、心烦喜呕、口苦咽干.2.柴胡镇咳片柴胡镇咳片组成：柴胡干浸膏 功效