轮状病毒与细胞表面受体相互作用的分子机制研究.docx

1、.综述.轮状病毒与细胞表面受体相互作用的分子机制研究张旭辉】综述;周旭2,余黎I审校(1.兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心，兰州730046；2.上海生物制品研究所有限责任公司，上海200052)摘要：目的轮状病毒是导致婴幼儿重症腹泻的重要病因。轮状病毒感染宿主细胞是一个多因素参与的复杂过程，包括病毒表面两种外壳蛋白与细胞表面唾液酸、整合素、热应激同源蛋白70等多种受体分子的相互作用。就轮状病毒与细胞受体相互作用的分子机制作了简要论述。关键词:轮状病毒;唾液酸;整合素;热应激同源蛋白70;神经氨酸酶;相互作用中图分类号：R512.5文献标志码：A文章编号：1005567

2、3(2012)06-0058-06ThestudyonmolecularmechanismofinteractionbetweenrotavirusandreceptorsoncellularsurfaceZHANGXu-hui*,ZHOUXu,YULi(*LanzhouInstituteofBiologicalProductsCo.,Ltd3CenterforGansuProvincialVaccineEngineeringResearch,Lanzhou730046,China)Abstract:Rotavirus(RV)istheleadingetiologicagentofsevere

3、dehydratingdiarrheaininfantsandyoungchildren.RotavirusentryforinfectionhostcellisacomplexmultistepprocessthatinvolvestheinteractionbetweentwosurfaceproteinsinHscandseveralreceptorsincells,includingsialicacids,integrinsandheatshockcognateprotein70.Inthispaper,thestudyonmolecularmechanismoftheinteract

4、ionbetweenrotavirusandcellularreceptorsisreviewed.Keyword：Rotavirus(RV)；Sialicacid(SA);Heatshockcognateprotein70(Hsc70);Neuraminidase(NA);Interaction病毒通过多种复杂的机制进入细胞内部，大多数病毒进入细胞并具有感染性需要特异性的细胞受体介导。尽管病毒与细胞表面受体的这种相互作用并不能确保病毒有效地进入细胞，但这种相互作用是必须的一个环节'3。轮状病毒(Rotavirus,RV)属呼肠孤病毒科，是引起婴幼儿严重腹泻的重要病原体之一，其发生流行

5、不受卫生状况影响。由于目前尚无特效药物治疗RV引起的小儿腹泻,疫苗接种仍是最有力的预防和控制措施。疫苗的研发进展很快，目前上市的用于预防轮状病毒感染的疫苗为口服减毒活疫苗，提高病毒复制组装效率,避免病毒组装不完全现象的发生,是疫苗研发过程中必须解决的问题之一。病毒的吸附是病毒感染增殖的第一个环节，也是最为收稿日期：2012.10.19;修回日期：2012-11-15作者简介:张旭辉(1984-),男，硕士研究生，主要从事病毒性疫苗的研发工作。通信作者:周旭,E-mail:kathzhou关键的环节之一。病毒的吸附取决于病毒表面蛋白与细胞表面受体的相互作用，因此要对RV的分子结构及RV与宿主细胞

6、间相互作用的分子机制进行深入研究，从而深刻理解影响轮状病毒感染性的因素，为疫苗的研发奠定科学的理论基础。从分子水平就RV的外壳蛋白VP4、VP7与宿主细胞表面分子的相互作用进行论述,为进一步研究RV感染细胞机制、研发安全有效疫苗提供依据。1轮状病毒的基本结构RV是由3层同心蛋白质衣壳包被基因组无包膜的双链RNA病毒，呈二十面体，电镜下呈“车轮状”。病毒基因组由11个分节段的双股RNA组成,指导合成12种病毒蛋白质，包括6种结构蛋白(VP1VP4、6、7)和6种非结构蛋白(NSP1NSP6)。结构蛋白构成病毒衣壳。其中，VP1、VP2和VP3为病毒核心蛋白。VP1为核糖核酸依赖的核糖核酸聚合酶，

7、在病毒的复制中发挥重要作用。VP2位于内衣壳，可刺激病毒核糖核酸的复制。VP3为鸟昔酸转移解,指导病毒基因组的复制与转录。中层衣壳VP6由260个三聚体构成，起连接VP7与VP2的作用，并影响内源性转录，为病毒内衣壳蛋白,是病毒分组的特异性抗原。外层衣壳由VP4与VP7两种蛋白组成，二者皆为中和抗原cVP4是位于病毒表面的刺突，是病毒的受体结合蛋白，具有重要的生物学功能，决定着RV的P血清型与感染性。VP7为病毒的外衣壳蛋白,决定着RV的G血清型，可以促进病毒进入细胞其他非结构蛋白与致病性相关,共同作用参与病毒的复制。轮状病毒的感染性依赖于病毒颗粒的完整性,钙离子为稳定病再的重要离子，在乙二胺

8、四乙酸（EDTA）等钙离子螯合剂的作用下病毒将失去外衣壳（VP4和VP7）而导致感染性度失。无感染性的双层病毒颗粒DLPs（Doublelayerparticles）在VP4和VP7存在的条件下可重新装配成为具有感染性的完整病毒颗粒。1.1外壳蛋白VP4VP4为轮状病毒入侵细胞从而决定轮状病再感染性的一个重要蛋白。VP4在胰蛋白悔的作用下裂解为VP5、VP8这种酮解作用可提高病毒感染性,更有利于细胞入侵。水解过程中，VP4（相对分子质量88（）00）被裂解为VP8*（相对分子质量28000,氨基酸残基1231）和VP5*（相对分子质量6（）000,氨基酸残基248776）2个片段，剪切位点位于

9、第231.241和248位的精氨酸残基,剪切产物仍留在病毒颗粒表而。体外实羚证明,经胰蛋1?I酶处理的RV比未经处理的病毒更容易进入细胞,且进入速度更快。值得注意的是，VP4含有与流行性感V病毒血凝素相似的结构域这也许说明蛋白醉的水解作用是RV入侵的一个重要步骤，也解释了为什么RV在小肠细胞内（一个富含蛋白酮的环境中）易于复制的现象。VP4的功能结构域如图1所示。VP4VP5Trypsincleavage图1VP4蛋白结构图Fig.IThestructureofP4prolein1.2外壳蛋白VP7VP7为RV粒子外壳中最丰富的蛋白，是由326个氨基酸残基组成的钙结合糖蛋白，钙离子能稳定外壳蛋

10、白2o研究发现病毒粒子的外壳蛋白VP7是由260个钙依赖的VP7三聚体装配而成,EDTA能诱导三聚体的解聚并促使病毒粒子脱壳音。在病毒粒子吸附至宿主细胞后VP7可以发挥作用协助病毒粒子进入细胞7o失去外壳蛋白的轮状病毒DLPs不具备感染性，只有通过脂质体的转染才能感染易感细胞，说明病毒的外壳蛋白是病毒结合和内化过程中所必需的xo不同株的RV其VP7蛋白含有不同的三肽及多肽基序结合区域，比如有LDV三肽（237239位氨基酸残基）、GPR三肽（253255位氨基酸残基）和CNP多肽（169位氨基酸残基），分别与不同的细胞整合素受体岫31、ax阳和av/33相结合发挥相应的功能wa。2细胞表面受体

11、与轮状病毒感染性RV感染宿主细胞是一个复杂的过程，包括病毒和敏感宿主细胞在分子水平上的相互作用,这种作用说明了病毒感染的宿七范围和种属差衣RV感染时多种细胞受体触发了病毒入胞的一系列事件，这是成功引起病毒增值周期所必须的，并且在病毒感染的组织趋向性和致病性中具有重要的意义。为了进一步研究RV与细胞表面受体的相互作用，人们应用多种方法深入研究病毒感染所需的细胞受体的特性。Jolly等采用0.2%0G（辛基什D.毗喃葡萄糖昔）溶液去除了牛、猴、猪、人四株RV易感的MA104细胞和HT29细胞表面的受体成分，结果显示显著降低了RV的感染性。Guerrero等采用，环糊精去除MA104细胞表面的胆固醇

12、，再用RRV、nar3、Wa三株轮状病毒感染处理后细胞，发现这三株RV的感染性降低了90%刃。糖昔神经鞘脂类、胆固醇、蛋白质类能特异性地参与细胞膜脂筏的形成，而这些微脂筏结构能介导病毒进入细胞内部，从而影响RV的感染性。2.1轮状病毒感染的细胞表面受体RV感染具有特异的细胞嗜性,仅感染小肠绒毛顶端的肠细胞，说明存在特异性的细胞受体。在体外,RV也呈现了严格的组织细胞趋向性，它能结合不同的细胞系但是仅能有效地感染肾上皮细胞和肠上皮细胞2J1o虽然对病毒的分子生物学和结构生物学的研究都有了很大的发展，但是对于RV感染的细胞受体研究还不是很明确。通过对RV感染的敏感细胞表面受体分子进行研究，揭示了细

13、胞表面受体成分的另一个重要性质,即细胞表面影响病毒感染性的受体分子可以发生再生，如果在处理细胞后去除去垢剂，同时给予细胞生长的培养液，细胞可以在一定时间内逐渐地部分恢复以至完全恢复对轮状病毒的感染性。在这段时间内，细胞自身完成了细胞膜表面受体分子的合成、转运、聚集，从而有效地保证了病毒再次感染细胞。经研究发现,去垢剂处理后的细胞只需要8个小时就可完全恢复受体的再生，使得病毒重获感染敏感细胞的能力。2.2轮状病毒与细胞受体的相互作用许多细胞表面分子被认为是RV感染的受体成分,最新的研究显示完整RV颗粒与受体间的相互作用是复杂的。一个普遍的共识是受体介导的病毒感染模式，并且可能是RV外壳蛋白与多种

14、受体分子顺序性的并相互协调的细胞特异性方式介导的多阶段过程这些受体成分包括了唾液酸（SA,病毒感染细胞时最初吸附阶段的重要成分）、整合素（如a2gl、a4/3l、ax阳、av°3,在吸附后阶段与病毒外壳蛋白相互作用的）以及热应激同源蛋白70（Hsc70）o在RV与细胞受体的相互作用中，VP8*结构域被认为是与SA受体相结合的，而VP5*则与站81和Hsc70结合，VP7与a4/31、邳2和。昭3相互作用如。尽管对RV感染的细胞受体研究还存在一定的争议，但目前的观点认为动物株RV感染宿主细胞时需要细胞表面SA的存在才能有效地使病毒结合并感染细胞，而人株RV感染时则不需要SA的存在t4J

15、3-，4o在体外，研究者用神经氨酸酶（NA）处理MA104细胞，再用不同株RV感染细胞，通过间接免疫荧光实验检测病毒滴度，发现不同株的RV对细胞表面SA的依赖性是有区别的，借此可以将RV分为NA依赖型和非依赖型WE。然而，对于这样仅凭单一标准的分类,许多研究者提出了一些疑问，对NA处理不敏感也不能意味着病毒感染就是SA非依赖性的，8_19o这些研究更进一步地指出NA敏感株RV能够识别SA末端基序，而NA非敏感株RV则与SA中间基序相结合。对于大多数的RV而言，在病毒吸附阶段是需要SA存在的，研究人员推荐用神经节昔脂特异性来代替神经氨酸酶敏感性的说法"I。基于对这样的分类还没有一个明确

16、的定论，目前依然选用最初的定义即NA敏感性来进行论述C最新的研究发现,SA非依赖型RV,如人轮状病毒P4、P6和P8型能识别人类组织血型抗原（Humanhisto-bloodgroupantigens,HBGAs）oRV的VP8,蛋白参与识别HBGAs,该抗原作为RV吸附至宿主细胞的受体。HBGAs作为在轮状病毒的物种交叉传播中可能的因素，在轮状病毒感染与进化中起着重要的作用：22'231o利用晶体学技术,Hu等发现HBGAs结合人株RV的VP8*位置与SA结合动物株RV的VP8*位置是相同的，并且证实RV的VP8结构发生的细微变化使得它能够利用HB-GAs作为受体。这些研究提出了这样

17、一种可能性,即全球不同人群中采用基因学手段可控地表达不同HBGAs,能够影响一些特定人株RV对宿主的易感性和致病性。2.2.1的相互作用碳水化合物-蛋白质相互作用在病毒感染中具有重要的意义。宿主细胞糖蛋白、蛋白聚糖类和糖昔神经鞘脂类中的包含SA的糖基序被广泛地认为是病毒感染的受体2】。不同家族的病毒都利用包含SA的分子作为吸附受体,包括流感病毒？、腺病毒互、仙台病毒"和呼肠孤病毒等。在RV感染过程中,SA被认为是第一个而且是最重要的细胞受体之一，它通过与VP8,结合而发挥作用通过这种相互作用使得RV吸附至细胞表面，从而开始了RV感染细胞的第一步对于NA敏感型的RV（RRV和猪CRW-

18、8）来说，通过核磁共振光谱学的手段发现VP8*的核心部位与a-N-乙酰神经氨酸相结合，这个结合位点是高度保守的,不再需要其他糖基序的参与，而对于NA非敏感型的RV株（人DS.1和Wa）VP8,是否也能利用相同的位点还不是很明确顷。研究发现，通过不同浓度的神经氨酸酶处理RV感染敏感细胞，在NA敏感型的RV中病毒的感染性是降低的，而在NA非敏感型的RV中则不是很明显，说明了还存在其他主导该种病毒株感染的因素。虽然这种RV株对神经氨酸酶是抵抗的，从感染性上来看似乎并不对病毒的感染性产生很大的影响，事实上是该株病毒结合SA残基的位点与NA依赖型RV不同，不能被NA的处理所裂解，并不能确认SA对病毒的感

19、染性没有作用oVP8'与SA的第一步相互作用使得病毒粒子锚定在细胞表面，VP8*与SA基序相互识别结合后，病毒外壳蛋白随之发生构象改变，以利于搜寻后续更多的特异性受体分子从而介导病毒下一步的入胞过程5.IO.32。2.2.2VP5*与整合素的伍的相互作用NA依赖型RV通过VP8,与SA相结合后，病毒外壳蛋白发生微弱的构象改变，继而通过VP5*的DGE-结合基序使病毒顺序性地与第二个受体&发生相互识别并结合,结合位点位于VP5*的第308310位氨基酸残基*。对于NA非依赖型RV而言,用是病毒感染中最重要的受体之一，比如nar3株RV对昆具有高的亲和力。研究表明，包含DGE序列的

20、多肽和抗亚单位的抗体都能抑制RV的感染肉。%伙是RV感染的吸附受体还是吸附后受体，不同的研究者有不相同的结论。在对RV感染非敏感的CHO细胞上表达和缶亚单位后，使得RRV和WC3株RV的易感性提高了35倍。然而，整合素a2p.并没有增强病毒与细胞的结合能力，可能在病毒的吸附后阶段起作用O2.2.3VP7与展印、坤、坤的相互作用在RV吸附后阶段，外壳蛋白VP7能与a4&l、坤和av保相互作用。这3个整合素受体分别能与VP73个不同的基序LDV、GPR和CNP相互识别并结合,结合位点分别为237239,252-255和161169位氨基酸残基I""o抗a401、。必及叫

21、03单克隆抗体能有效地阻止病毒入侵细胞，但不能抑制病毒与细胞的结合，说明了挪1、Q浏2、坤这3个受体与RV的相互作用发生于病毒结合后阶段制。此外,通过在CHO细胞表面表达转染的g和保两个亚单位基因后，该细胞对轮状病毒的感染性比未转染前提高了34倍，而且将抗03的单克隆抗体与细胞孵育后，则这种感染性增强作用会得到抑制或。若联合使用这3种受体的单克隆抗体作用于细胞，则发现能有效地阻止病毒与细胞的结合，说明这三种整合素在病毒侵入细胞的不同阶段发挥着作用。2.2.4VP5.与Hsc70的相互作用Hsc70属于分子伴侣，是热休克蛋白（HSPs）家族成员之一，具有多种生物学功能，并且参与RV的感染539-

22、"。RV颗粒的VP5*与Hsc70特异性地相结合，结合位点位于该蛋白第642658位氨基酸残基。研究发现抗Hsc70的单克隆抗体能特异地阻断NA敏感型和NA非敏感型RV的感染性,使病毒感染性降低了80%。模拟VP5.的一段合成多肽（称为KID基序）能够抑制RRV的感染但不能阻断与细胞的结合，说明VP5*与Hsc70的结合也是发生在病毒入胞的吸附后阶段心。这种相互作用在NA敏感型和NA非敏感型RV的感染过程中都是存在的。通过不同的研究途径，Jolly等发现了在CRW株的VP5*存在一个相似的区域（650657位氨基酸残基）能够与MA104细胞表面的受体相结合,也代表了该株RV与Hsc7

23、0的结合区域包含在K1D基序的区域在不同株的RV中并不是保守的，而且与Hsc70的作用也没有序列特异性。令人可喜的发现是DLPs和合成肽（VP6氨基酸残基280297）能够在两种不同的细胞系中，以剂量依赖方式抑制不同RV株的感染性M3。DLPs所呈现出来的这种与Hsc70的相互作用提示RV粒子VP6在病毒感染细胞中也伴有一些功能。3总结从分子水平探讨并研究RV与敏感细胞表面受体的相互作用，进而深入研究RV的感染性质，对科学合理地指导轮状病毒疫苗的研发具有重要的现实意义。不同来源的RV株通过外壳蛋白与不同的细胞受体相互作用，从而介导病毒进入细胞内部完成增殖周期，然而很多环节的作用机制还不是很清楚

24、，需要进一步更加深入的探索研究。通过对RV敏感细胞的研究，可以揭示影响病毒感染性的因素,为分析并解决RV疫苗研发当中如何提高病毒对细胞基质的感染率及复制效率等问题提供一种新的解决思路。不仅如此,在病毒性疫苗研发过程中选择安全有效的细胞基质也是非常重要的环节和因素，这将会为其他更多病毒性疫苗的应用研发提供新颖的思路与理念。参考文献1KnipeDM,HowleyPM.Fields'VirologyM.4thed.,Philadelphia:LippincottWilliamsandWilkins,2001:1787-1833.2FlemingFE,GrahamKL,TakadaY,etal

25、.DeterminantsoftheSpecificityofRotavirusInteractionswiththea2plIntegrinJ.JBiolChern,2011,286(8)：6165-6174._3GroveJ,MarshM.Thecellbiologyofreceptor-mediatedvirusen-tryJ,JCellBiol,2011,195(7)：1071-1082.LopezS,AriasCF.EarlystepsinrotaviruscellentryJ.Cun-TopMicrobiolImmunol,2006,309:39-66.5TaubeS,JiangM

26、,WobusCE.Glycosphingolipidsasreceptorsfornon-envelopedvirusesJ.Viruses,2010,2(4)：1011-1049.6SettembreEC,ChenJZ,DormitzerPR,etal.AtomicmodelofaninfectiousrotavirusparticleJ.EMBOJ,2010,30(2)：408-416.7_ZdrateS,RomeroP,EspinosaR,etal.VP7mediatestheinteractionofrotaviruseswithintegrinav|J3throughanovelin

27、tegrin-bindingsiteJ.JVirol,2004,78(20)：10839-10847.8 FengN,LawtonJA,GilbertJ,etal.Inhibitionofrotavirusreplicationbyanon-neutralizing,rotavirusVP6-specificIgAmAbJClinInvest,2002,109(9):1203-1213.9 GuerreroCA,ZdrateS,CorkidiG,etal.BiochemicalcharacterizationofrotavirusreceptorsinMAI04cellsJ.JVirol,20

28、00,74(20):9362-9371.：10BakerM,PrasadBV.RotaviruscellentryJ.CurrTopMicrobiolImmunol92010,343:121-148.11TraskSD,KimIS,HarrisonSC,etal.ArotavirusspikeproteinconformationalintermediatebindslipidbilayersJ,.JVirol,2010,84(4)：1764-1770.12JDimitrovDS.Virusentry:molecularmechanismsandbiomedicalapplicationsJ.

29、NatRevMicrobiol,2004,2(2)：109-122.13CiarletM,CrawfordSE,EstesMK.Differentialinfectionofpolarizedepithelialcelllinesbysialicacid-dependentandsialicacid-independentrotavirusstrainsJj.JVirol,2001,75(23):11834-11850.14：KaliaM,JameelS.VirusentryparadigmsJ.AminoAcids,2011,41(5):1147-1157.15：CiarletM,Estes

30、MK.HumanandmostanimalrotavirusdonotrequirethepresenceofsialicacidonthesurfaceforefficientinfectivityfJ1.JGenVirol,1999,80(Pt4)：943-948.16_CiarletM,LudertJE,Irriza-GomaraM,etal.InitialinteractionofrotavimsstrainswithN-acetylneuraminic(sialic)acidresiduesonthesurfacecorrelateswithVP4genotype,notspecie

31、soforiginJ.JVirol,2002,76(8)：4087-4095.17M&ndezE,I0pezS,CuadrasMA,etal.EntryofrotavirusesisamultistepprocessJ.JVirol,1999,263(2)：450-459.18HaselhorstT,FiebigT,DyasonJC,etal.RecognitionoftheGM3gangliosideglycanbyRhesusrotavirusparticlesJJ.AngewChemIntEDEngl,2011,50(5)：1055-1058.19HaselhorstT,Flem

32、ingFE,DyasonJC,etal.SialicaciddependenceinrotavirushostcellinvasionJ.NatChemBiol,2009,5(2):91-93.20BandaK,KangG,VarkiA.SialidasesensitivityofrotavirusesrevisitedJ.NatChemBiol,2009,5(2)：71-72.21 HuangP,XiaM,TanM,etal.SpikeproteinVP8*ofhumanrotavirusrecognizeshisto-bloodgroupantigensinatype-specificma

33、nnerJ.JVirol,2012,86(9)：4833-4843.22 LiuY,HuangP,TanM,etal.RotavirusVP8*:Phylogeny,HostRange,andInteractionwithHisto-BloodGroupAntigensJ.JVirol,2012,86(18):9899-9910.23 HuL,CrawfordSE,CzakoR,etal.CellattachmentproteinVP8*ofahumanrotavirusspecificallyinteractswithA-typehisto-bloodgroupantigenJ.Nature

34、,2012,485(7397):256-259.24 GeS,WangZ.AnoverviewofinfluenzaAvirusreceptorsJ.CritRevMicrobiol,2011,37(2)：157-165.L25BurmeisterWP,GuilligayD,CusackS,etal.CrystalstructureofspeciesDadenovirusfiberknobsandtheirsialicacidbindingsitesLJ.JVirol,2004,78(14)：7727-7736._26MarkwellMA,PaulsonJC.Sendaivirusutiliz

35、esspecificsialyloli-gosaccharidesashostcellreceptordeterminantsJ.PNAS,1980,77(10):5693-5697._27JAriasCF,GuerreroCA,MendezE,etal.Earlyeventsofrotavirusinfection：thesearchforthereceptor(s)J.NovartisFoundSymp,2001,238：47-63.28IsaP,AriasCF,L6pezS.Roleofsialicacidsinrotavirusinfec-tionJ.JGlycoconj,2006,2

36、3(1/2)：27-37.29DoiinitzerPR,SunZYJ,Blixt0,etal.SpecificityandaffinityofsialicacidbindingbytherhesusrotavirusVP8'coreJ.JVirol,2002,76(20)：10512-10517.30KraschnefskiMJ,BugarcicA,FlemingFE,etal.Effectsonsialicacidrecognitionofminoacidmutationsinthecarbohydrate-bindingcleftoftherotavirusspikeprotein

37、iJ.Glycobiology,2009,19(3)：194-200.31DelormeC,BrussowH,SidotiJ,etal.Glycosphingolipidbindingspecificitiesofrotavirus:identificationofasialicacid-bindingepitopeJ.JVirol,2001,75(5)：22762287.32jSugiyamaM,GotoK,UemukaiH,etal.AttachmentandinfectiontoMA104cellsofavianrotavirusesrequirethepresenceofsialica

38、cidonthecellsurfacefj.JVetMedSci,2004,66(4)：461-463.：33KimIS,TraskSD,BabyonyshevM,etal.EffectofmutationsinVP5*hydrophobicloopsonrotaviruscellentryJJVirol,2010,84(12)：6200-6207.34YoderJD,TraskSD,VoPT,etal.VP5'RearrangeswhenRotavirusUncoatsJ.JVirol,2009,83(21)：11372-11377.35WolfM,VoPT,GreenbergHB.

39、RhesusrotavirusentryintoapolarizedepitheliumisendocytosisdependentandinvolvessequentialVP4conformationalchangesfJ.JVirol,2011,85(6)：2492-2503.363738CoulsonBS,LondriganSL,LeeDJ.Rotaviruscontainsintegrinligandsequencesanddisintegrin-likedomainthatareimplicatedinvirusentryintocellsJ.ProcNatlAcadSciUSA,

40、1997,94:5389-5394.GrahamKL,HalaszP,TanY,etal.Integrin-usingrotavirusesbindot2plintegrina2IdomainviaVP4DGEsequenceandrecognizeaXp2andaVp3byusingVP7duringcellentryJ.JVirol,2003,77(18):9969-9978.GuerreroCA,MendezE,ZdrateS,etal.Integrinotv03mediatesrotaviruscellentryJ.ProcNatlAcadSciUSA,2000,97(26):14644-14649.39 GuerreroCA,MorenoLP.RotavirusreceptorproteinsHsc70andintegrinavp3arelocatedinthelipidmicrodomainsofa