实验一染色体玻片标本的制作与染色体观察

1、辽宁师范大学生命科学学院辽宁师范大学生命科学学院张剑锋张剑锋1. 用具：用具：染色板、载玻片、盖玻片、指管、染色板、载玻片、盖玻片、指管、温度计、试剂瓶、滴瓶、镊子、解剖针和温度计、试剂瓶、滴瓶、镊子、解剖针和毛边纸等。毛边纸等。2. 药品：药品：无水酒精、无水酒精、70酒精、冰醋酸、对酒精、冰醋酸、对二氯苯或秋水仙素、醋酸钠、碱性品红、二氯苯或秋水仙素、醋酸钠、碱性品红、石碳酸、甲醛、山梨醇、纤维素酶、果胶石碳酸、甲醛、山梨醇、纤维素酶、果胶酶、中性树胶或油派胶酶、中性树胶或油派胶(Euparal)和二甲苯。和二甲苯。卡诺固定液的配制：卡诺固定液的配制：3 份无水酒精，加份无水酒精，加1 份

2、冰醋酸份冰醋酸(现配现现配现用用)。酶液的配制：酶液的配制：以以0.1mol/L 醋酸钠为溶剂，配成纤维素酶醋酸钠为溶剂，配成纤维素酶(2)和果胶酶和果胶酶(0.5)的混和液。的混和液。染色液的配制：染色液的配制：配方配方：石碳酸品红石碳酸品红(Carbol. fuchsin)染色液，先配母液染色液，先配母液A和和B。母液母液A：称取称取3克碱性品红，溶解于克碱性品红，溶解于100毫升的毫升的70酒精中酒精中(此液可此液可长期保存长期保存)。母液母液B：取母液取母液A 10毫升，加入毫升，加入90毫升的毫升的5石碳酸水溶液石碳酸水溶液(2周内周内使用使用)。石碳酸品红染色液：石碳酸品红染色液：

3、取母液取母液B 45毫升，加入毫升，加入6毫升冰醋酸和毫升冰醋酸和6毫升毫升37的甲醛。此染色液含有较多的甲醛，在植物原生质体培养过的甲醛。此染色液含有较多的甲醛，在植物原生质体培养过程中，观察核分裂比较适宜，后来在此基础上，加以改良的配方程中，观察核分裂比较适宜，后来在此基础上，加以改良的配方，称改良石碳酸品红，可以普遍应用于植物染色体的压片技术。，称改良石碳酸品红，可以普遍应用于植物染色体的压片技术。配方配方：改良石碳酸品红改良石碳酸品红取配方取配方石碳酸品红染色液石碳酸品红染色液2-10毫升，加入毫升，加入90-98毫升毫升45的醋酸的醋酸和和1.8克山梨醇克山梨醇(sorbitol)。

4、此染色液初配好时颜色较浅，放置二周。此染色液初配好时颜色较浅，放置二周后，染色能力显著增强，在室温下不产生沉淀而较稳定。后，染色能力显著增强，在室温下不产生沉淀而较稳定。1. 根尖取材方便，是观察植物染色体最常用的材料，根尖取材方便，是观察植物染色体最常用的材料，也可以用茎尖作为材料。也可以用茎尖作为材料。2. 植物细胞分裂周期的长短不同，在十到几十小时之植物细胞分裂周期的长短不同，在十到几十小时之间，温度影响分裂周期，对于一个不太熟悉的实验材间，温度影响分裂周期，对于一个不太熟悉的实验材料，最好在特定温度下长根，掌握有丝分裂高峰期，料，最好在特定温度下长根，掌握有丝分裂高峰期，以便得到更多的

5、有丝分裂的细胞。以便得到更多的有丝分裂的细胞。3. 前处理的目的是降低细胞质的粘度，使染色体缩短前处理的目的是降低细胞质的粘度，使染色体缩短分散，防止纺锤体形成，让更多的细胞处于分裂中期，分散，防止纺锤体形成，让更多的细胞处于分裂中期，一般在分裂高峰前，把根尖放到药剂中处理一般在分裂高峰前，把根尖放到药剂中处理3-4 小时。小时。可处理的药剂很多，如秋水仙素、对二氯苯、可处理的药剂很多，如秋水仙素、对二氯苯、8-羟基羟基喹啉等。喹啉等。4. 解离的目的是使分生组织细胞间的果胶质分解，细解离的目的是使分生组织细胞间的果胶质分解，细胞壁软化或部分分解，使细胞和染色体容易分散压平，胞壁软化或部分分解