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文档简介
1、.专题2课题3分解纤维素的微生物的别离学案【复习目的】1能简述纤维素酶的种类及作用。2说出刚果红染色法及其原理。 3能从土壤中别离出分解纤维素的微生物,理解这类微生物的应用。【课时安排】 一课时【复习过程】 活动一、寻根问底 探究之旅【探究点一】纤维素与纤维素酶1纤维素是一种由_首尾相连而成的_化合物,是含量最丰富的_类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中_是自然界中纤维素含量最高的天然产物。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用,这是因为它们可以产生_ _。2纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即_、_和_,前两种酶使纤维素分解成_,第三种酶将_分解成葡萄糖。考虑:
2、 构成纤维素和纤维素酶的单体分别是 和 。【探究点二】纤维素分解菌的挑选1挑选纤维素分解菌的方法是_法。该方法可以通过_反响直接挑选。2挑选原理:刚果红是一种_,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成_,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反响。当纤维素被_分解后,_ _无法形成,出现以_为中心的_,我们可以通过_ _来挑选纤维素分解菌。考虑:纤维素分解菌的代谢类型 【探究点三】别离分解纤维素的微生物的实验设计1土壤取样采集土样时,应选择富含纤维素的环境。如树林中多年落叶形成的腐殖土,多年积累的枯枝败叶等等。根据生物与环境的互相依存关系,在富含纤维素的环境中_的含量相对进步,因此,从这种土壤中
3、获得目的微生物的几率要高于普通环境。2选择培养1目的:增加纤维素分解菌的_,以确保可以从样品中别离到所需要的微生物。2操作方法:称取土样20 g,在无菌条件下参加装有30 mL培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在_上,在一定温度下振荡培养12 d,直至培养液变_。也可重复选择培养。3纤维素分解菌选择培养基属于_培养基,原因是_。培养基选择作用机制是以_为唯一碳源,只有_才能生存。假设设置一个对照实验说明选择培养的作用,应控制的变量是_。3梯度稀释:依次将培养液稀释101107倍。4将样品涂布到_纤维素分解菌的培养基上。常用的刚果红染色法有两种,一种是先培养_,再参加_进展颜色反响,另一种是在_时就
4、参加刚果红。挑选产生_的菌落,一般即为分解纤维素的菌落。课题延伸1为了确定别离得到的是纤维素分解菌,还需要进展_实验,纤维素酶的发酵方法有_发酵和_发酵。2纤维素酶测定方法,一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的_含量进展定量测定。考虑: 人体内环境中是否含有纤维素?血液中的葡萄糖可来源于纤维素的水解吗? 活动二、才能提升 破茧之旅【打破一】两种刚果红染色法比较比较工程操作方法优点缺点方法一先培养 再参加 显示出的颜色反响根本上是 的作用操作繁琐;刚果红会使菌落之间发生 方法二 时就参加 操作 ,不存在菌落混杂问题产生 的微生物也产生模糊透明圈;有些微生物能降解 ,形成明显的透明圈考虑:
5、方法一中NaCl的作用 。例1:以下对于刚果红染色法的表达,不正确的选项是 A可以先培养微生物,再参加刚果红进展颜色反响B可以在倒平板时就参加刚果红C既可以先培养微生物,再参加刚果红进展颜色反响,也可以在倒平板时就参加刚果红D可以将刚果红与培养基中其他物质一起放入培养基后再灭菌倒平板例2:鉴别纤维素分解菌时,可以使用刚果红对其染色,刚果红染色法有两种常用方法,两种刚果红染色法的结果是 A均会出现透明圈 B方法一出现,方法二不出现C均不会出现透明圈 D方法一不出现,方法二出现【打破二】纤维素分解菌的选择培养基和鉴别培养基的比较工程物理性质微生物的生长情况目的纤维素分解菌的选择培养基 培养基,不含
6、 ,利用液体培养基能使营养成分充分消耗,在挑选的同时,又有富集培养目的菌,进步浓度的作用以 作为碳源和能源的微生物可以正常生长,而其他绝大多数微生物不能正常生长通过培养增加纤维素分解菌的 纤维素分解菌的鉴别培养基 培养基,含凝固剂,刚果红染色法就是利用这种培养基,因为在这种培养基上能形成肉眼可见的菌落绝大多数微生物都可以正常生长鉴别微生物 例3:某同学进展纤维素分解菌的别离与鉴别,以下能说明实验操作标准的是 A未接种培养基上长出菌落B选择培养完毕后,选择培养基澄清C在长出菌落的培养基上,覆盖CR溶液后,没有出现透明圈D在添加有CR溶液的培养基上,菌落周围出现透明圈例4:以下关于别离纤维素分解菌
7、的实验的表达,有误的是 A经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B选择培养这一步可省略,但培养的纤维素分解菌少C菌液经稀释后,涂布到培养基上培养后,加刚果红染色D对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上【打破三】纤维素分解菌与尿素分解菌的别离及鉴定比较尿素分解菌的别离与鉴定纤维素分解菌的别离与鉴定别离条件 作为唯一氮源 作为主要碳源鉴定方法培养基中参加 ,变 在以纤维素为主要碳源的培养基上,利用 法,出现 鉴定原理分解尿素的微生物合成 ,将尿素分解产生氨,使PH ,参加酚红变红色分解纤维素的微生物产生 ,将纤维素分解为纤维二糖或葡萄糖,使纤维素-刚果红复合物降解而出现 步
8、骤土壤取样制备培养基样品梯度稀释涂布平板培养观察进一步鉴定土壤取样制备培养基 梯度稀释涂布培养 挑选菌落进一步鉴定 活动三、举一反三 超越之旅1别离分解纤维素的微生物与别离分解尿素的微生物的实验流程完全一样。 2别离分解纤维素的微生物用的培养基均为固体培养基。 3别离分解纤维素的微生物不需要对照实验。 4选择培养基可以“浓缩所需的微生物。 5.当今世界,能源和资源危机日趋严重,人们希望能借助纤维素酶将地球上最丰富占全球总生物量80%、最廉价的可再生资源纤维素转化为能直接利用的能源和资源。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下别离土壤中纤维素分解菌的实验流程: 土壤取样选择培养鉴别培养1请补充实验流程:_; 找不到适宜的取样环境,可采取的方法是_ _ 。2选择培养的目的是_ ;研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基
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