血管紧张素转换酶基因多态性与佳木斯地区阿尔茨海默病的关系

1、血管紧张素转换酶基因多态性与佳木斯地区阿尔茨海默病的关系张淑萍1，宣兆博1，黄作义1，刘英芹2，刘 擎1，王翔宇1，吴成吉1，杨丽敏1，Zeeshan Abbas3 (1佳木斯大学附属第一医院神经科，黑龙江省佳木斯市 154002；2佳木斯大学遗传教研室，黑龙江省佳木斯市 154002；3巴基斯坦拉合尔大学，旁遮普省拉合尔市 54660)文章亮点：实验的特点为首次测定佳木斯地区的血管紧张素转换酶基因I/D多态性，Rigat法将部分ID型错定为DD型，国内报道的人群血管紧张素转换酶基因DD型频率偏高，与使用此方法有关。课题应用3条引物法测定，结果准确。关键词：组织构建；组织工程；血管紧张素转换酶

2、；阿尔茨海默病；基因多态性；高血压病；黑龙江省自然科学基金主题词：肽基二肽酶A；阿尔茨海默病；基因型；基因频率；高血压基金资助：黑龙江省自然科学基金项目(C201242)；黑龙江省教育厅基金面上项目(12511562)摘要背景：血管紧张素转换酶作为肾素-血管紧张素系统的关键酶，通过影响P物质降解等机制参与阿尔茨海默病的发生与发展。目的：分析血管紧张素转换酶基因多态性与阿尔茨海默病的关系，探讨性别、高血压病对两者关系的影响。方法：纳入96例阿尔茨海默病患者，102例年龄、性别等具有可比性的正常人作为对照组。采集血液，抗凝后进行DNA抽提，用PCR反应进行扩增，20 g/L琼脂糖凝胶电泳，紫外光下

3、观察结果，分别计算II、DD型纯合子及ID杂合子基因型及基因型频率。在此基础上，综合分析收集的相关临床资料，进行性别及血压分层分析。结果与结论：阿尔茨海默病组与对照组血管紧张素转换酶基因型和等位基因频率差异有显著性意义，伴有高血压的阿尔茨海默病患者与对照组基因型和等位基因频率差异有显著性意义；不同性别分层及血压正常的阿尔茨海默病组与对照组基因型和等位基因频率差异无显著性意义。提示血管紧张素转换酶基因多态性与阿尔茨海默病的发病有关，其中II基因型可能是阿尔茨海默病发病的危险因素，血管紧张素转换酶基因型可能是阿尔茨海默病伴高血压病的危险因素。张淑萍，宣兆博，黄作义，刘英芹，刘擎，王翔宇，吴成吉，杨

4、丽敏，Zeeshan Abbas. 血管紧张素转换酶基因多态性与佳木斯地区阿尔茨海默病的关系J.中国组织工程研究，2014，18(2):259-264.The association between angiotensin converting enzyme gene polymorphism and Alzheimers disease in Jiamusi region Zhang Shu-ping1, Xuan Zhao-bo1, Huang Zuo-yi1, Liu Ying-qin2, Liu Qing1, Wang Xiang-yu1, Wu Cheng-ji1, Yang Li-

5、min1, Zeeshan Abbas3 (1Neurology Department of the First Hospital Affiliated to Jiamusi University, Jiamusi 154002, Heilongjiang Province, China; 2Department of Heredity, Jiamusi University, Jiamusi 154002, Heilongjiang Province, China; 3University of Lahore, Lahore 54660, Pakistan)张淑萍，女，1969年生，黑龙江省

6、佳木斯市人，汉族，2004年佳木斯大学毕业，硕士，硕士生导师，副教授，副主任医师，曾留学日本高知大学医学部，主要从事阿尔茨海默病相关研究。通讯作者：黄作义，教授，主任医师，佳木斯大学附属第一医院神经内科，黑龙江省佳木斯市 154002 doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2014.02.016 中图分类号:R318文献标识码:B文章编号:2095-4344(2014)02-00259-06稿件接受：2013-11-18Zhang Shu-ping, Master, Masters supervisor, Associate profe

7、ssor, Associate chief physician, Neurology Department of the First Hospital Affiliated to Jiamusi University, Jiamusi 154002, Heilongjiang Province, ChinaCorresponding author: Huang Zuo-yi, Professor, Chief physician, Neurology Department of the First Hospital Affiliated to Jiamusi University, Jiamu

8、si 154002, Heilongjiang Province, ChinaAccepted: 2013-11-18AbstractBACKGROUND: Angiotensin-converting enzyme as a key enzyme of the renin-angiotensin system, through the degradation effects of substance P mechanism, is involved in the occurrence and development of Alzheimers disease.OBJECTIVE: To re

9、search the relationship between angiotensin-converting enzyme gene polymorphism and Alzheimers disease in Jiamusi region, as well as the effect of gender and hypertension on the relationship.METHODS: This case-control study included 96 Alzheimers disease patients. Another 102 subjects served as cont

10、rols coming from the same area and in the same environmental condition. DNA segments were amplified using PCR in 20 g/L agarose gel electrophoresis and observed under ultraviolet lamp. II, ID, DD genotypes and genotype frequencies were calculated for statistical analysis. On this basis, according to

11、 clinical data collected, we investigated association of Alzheimers disease with hypertension and gender.RESULTS AND CONCLUSION: There was significant difference between Alzheimers disease patients and controls in angiotensin-converting enzyme genotypes and allele frequency. There was statistically

12、significant difference between Alzheimers patients with hypertension and controls in angiotensin-converting enzyme genotypes and allele frequency. There was no statistical difference between Alzheimers disease patients with different genders and controls in angiotensin-converting enzyme genotypes an

13、d allele frequency. These findings indicate that there are some relationships between angiotensin-converting enzyme polymorphism and Alzheimers disease. II genotype is a risk factor for Alzheimers disease, angiotensin-converting enzyme II genotype is a risk factor for Alzheimers disease with hyperte

14、nsion.Subject headings: peptidyl-dipeptidase A; Alzheimer disease; genotype; gene frequency; hypertensionFunding: the Natural Science Foundation of Heilongjiang Province, No. C201242; The Fund Project of Heilongjiang Provincial Department of Education, No. 12511562 Zhang SP, Xuan ZB, Huang ZY, Liu Y

15、Q, Liu Q, Wang XY, Wu CJ, Yang LM, Zeeshan Abbas. The association between angiotensin converting enzyme gene polymorphism and Alzheimers disease in Jiamusi region. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 2014;18(2):259-264.0 引言 Introduction阿尔茨海默病作为高发于群体老年期常见的痴呆类型，其血管病理变化是认知功能障碍的重要病理基础1，有研究指出2-7：血管紧张素转换酶可能通

16、过影响P物质降解等机制参与-淀粉样蛋白的降解或者通过影响血管紧张素的水平8-10，进一步抑制乙酰胆碱的释放使认知功能受损伤。从基因上讲，位于第17号染色体长臂的2区3带血管紧张素转换酶基因第16个内含子一段本身长度为287 bp的alu序列的插入(I)或者缺失(D)所导致的血管紧张素转换酶基因I/D多态性，不仅影响着血浆血管紧张素转换酶的水平，也通过参与高血压病、2型糖尿病等阿尔茨海默病的高危因素的进程与阿尔茨海默病有着密切的联系11。同时基因多态性是一个与生俱来的基因标志，不会受到取样时间、疾病不同及不同药物治疗的影响，可以说它是很理想的标志物，为进一步研究工作提供了方便12。目前，血管紧张

17、素转换酶基因I/D多态性已成为多种心血管病病因研究的热点之一，尤其与原发性高血压的研究开展的较多，但是国内外研究的结论不一致13。佳木斯地区年均气温较低，冬季气候寒冷，人们喜食高盐、高脂肪食物，这些环境因素在一定程度上影响高血压发生。大量研究显示，遗传因素比环境因素具有更独特的意义。课题选择的对象为原藉及出生地、生长地均是佳木斯的汉族人，而且影响血压的环境因素较一致，有较大的遗传同源性，旨在探讨佳木斯地区血管紧张素转换酶基因多态性与阿尔茨海默病的关系，并对可能影响上述关系的因素加以分析。1 对象和方法 Subjects and methods 设计：对比观察试验。时间及地点：于2010年9月至

18、2013年1月在佳木斯大学附属第一医院中心实验室完成。对象：主要参照美国神经病学、语言障碍和卒中-老年性痴呆和相关疾病学会(NINCDS-ADRDA)的诊断标准14-15，在佳木斯大学附属第一医院神经科门诊及住院部选取散发性阿尔茨海默病患者96例，男36例，女60例，年龄(70.5±6.1)岁；其中46例伴高血压病，50例不伴高血压病；均为汉族。受试对象由2名主治及以上医师综合临床资料及检查手段做出诊断。佳木斯大学附属第一医院伦理委员会批准试验方案，研究符合赫尔辛基宣言。纳入标准：符合美国神经病学、语言障碍和卒中-老年性痴呆和相关疾病学会(NINCDS-ADRDA)的阿尔茨海默病诊断

19、标准者。经美国精神医学会精神障碍诊断和统计手册第版标准诊断为痴呆(DSM-)，Hackinski缺血评分量表<4分者。自愿接受临床检查及心理学测试，并能配合相关检查者。对治疗及试验方案知情同意，且得到医院伦理委员会批准者。排除标准：结合患者病史及相应临床检查，排除能影响神经功能的内科疾病，如甲亢、酒精中毒性脑病、糖尿病及其他严重的脏器疾病。排除有严重的精神类疾病(如精神分裂症，抑郁症等)、主要血管脑卒中史和严重头部外伤者，以及听力下降严重及言语障碍者。对照组：共102例，男35例，女67例；年龄(71.3±6.4)岁。无记忆力下降的主诉，无严重的躯体疾病及精神病史。其中52例伴

20、高血压病，50例不伴高血压病。对试验方案知情同意，且得到医院伦理委员会批准。材料：十二烷基硫酸钠(SDS)(美国Amresco公司)，基因引物(上海生工生物工程技术有限公司)，三羚甲基氨基甲烷(Tris) (天津市凯通化学试剂有限公司)，RT-PCR 试剂盒、Marker(DL500)、Taq聚合酶、10xBuflbr、2MgCl2 、dNTP(大连宝生物工程公司)，琼脂糖(上海怡成生物科技有限公司)，体积分数30%H2O2(沈阳市华东试剂厂)，HCl(新光化工厂制剂厂)，PCR扩增仪(Biometre 公司)，DU800核酸蛋白分析仪(德国 Beckman Coulter 公司)，恒温水浴箱

21、：HH-W21-4205(上海跃进医疗器械厂)，离心机TDZ5-WS、GL-21M 高速冷冻离心机、TGL-800 微量台式高速离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司)，超净工作台(苏州净化设备有限公司)，MDF-192，-80 冰箱(SANYO)，JA-2003 电子分析天平(沈阳龙腾电子仪器有限公司)，Q/SUUA01-2008微量进样器(上海高鸽工贸有限公司)，DYC-33B 型水平电泳槽、DYC-8B 型稳压稳流型电泳仪(北京八一仪器厂)，F2Q-2 型漩涡混合器(江苏泰县医疗器械厂)，YLN-2000 凝胶成像分析系统(北京亚力恩机电技术研究所)，Spectrumlab22PC 分光光度

22、计(上海棱光技术有限公司)。方法：患者存在的认知功能障碍应用简易智能精神状况量表(MMSE)评分16，检查过程中尽量避免外界干扰。血压资料：高血压值的分界值为收缩压140 mm Hg (1 mm Hg=0.133 kPa)和(或)舒张压90 mm Hg；或既往有高血压病目前用抗血压药物控制治疗。临床指标采集及检测：所有受试者清晨测量血压，均空腹时采集静脉血8-10 mL，分装于两抗凝管。其中一管送检验科测定血糖、胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白。另一管进行基因型检测。基因型检测：严格按照DNA试剂盒步骤提取DNA。引物设计：第1对：PCR产物大小：490或190 bp，上游：5-CTG GAG

23、ACC ACT CCC ATC CTT TCT-3，下游：5-GAT GTG GCC ATC ACA TTC GTC AGAT-3。第2对：PCR产物大小：335 bp，上游：5-TGG GAC CAC AGC GCC CGC CAC TAC -3，下游：5-TCG CCA GCC CTC CCA TGC CCA TAA-3。反应体系：PCR反应体系总体积25 L。反应条件：95 预变性2 min；94 变性30 s，59 退火30 s，72 延伸45 s，循环30次，72 延伸9 min；即刻4 保存。PCR扩增产物检测：20 g/L琼脂糖凝胶做水平电泳检测PCR产物(电压100 V，时间

24、30 min)，EB染色，紫外光下观察结果，拍照记录(图1A)。将所有DD型基因的标本进行第2次PCR，反应条件： 94 预变性5 min；94 变性1 min，67 退火1 min， 72 延伸1 min，循环30次，72 延伸7 min；反应结束，即刻4 储存17。再次电泳，步骤同上(图1B)。B500200图1 PCR扩增产物检测结果Figure 1 PCR amplified product detection图注：(1) 图中A为M带为Marker；3的基因型是II；1的基因型是DD；2的基因型是ID。PCR 产物长度为 490 bp，称为插入型( II型)；产物长度为 190 bp

25、，称之为缺失型(DD 型)；出现的2条带，产物长度即有490 bp，又有190 bp的为杂合型(I/D型)。(2) 图中B为2，4，7带是ID基因型；1，3，5，6是DD基因型。第2次电泳后无条带者为真DD基因型，出现335 bp条带者实为ID基因型。AbpM 1 2 3 4 5 6 7 5004003002001 2 3 Mbp490190bp335 bp主要观察指标：分别计算II、DD型纯合子及ID杂合子基因型及基因型频率。在此基础上，综合分析收集的相关临床资料，进行性别及血压分层分析。统计学分析：本文作者应用SPSS 17.0统计软件进行数据处理，计量资料结果用±s表示，组间均

26、数比较采用t 检验，P < 0.05为差异有显著性意义。用2检验进行基因型和等位基因频率的比较并检验其分布是否符合遗传平衡定律(Hardy-Weinberg)。计算基因型风险率用比值比(OR)及其95%CI。2 结果 Results2.1 参与者数量分析 按意向性处理，纳入96例阿尔茨海默病患者，102例正常人作为对照组，全部进入结果分析，无脱落。2.2 一般资料及量表评分 阿尔茨海默病组和对照组除指标MMSE评分外，2组年龄、性别、血糖、血脂水平等基线资料比较差异无显著意义(P > 0.05)，具有可比性(表1)。2.3 Hardy-weinberg计算 阿尔茨海默病组，2=0.

27、391，P > 0.05；对照组，2=0.037，P > 0.05。血管紧张素转换酶基因在阿尔茨海默病组和对照组分布符合Hardy-weinberg平衡。2.4 基因型和等位基因分布的比较 阿尔茨海默病组与对照组之间基因型及等位基因频率差异有显著性意义。阿尔茨海默病组的II基因及I等位基因频率均高于对照组，差异有显著性意义(2=8.17，P < 0.05；2= 8.35，P < 0.05)。等位基因I/D的OR值为1.82，95%CI为1.21-2.73(表1)。表1 阿尔茨海默病组与对照组一般资料、量表评分、基因型和等位基因的分布比较Table 1 Compariso

28、n of general information, scale scores, genotype and allele distribution between Alzheimers disease and control groups 项目阿尔茨海默病组(n=96)对照组(n=102)年龄(±s，岁)70.50±6.1071.30±6.40性别(男/女, n)36/6035/67MMSE评分(±s)21.30±2.20a28.40±1.60血糖(±s，mmol/L)4.76±0.745.05±0.35三

29、酰甘油(±s，mmol/L)1.29±0.471.32±0.47胆固醇(±s，mmol/L)4.52±0.764.66±0.56低密度脂蛋白(±s，mmol/L) 2.47±0.672.63±0.64基因型(n/%) II38/39.6a25/24.5ID47/49.051/50.0DD11/11.426/27.5等位基因(n/%) I123/64.1a101/49.5D69/35.9103/50.5表注：2组基线资料比较差异无显著意义(P > 0.05)。阿尔茨海默病组的II基因及I等位基因频率均

30、高于对照组，差异有显著性意义(2=8.17，P < 0.05； 2= 8.35，P < 0.05)。与对照组比较，aP < 0.05。2.5 不同性别之间比较 男性在阿尔茨海默病组和对照组间基因型和等位基因频率差异无显著性意义(2=4.070， P > 0.05；2=2.556，P > 0.05)。女性在阿尔茨海默病组和对照组间基因型和等位基因频率差异亦无显著性意义 (2=5.348，P > 0.05；2=3.632，P > 0.05)(表2)。性别n基因型等位基因 IIIDDDID男阿尔茨海默病组3615/0.41719/0.5282/0.05549

31、/0.68123/0.319对照组359/0.25719/0.5437/0.20037/0.529 33/0.471女阿尔茨海默病组6023/0.38328/0.4679/0.15074/0.61746/0.383对照组6716/0.23932/0.47819/0.28364/0.47870/0.522表注：男性在阿尔茨海默病组和对照组间基因型和等位基因频率差异无显著性意义(P > 0.05)，女性在阿尔茨海默病组和对照组间基因型和等位基因频率差异亦无显著性意义(P > 0.05)。表2 不同性别观察对象血管紧张素转换酶的基因型和等位基因频率比较Table 2 Comparison

32、 between the genotypes and allele frequencies of angiotensin-converting enzyme of different genders (n/%) 2.6 不同血压之间比较 阿尔茨海默病组高血压患者II基因型及I等位基因频率均高于对照组高血压患者 (2=12.27，P < 0.05；2=13.13，P < 0.05)，差异有显著性意义。血压正常患者在阿尔茨海默病组和对照组间基因型和等位基因频率比较差异无显著性意义(2=5.98， P > 0.05；2=1.40，P > 0.05)。阿尔茨海默病组组内的高血压

33、患者和血压正常患者间基因型和等位基因频率比较差异无显著性意义(2=1.61，P > 0.05；2=1.50，P > 0.05)。对照组组内高血压患者和血压正常患者间基因型和等位基因频率比较差异无显著性意义(2=2.36，P > 0.05；2=2.45，P > 0.05)(表3)。表3 高血压组与血压正常组观察对象血管紧张素转换酶的基因型和等位基因频率比较Table 3 Comparison of genotypes and allele frequencies of angiotensin-converting enzyme between the groups of

34、hypertension and normotension (n/%) 血压分组 n基因型 等位基因IIIDDDID高血压组阿尔茨海默病组对照组465221/0.456a21/0.456 4/0.08863/0.685a29/0.31510/0.19226/0.50016/0.30846/0.44258/0.558血压正常组阿尔茨海默病组对照组505017/0.34026/0.520 7/0.14060/0.60040/0.40015/0.28025/0.58010/0.14055/0.55045/0.450表注：阿尔茨海默病组高血压患者II基因型及I等位基因频率均高于对照组高血压患者(P &

35、lt; 0.05)。与对照组比较，aP < 0.05。3 讨论 Discussion血管紧张素转换酶基因多态性与阿尔茨海默病的联系一般有以下几种观点：首先，血管紧张素转换酶基因多态性通过调节血管紧张素转换酶的水平而从多个方面影响阿尔茨海默病发生发展。第一，参与-淀粉样蛋白的代谢：血管紧张素转换酶是中枢系统P物质的主要降解酶之一，P物质能通过调控脑啡肽酶脑部主要降解-淀粉样蛋白的活性，血管紧张素转换酶还能降低活体细胞分泌的-淀粉样蛋白水平18；同时血管紧张素转换酶能将-淀粉样蛋白1-42转化为比其神经毒性有所降低的-淀粉样蛋白1-40，降低-淀粉样蛋白1-42/-淀粉样蛋白1-40比例，减

36、少-淀粉样蛋白的异常沉积。第二，影响与阿尔茨海默病发病相关的神经递质：血管紧张素能够增加钾介导的乙酰胆碱释放的抑制作用，胆碱能神经元变性丢失致胆碱能乙酰转移酶和乙酰胆碱酯酶活性明显降低，记忆过程中的主要神经递质-乙酰胆碱的合成，储存及释放减少，即乙酰胆碱神经递质系统异常后，最终导致痴呆的形成。第三，与阿尔茨海默病血管源性病因密切相关19：高血压是阿尔茨海默氏病的独立危险因素20，原发性高血压，胰岛素抵抗和血管紧张素三者间有密切的相关性。血浆血管紧张素 水平过剩，诱发和促进原发性高血压的发生与发展，可使机体组织降低对胰岛素的敏感程度，产生胰岛素抵抗，后者促发高胰岛素血症，肾素-血管紧张素系统随之

37、被过度激活，同时骨骼肌血管也降低对胰岛素的舒张反应性，而增强对缩血管物质的反应性，与高血压相互促进。其次，血管紧张素转换酶基因多态性本身与阿尔茨海默病及高血压病均有关联，而高血压病又是阿尔茨海默病的危险因素，3者的关系复杂。目前国内外研究血管紧张素转换酶基因I/D多态性与阿尔茨海默病的关系有大量报道，但是结果不尽相同。Kehoe等第1次报道血管紧张素转换酶ID多态性和阿尔茨海默病相关, 认为D等位基因为保护因素21。有研究显示携带血管紧张素转换酶 DD 型等位基因者能增加了认知功能或执行功能损伤的易患性22。Amar等23不支持上述结论，发现血管紧张素转换酶 DD型基因增加了相关脑白质疏松的危

38、险，损害了认知功能及促进痴呆的发生。还有研究认为ID和II型均增加了阿尔茨海默病发生风险的结论，其中I等位基因可能起主要作用24。Buss等25在对欧洲阿尔茨海默病患者及对照者的血管紧张素转换酶I/D多态性研究认为由于部分报道基因型分布不符合Hardy-weinberg平衡定律,造成研究结果的差异，他发现血管紧张素转换酶基因多态性与阿尔茨海默病之间不存在肯定的联系，Carbonell等26支持上述观点，认为血管紧张素转换酶基因多态性与阿尔茨海默病之间无显著相关。推测造成以上研究差异的原因主要有：促使阿尔茨海默病发病的血管性因素如高血压病、动脉硬化、糖尿病及它们相互之间的影响，不论是阿尔茨海默病

39、及其相关血管性病因均为多因素疾病，同时血管紧张素转换酶 I/D多态性与以上疾病的相关性还不明确。基因多态性受遗传背景，地域、种族等因素影响。需要更大样本的研究。肾素-血管紧张素系统中多种成分均有基因多态性，他们相互之间的作用及与阿尔茨海默病的关联尚不明确。研究时入组选择的标准不尽相同，样本不能有全面的代表性。本文在试验方法上采用校正两对引物法27，能将非真正的DD型基因通过第2对引物与目的基因结合准确筛选出来，可以更准确的测定血管紧张素转换酶的基因型，从而结果更加可信。本试验在对96例阿尔茨海默病患者基因分析后发现与对照组相比3种基因型差异有显著性意义，其中II基因型和I等位基因频率均增高，差

40、异有显著性意义。与Kolscha等28研究的结果一致，I基因可能是阿尔茨海默病发病的高危因素。血管紧张素转换酶基因多态性受多因素影响，有报道称血管紧张素转换酶基因多态性与相关疾病研究时发现与性别差异相关29，并发现 DD 基因型在男性中的频率大于女性。在一项血管紧张素转换酶基因多态性与原发性高血压联系的研究发现血管紧张素转换酶基因I/D多态性只与男性组高血压病相关。本试验中对2个实验组进行性别分析发现不论男性女性阿尔茨海默病组与对照组相比基因型及等位基因频率差异无显著性意义。这与对日本群体性别分层研究的结论有一致性30。造成上述研究结果不同的原因可能是存在地域差异，或者样本数尚小而造成抽样的差

41、异。Spence等31发现治疗单纯的高收缩期血压可以使阿尔茨海默病的患病风险降低1/2。还有回顾性分析老年人(79-85岁)，在发展为痴呆的患者中，多数在之前就有15年左右的较明显的高血压过程。而就高血压与血管紧张素转换酶基因多态性的研究中他们之间的不确定性关系也是近年来的研究热点32-34。在本试验中，通过对血压因素的分析发现，在高血压组，阿尔茨海默病患者与对照组的II基因型和I等位基因频率相比均有增高，差异有显著性意义。在血压正常组，阿尔茨海默病患者与对照组基因型和等位基因频率比较差异无显著性意义。但是由于本文中单纯收缩压增高及单纯高舒张压增高型高血压例数较少，没有进一步进行关于收缩和舒张

42、压的血压分层分析。而组内比较阿尔茨海默病组及对照组的高血压患者和血压正常患者基因型和等位基因频率时发现差异均无显著性意义。研究结果提示，II基因型或者I等位基因可能是高血压患者发展成阿尔茨海默病的高危因素；而单纯考虑高血压疾病时，未发现血管紧张素转换酶基因多态性与高血压病有明显相关性35-36。II基因型怎样同高血压病相互影响促使阿尔茨海默病的发生及进展。目前尚不能肯定确切原因，需要深入研究证实。临床研究发现用血管紧张素转换酶类药物治疗合并高血压病的阿尔茨海默病患者能延缓认知功能的下降，在一定程度控制了其情绪障碍的发展37，抑制阿尔茨海默病发生后脑内免疫炎症过程38，甚至用血管紧张素转换酶类药

43、物干预高血压病能使其罹患阿尔茨海默病的风险降 低39。本实验发现血管紧张素转换酶基因I/D多态性与阿尔茨海默病合并高血压病患者有相关性，从基因角度在一定程度上解释了上述临床现象；同时对阿尔茨海默病的预测也起到一定作用。关于II基因型与阿尔茨海默病及高血压病3者的关系下一步研究应继续扩大样本，从高血压病与阿尔茨海默病病理生理改变的契合点，如血脑屏障的通透性改变出发，或者从阿尔茨海默病特征性病理改变-淀粉样蛋白沉积着手，进一步深入研究血管紧张素转换酶基因I/D多态性与上述疾病的相互作用。目前也有研究发现，血浆血管紧张素转换酶的水平与脑内循环的血管紧张素转换酶水平有差异40，血管紧张素转换酶基因多态

44、性究竟多大程度上影响着脑内的血管紧张素转换酶水平，还需要进一步研究。结论：血管紧张素转换酶基因多态性与阿尔茨海默病的发病有关，其中II基因型可能是阿尔茨海默病发病的危险因素。性别差异对血管紧张素转换酶基因多态性与阿尔茨海默病关联无特异性影响。血管紧张素转换酶II基因型是阿尔茨海默病伴高血压病的危险因素，关于II基因型与阿尔茨海默病及高血压病三者的关系，需要进一步研究。致谢：谨向黑龙江省佳木斯大学遗传学教研室及神经干细胞研究所各位研究人员致以诚挚的谢意。作者贡献：通讯作者设计试验方案指导第一作者完成实验、论文写作与修改，第二、四、五、六作者辅助试验，第七、八作者协助论文修改，第九作者修改论文翻译

45、部分。利益冲突：文章及内容不涉及相关利益冲突。伦理要求：伦理要求：所有受试对象或法定监护人签署知情同意书，血管紧张素转换酶治疗方案获佳木斯大学附属第一医院伦理委员会批准，研究符合赫尔辛基宣言。医生资质：临床实验参研人员具有主治医师以上专业技术职称，有从事基因多态性研究领域工作的经验。课题的实施者是临床医师，经过相关培训，具有从事PCR-RFLP技术工作所要求的资质。学术术语：多态性-指在一个生物群体中,同时和经常存在2种或多种不连续的变异型或基因型或等位基因,亦称基因多态性或遗传多态性。作者声明：文章为原创作品，无抄袭剽窃，无泄密及署名和专利争议，内容及数据真实，文责自负。4 参考文献 Ref

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