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文档简介
1、玉米小斑病菌对碳氮源的利用材料与方法11病菌来源从河南省新乡市洪门镇的发病田中采集病叶,经分离培养、形态鉴定、致病性鉴定,确定病菌为玉米小斑病菌玉蜀黍平脐蠕抱。1.2 马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基的制备1L马铃薯葡萄糖琼脂培养基配方:200g马铃薯、20g葡萄糖、17g琼脂,补足蒸储水至1000mL。先将海争去皮的马铃薯切碎,加1000mL水煮沸O.Sh;用纱布滤去马铃薯,加水补充至1000mL,然后加糖、琼脂,加热使琼脂完全溶化后,趁热用纱布过滤,分装在三角瓶中,加棉塞后灭菌。1.3 不同碳源对病原菌菌丝生长的影响基础培养基选用组合培养基,根据等量代换原则,1L要出培养基配方为:20g蔗
2、糖、5g硝酸钾、2g磷酸钠、1g硫酸镁、12g琼脂,补足蒸播水至1000mL。分别用等量的葡萄糖、麦芽糖、淀粉、孚牖、甘露醇5种碳源与其中的蔗糖置换,配置成不同的碳源培养基,对照(CK)选用不加糖的培养基。从形成的菌落边缘挑取菌丝体移至到上述7种培养基的培养皿内,倒置于28qC恒温培养箱中,于接种7d后测量菌落直径,每个处理重复3次,求平均值。1.4 不同氮源对病原菌菌丝生长的影响。在"1.3”节中基础培养基的基础上,分别用等量的硫酸铁、蛋白陈、氯化核、尿素4种氮源与其中的硝酸钾置换以配置成不同的氮源培养基,对照(cK)选用不加氮源培养基。从形成菌落的边缘拟黑菌丝体移至到上述6种培养
3、基的培养皿内,倒置于28恒温培养箱中,于接种7d后测量菌落直径,每个处理重复3次,求平均值。2 .结果与分析2.1 不同碳源对病原菌菌丝生长的影响由表1可以看出,在供试的6种碳源中,菌丝都可以生长,但是不同碳源对病原菌菌丝生长影响不同。在接种7d后可见玉米小斑病菌对碳源的利用有明显的差异,麦芽糖、淀粉作为碳源时,病菌菌丝生长速度最快而且菌丝稠密,菌落平均直径分别为69.4、67.6mm;其次是蔗糖、孚腐、甘露醇,菌落平均直径分别为66.2、65.0、63.0mm;葡萄糖作为碳源时,病菌菌丝生长速度最慢且菌丝稀少,菌落平均直径为58.9mm。2.2 不同氮源对病原菌菌丝生长的影响由表2可以看出,
4、在供试的5种氮源中,菌丝都可以生长,但是不同氮源对病原菌菌丝生长的影响不同。在接种7d后,玉米小斑病菌对氮源的利用有明显的差异,氯化核作为氮源时,病菌菌丝生长速度最快而且菌丝稠密,菌落平均直径73.8mm;其次是蛋白月东,菌落平均直径为67.6mm;硝酸钾、硫酸核作为氮源时,病菌菌丝生长速度较慢且菌丝稀少,菌落平均直径分别为49.7、47.5mm;玉米小斑病菌在尿素为氮源培养基中生长最慢,菌落平均直径为27.7mm。3 .结论与讨论碳源是构成细胞和代谢产物中碳架的营养物质,也是玉米小斑病菌生理活动所需要的能源,合适的碳源更有利于病菌菌丝的生长。本试验结果表明,麦芽糖、葡萄糖、淀粉、学糜、甘露醇、蔗糖均可被该病原菌利用,其中淀粉、麦芽糖作为碳源时菌落平均直径最大,菌丝生长速度最快,且菌丝浓密健壮、长势强;葡萄糖作为碳源时,菌落平均直径最小,菌丝生长速度最慢。氮是蛋白质的基本成分,也是核酸和酶类的重要物质元素,玉米小斑病菌菌丝对供试的氮均可利用,但利用程度不同:以硫酸核、硝酸钾、蛋白月东、氯化核、尿素作为氮源时,氨化核、蛋白月东最有利于病原菌菌丝的生长,尿素最不利于菌丝的生长。因此可以看出,病原菌对碳源的利用以淀粉、麦芽糖最佳,对葡萄糖的利用较差;病原菌对氮源的利用以氯化铁、蛋白月东最佳,对尿素的利用较差。本研究探讨了不同的碳源和
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