高效薄层扫描法测定雷公藤搽剂中雷公藤内酯醇含量(精)

1、高效薄层扫描法测定雷公藤搽剂中雷公藤内酯醇含量更新日期：2009-12-21点击： 宁晓闽王宝奎刘锡钧提要运用高效薄层扫描法测定雷公藤搽剂中雷公藤内酯醇的含量，具有简便、快速、灵敏度高、重现性好等优点。关键词雷公藤搽剂；雷公藤内酯醇；薄层扫描法；含量测定 HPTLCDensitometric Determination of Triptolide (TL in Triptolide Liniment Ning Xiaomin,Wang Baokui, Liu Xijun Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Command of PLA,Fuz

2、hou350001AbstractHPTLC densitometric determination of Triptolide (TLin Triptolide Liniment is simple, rapid, sensitive and reproductive.Key wordsTriptolide liniment;Triptolide (TL;HPTLC-Densitometric;Determination.雷公藤搽剂是由雷公藤醋酸乙酯提取物配制成的透皮制剂，用于抗炎、镇痛、免疫抑制等。雷公藤醋酸乙酯提取物中雷公藤内酯醇是主要的有效成分，但也是主要的有毒成分 1。为了保证用药安

3、全有效，探讨本品的内在质量，制定质控标准，本文采用高效薄层扫描法对雷公藤搽剂中的雷公藤内酯醇进行含量测定。1实验部分 1.1 仪器与试剂： CS-9000型薄层扫描仪 (日本岛津公司，高效硅胶 G 板(青岛海洋化工厂，定量毛细管 (美国产；所用试剂均为分析纯；雷公藤内酯醇对照品 (福建省医科所提供，雷公藤醋酸乙酯提取物，雷公藤搽剂 (均自制。 1.2 薄层层析及扫描条件：高效硅胶 G 板为吸附剂，氯仿乙醚 (21 为展开剂 2，上行展开约 9 cm，取出晾干测定，用岛津 CS-9000 型薄层扫描仪定位，雷公藤内酯醇 Rf 值为 0.74，扫描条件为 S225 nm，反射锯齿扫描，摆幅 12

4、mm， Y 0.02，资料累积数为 1，寻峰参数为 2。 1.3 标准曲线的制备：精密称取减压干燥至恒重的雷公藤内酯醇对照品 1.022 mg 置 10 ml 容量瓶中，加无水乙醇溶解稀释至刻度，即得0.1022 g/ 的l对照品液。在高效硅胶 G 板上，用定量毛细管点样， 1、2、7、10 l的对照品液 (0.1022 g/，l以氯仿乙醚 (21 室温上行展开 9 cm，取出晾干按选定的扫描条件测定，结果见表 1。以点样量为横坐标，斑点积分值为纵坐标，在0.11.0g范围内呈线性关系，求得回归方程Y=0.0776+3.8928 10×-4 X. =0.9999。 表 1雷公藤内酯醇

5、扫描积分值点样量 ( 积l分面积1 2457 2 4754 512796 7 17738 10 25449 1.4稳定性实验：取对照品溶液5 l，按制备标准曲线的方法点样，层析，取出晾干后扫描，0.5、12、24、48h 扫描，测定结果见表2。实验表明稳定性好。表 2稳定性实验结果测定项 0.5h 12h 24h 48h积分面积12831.574 12789.324 12789.283 13024.471 =12844.250； CV=0.97%1.5雷公藤醋酸乙酯提取物中雷公藤内酯醇含量测定：精密称取减压干燥恒重的雷公藤醋酸乙酯提取物5.005 mg 置 10 ml 容量瓶中，无水乙醇溶解并

6、稀释至刻度，作为供试液。吸取供试液5 l和对照品液 2、 5 l点样，按选定的层析条件及扫描条件测定，外标2 点法计算。结果见表3。 表 3雷公藤醋酸乙酯提取物中雷公藤内酯醇含量测定点样量 ( 扫l描面积 样品中内酯醇 测定量 ( g/ 醋l酸乙酯提取物中 内酯醇含量(% 5 7310 0.05790.11575 7290 0.05800.11595 74270.05940.1187=0.1168%；CV=1.44% 1.6雷公藤醋酸乙酯提取物加样回收率测定：在供试液点样点上，加点雷公藤内酯醇对照品液(0.1022g/ l 2或5ll，测定。结果见表4。 表4雷公藤醋酸乙酯提取物加样回收率测定

7、样品中内酯醇含量 ( g加入内酯 醇量 ( g测定量 ( g回收量 ( g回收率 (% 0.3127 0.2044 0.51010.1974 96.58 0.3084 0.5110 0.8139 0.5055 98.92 0.3244 0.5110 0.8114 0.4870 95.30=96.93%； CV=1.89% 1.7 雷公藤搽剂含量测定：用定量毛细管吸取搽剂10 l，对照品液 (0.1022g/ 、l52 l点样，按选定的层析及扫描条件测定，外标2 点法计算含量。结果见表5。 表 5 搽剂中雷公藤内酯醇含量测定 点样量 ( 扫l描面积 样品中内酯醇含量 ( g/ 搽l剂中内酯醇含量

8、 ( ×10-3% 10 5934 0.0243 2.4310 60120.0246 2.46 10 6084 0.0249 2.49 =2.4610-3%；×CV=1.22% 1.8 雷公藤搽剂加样回收率测定：在搽剂点上加点对照品液 (0.1022 g/ 、l25 l。结果见表6。表6搽剂中加样回收率测定样品中含内酯醇( g加入酯醇量 ( g测定量 ( g回收量 ( g回收率 (% 0.3777 0.2044 0.5741 0.1964 96.09 0.3716 0.5110 0.8586 0.4870 95.300.3504 0.5110 0.8498 0.4994 97.74 =96.38%；CV=1.29% 2小结与讨论2.1在高效硅胶G 板上，用氯仿乙醚(21 为展开剂上行展开约9 cm，雷公藤内酯醇被分离得较好， Rf 值为 0.74。 2.2经用岛津 CS-9000 型薄层扫描仪进行光谱测定，雷公藤内酯醇在 225 nm 处有最大吸收，故选用样品测定波长为225 nm，因干扰小，采用单波长扫描。 2.3 雷公藤内酯醇斑点不经显色，用 CS-9000 型薄层扫描定位斑点在 48 h 内定时测定，结果稳定。 2.4 本法灵敏、简便、快速、稳定性好，结果满意。 作者单位：宁晓闽，女， 1950 年生，主管药师 作者单