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文档简介

1、基因工程 、选择题(每小题1、5分,共15分)1. 基因工程的创始人就是()。A A 、Kornberg B W、Gilbert C P 、Berg D S 、Cohen2. 关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有()不太恰当。A 由作用于同一 DNA序列的两种酶构成B 这一系统中的核酸酶都就是H类限制性内切核酸酶C这一系统中的修饰酶主要就是通过甲基化作用对DNA进行修饰D 不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统3. 在DNA的 3' -5 '链上,基因的起始密码子就是()A ATG( 或 GTG) B AGT C TAG D TGA4.11限制性内切核酸酶可以特异性

2、地识别()。A 双链DNA的特定碱基对B 双链DNA的特定碱基序列C特定的三联密码D以上都正确5. 末端转移酶就是合成酶类,具有() 活性。A3'5'DNA聚合酶B 5'3'DNA聚合酶C5'3'DNA内切酶D5'3'DNA外切酶6. 下面关于松弛型质粒(relaxed plasmid) 性质的描述中,()就是不正确的。A质粒的复制只受本身的遗传结构的控制,因而有较多的拷贝数。B可以在氯霉素作用下进行扩增。C 通常带有抗药性标记。D同严紧型质粒融合后,杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子。7. 关于cDNA的最正确的说法就是()。A

3、 同mRN短补的单链 DNAB同mRN短补的双链 DNAC 以mRN的模板合成的双链 DNA D以上都正确8. 关于T4 DNA Ligase,下列说法中哪一项不正确 ?()A 就是最常用的DNA连接酶。B不但能连接粘性末端,还能连接齐平末端。C不但能连接粘性末端。D最适温度37 °C。9. 下列关于建立cDNA文库的叙述中,() 就是错误的?A 从特定组织或细胞中提取DNA或 RNA B用反转录酶合成mRNA勺对应单链DNAC以新合成的单链 DNA为模板合成双链 DNAD 新合成的双链DNA克隆到载体上,并导入受体细胞10. 用下列方法进行重组体的筛选,只有()说明外源基因进行了表

4、达。A Southem blot B Northem blot C Western印迹 D原位菌落杂交、填空题(每空1分,共25分)1. 限制性内切核酸酶分为三类,基因工程中应用的就是 。2. 为了防止 DNA的自身环化,可用去双链 DNA_3. 切口平移(nick translation) 法标记DNA探针时应用的酶就是_ _。4. 基因工程中的3种主要类型的载体就是 、。5. 野生型的M13不适合用作基因工程载体,主要原因就是 、与。6. 黏粒(cosmid) 就是杂合载体。7. 引物在基因工程中至少有 4个方面的用途:(1)、(3) 込 。8. Northern 印迹与Southern印

5、迹有两点根本的区别:(1)_ = 、,(2)9. PCR反应中常用的酶就是_。10、感受态的大肠杆菌细胞在温度为_ 时吸附DNA,时摄人外源DNA11、 用碱法分离质粒 DNA寸,染色体DNA之所以可以被除去,就是因为 。12、 除具有较低的分子量外,一个理想的质粒载体必需包括 、三个部分13、转基因植物操作中常用的载体就是 。14、pcDNA3 1 用于。三、名词解释(每小题4分,共20分)1. 目的基因:2. 基因工程:3. 载体:4. Western 印迹:5. 核酸分子杂交:四、简答题(每小题10分,共20分)1、基因工程的基本操作程序 ?2、怎样制备目的基因?基因工程评分标准与参考答

6、案一、选择题 :每小题 1、5分,共 15分;多选不得分。1d; 2b; 3a; 4b; 5b; 6c; 7c; 8c; 9a; 10c二、填空题 : 每空 1 分,共 25 分1.II 类酶。2. 碱性磷酸酶 ; 5'端的磷酸基团3. DNA 聚合酶 I。4. 质粒DNA;病毒DNA质粒与病毒DNA杂合体5. 没有合适的限制性内切核酸酶识别位点 ; 选择标记6. 质粒与 噬菌体7. 合成探针;合成cDNA用于PCR反应;进行序列分析8. 印迹的对象不同:Northern就是RNA,Southern就是DNA;)电泳条件不同,前者就是变性条件,后者就是非变性电泳9. Tag DNA 聚

7、合酶10.0 C;42 C11. 染色体变性后来不及复性12. 复制起点 ; 选择标记 ; 克隆位点13. Ti 质粒14. 外源基因导入哺乳动物细胞三、名词解释 (每小题 4分, 共 20分)1. 在基因工程中被操作的 DNA序列;又称外源基因(foreign gene/exogenous gene),主要就是指编码蛋白质的结构基因(structuralgene);它们可以从自然界中已有的物种基因组(genome)中分离出来,也可以用人工的方法合成。2. 按照人们的意愿,进行严密的设计,通过体外DNA重组与转基因等技术,有目的地改造生物种性,生产生物活性物质,甚至创造新物 种的技术。3. 携

8、带外源基因进入受体细胞的DNA分子。4. Western 印迹就是将蛋白质经电泳分离后从凝胶中转移到固相支持物上 ;然后用特异性的抗体进行检测 ;可说明基因就是否进行了 表达。5. 用标记的探针检测出 DNA或 RNA同源序列的技术;原理就是碱基互补;常用的有Southern blot 、Northern blot与原位杂交。四、简答题 (20 分)1. 目的基因的制备 ;目的基因与载体连接 ;目的基因导入受体细胞 ;目的基因的表达与检测。或者 :转、接、切、增、检 (加以解释)2. 直接分离法、构建基因文库分离法、PCR扩增法、人工合成法等。(加以解释)五、实验与论述题 (20 分) 由于基因已被测序,可通过RT-PCR方法克隆该基因; 也或通过基

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