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1、实验六、细胞凝集反应实验六、细胞凝集反应目的要求目的要求 1 1、掌握细胞凝集反应的原理。、掌握细胞凝集反应的原理。2 2、掌握细胞凝集的实验方法。、掌握细胞凝集的实验方法。实验用品实验用品 光学显微镜、离心机、载玻片、生理盐水、光学显微镜、离心机、载玻片、生理盐水、PBSPBS液、液、土豆块茎、兔血红细胞土豆块茎、兔血红细胞( (无细胞核无细胞核) )实验原理实验原理 凝集素是一类含糖（少数例外）并能与糖专凝集素是一类含糖（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。在细胞膜的表面，组成细胞膜的分裂的作用。在细胞膜的表面，组

2、成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被（又糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被（又称为糖萼）。凝集素能与细胞外被中的糖分子称为糖萼）。凝集素能与细胞外被中的糖分子链接，在细胞间形成链接，在细胞间形成“桥桥”，从而引起细胞凝，从而引起细胞凝集。集。 大多数凝集素存在于储藏器官内，作为一种大多数凝集素存在于储藏器官内，作为一种氮源。氮源。实验内容和方法实验内容和方法一、一、2%2%兔血红细胞制备：兔血红细胞制备： 1ml1ml兔血加入兔血加入5ml5ml生理盐水，生理盐水，2000r/min,52000r/min,5分钟离心分钟离心2 2次次 后，按照红细胞体积比配制后，按照红细胞体积比配

3、制2%2%兔血红细胞悬液。兔血红细胞悬液。二、土豆块茎：二、土豆块茎： 1 1、提取凝集素：称取土豆去皮块茎、提取凝集素：称取土豆去皮块茎4g4g，加少许磷酸缓冲，加少许磷酸缓冲 液研磨成匀浆，最终加到液研磨成匀浆，最终加到30ml30ml磷酸缓冲液，浸泡磷酸缓冲液，浸泡2h2h， 浸出的粗提液含有可溶性土豆凝集素。浸出的粗提液含有可溶性土豆凝集素。 2 2、测定血凝活性：一滴、测定血凝活性：一滴 2%2%兔血红细胞悬液和一滴凝集兔血红细胞悬液和一滴凝集 素粗提液，静置素粗提液，静置1515分钟于低倍镜下观察。分钟于低倍镜下观察。 3 3、用磷酸缓冲液作为对照：一滴、用磷酸缓冲液作为对照：一滴 2%2%兔血红细胞悬液和兔血红细胞悬液和 一滴磷酸缓冲液，静置一滴磷酸缓冲液，静置1515分钟于低倍镜下观察。分钟于低倍镜下观察。 4 4、实验绘图、实验绘图显

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