土壤中多种磺酰脲类除草剂残留量的测定液相色谱-串联质谱法

1、海南省地方标准?豆芽中 4-氯苯氧乙酸钠、 6-苄基腺嘌呤、 2， 4- 滴、赤霉素、萘乙酸残留量的测定 液相色谱质谱联用法? 编制说明 征求意见稿一、标准起草的根本情况 包括简要起草过程、主要起草单位等 海南省地方标准?豆芽中 4- 氯苯氧乙酸钠、 6-苄基腺嘌呤、 2，4-滴、赤霉素、萘 乙酸残留量的测定 液相色谱质谱联用法?编号：琼食安地标 2021004 号被列入 2021 年海南省食品平安地方标准工程方案，由中国热带农业科学院分析测试中心承当该标 准的起草工作。按照工作方案要求，起草工作组先后查阅了豆芽的历史背景资料、相关的技术及 标准。期间分别对豆芽中 4-氯苯氧乙酸钠、 6-苄基

2、腺嘌呤、 2，4-滴、赤霉素、萘乙酸 残留量进行测定、验证和总结。结合并参照相关食品平安标准完成初稿。通过屡次征 求相关专家意见，在初稿的根底上修改完善标准稿件。随后，标准工作组向质检部门、 食药监、疾控中心等相关部门发出征求意见稿 25份，收到 20份回复，共收到 76条回复 意见，采纳及局部采纳共计 73条，采纳率 96.1%。根据意见和建议，对标准初稿进行了 修改和完善，完成了工程起草任务要求。二、标准的主要技术内容及依据标准工作组在参考相关标准的根底上，结合实际情况，本着标准趋向科学性、先 进性及合理适用的原那么进行了标准制定工作。制定过程中坚持公开透明，广泛向社会 公开征求意见和建议

3、。对收集来的意见进行逐一分析，吸取合理化建议反映、表达到 标准中。1 标准编制的背景及意义豆芽是人民群众喜爱的一种蔬菜，豆芽生产以传统的小作坊和家庭自产自销经营 模式为主，为了提高产率，出现生产者在豆芽生产过程中添加 4- 氯苯氧乙酸钠、 6-苄 基腺嘌呤、 2，4- 滴、赤霉素、萘乙酸等的情况，市场上充满着这种被称为“药水豆芽 的产品，引起消费者的严重不安，也使豆芽消费量逐年萎缩。由于豆芽是黄豆和绿豆等一些豆类的衍生产物，在行业监管领域，既不属于食品范畴，也不属于蔬菜范畴， 因此食品平安法和产品质量法都无法监管，也缺乏全国性的统一检测标准和处分标准。 豆芽菜虽小，却是关系到普通百姓健康的大事

4、，长期食用在生产过程中使用了 4- 氯苯 氧乙酸钠、 6- 苄基腺嘌呤、 2，4-滴、赤霉素、萘乙酸等化学原料的豆芽，对身体健康 危害很大。 本标准的制定， 可以填补海南省豆芽中 4- 氯苯氧乙酸钠、 6-苄基腺嘌呤、 2， 4- 滴、赤霉素、萘乙酸残留检测地方标准的空白。因而制定“豆芽中4- 氯苯氧乙酸钠、6-苄基腺嘌呤、 2，4-滴、赤霉素、萘乙酸残留量的测定 液相色谱质谱联用法的标 准具有非常的紧迫性和必要性。本实验经乙腈作为提取溶剂前处理方法。该方法灵敏度高，重复性好，完全满足 豆芽中 4-氯苯氧乙酸钠、 6-苄基腺嘌呤、 2，4- 滴、赤霉素、萘乙酸残留量的检测。常规的双仪器分析方法

5、包括基质分散固相萃取法、液 - 液萃取或固相萃取净化、 浓缩后，用液相色谱/紫外(UV)和液相色谱/二极管阵列(DAD)检测。但液相色谱，由 于常规检测器如UV及 DAD对双酰肼类农药残留的灵敏度较低，不能满足实际监测等 工作需要。液相色谱 - 质谱尤其是串联质谱结合了色谱、质谱两者的优点, 将色谱的高别离性能和质谱的高鉴别特点相结合 , 组成了选择性强、灵敏度高的现代分析技 术，并在残留检测领域得到越来越广泛的应用。本标准在研发出用乙腈提取，液相色谱 - 质谱联用检测的方法标准。1、通过试验研究确定了用液相色谱 - 质谱联用定性、定量测定 4-氯苯氧乙酸钠、 6- 苄基腺嘌呤、 2， 4-

6、滴、赤霉素、萘乙酸残留量技术条件， 在豆芽中的定量限均为 0.01 mg / kg 。2、优化了提取、确定了操作简单、快捷的前处理方案，回收率试验说明，本标准确 定检测方法标准满足 4- 氯苯氧乙酸钠、 6-苄基腺嘌呤、 2， 4-滴、赤霉素、萘乙酸残 留分析要求。3、进行了针对不同基质的方法适应性试验，证实方法的适用性。4、进行了实验室不同人员比对、不同实验室比对试验，确定了方法的重现性限和再 现性限。5、明确 4-氯苯氧乙酸钠、 6-苄基腺嘌呤、 2， 4-滴、赤霉素、萘乙酸的基质效应系数6、豆芽中 4-氯苯氧乙酸钠、 6-苄基腺嘌呤、 2， 4-滴、赤霉素、萘乙酸残留量的测定 液相色谱质

7、谱联用法， 本标准涵盖参数多，操作简单，灵敏度高， 满足 4- 氯苯氧乙酸钠、6- 苄基腺嘌呤、 2，4- 滴、赤霉素、萘乙酸残留量事故的鉴定和残留研究的要求。2 标准的编写原那么本标准的编写制定过程中以提高测试方法的选择性、精密度、检测限、准确度和 分析效率为总原那么，反映科学技术的先进成果和先进经验。在标准的制定过程中严格遵循国家有关方针、政策、法规和规章，标准的编写规 那么及表述按照 GB/T1.1-2021 ?标准化工作导那么 第 1 局部：标准的结构和编写规那么的 要求?、GB/T5009.1-2003?食品卫生检验方法 理化局部 总那么?、GB/T 20001.4-2001 ?标准

8、编写规那么第 4 局部：化学分析方法? 、GB/T 6379.1 测量方法与结果的准确度 正确度与精密度第 1 局部：总那么与定义 GB/T6379.1 -2004 ，ISO 5725-1：1994， IDT、GB/T 6379.2 测量方法与结果的准确度正确度与精密度第 2局部：确定标 准测量方法重复性与再现性的根本方法 GB/T6379.2-2004 ，ISO 5725-2：1994，IDT、 GB/T 8855新鲜水果和蔬菜的取样方法GB/T 8855-2021 , ISO 874:1980 , IDT的 要求编写。在标准制定过程中力求做到：技术内容的表达正确无误；文字表达准确、 简明、

9、易懂；标准的构成严谨合理；内容编排、层次划分等符合逻辑与规定。3 标准主要内容确实定3.1 试样的制备称量样品约 1 kg ,切碎后均一化制成匀浆、采用四分法进行装样。3.2 试样贮存 试样应放在清洁、结实的容器或包装袋内,可用聚乙烯瓶或袋。试样应在规定的保质 期内进行分析,必要时采用冷冻储存。试样应有清晰牢固的标识标记,防止造成标记 的遗失和混乱。3.3 赤霉素、 4-氯苯氧乙酸钠、 6-苄基腺嘌呤、 2, 4-滴、萘乙酸的性质 1赤霉素：是广泛存在的一类植物激素。其化学结构属于二萜类酸,由四环骨架 衍生而得。可刺激叶和芽的生长。的赤霉素类至少有 38 种。赤霉素应用于农业 生产,在某些方面

10、有较好效果。例如提高无籽葡萄产量,打破马铃薯休眠；在酿造啤 酒时，用GA3来促进制备麦芽糖用的大麦种子的萌发；当晚稻遇阴雨低温而抽穗缓慢 时,用赤霉素处理能促进抽穗； 或在杂交水稻制种中调节花期以使父母本花期相遇等。 2 4-氯苯氧乙酸：白色棱柱体针状结晶。有清香气味。对湿敏感。溶于乙醇、丙 酮和苯，微溶于水。熔点155156C 157158C 。低毒，半数致死量大鼠，经口 850mg/kg。有刺激性。主要用作植物生长调节剂。36-苄基腺嘌呤：中文别名为2-苄氨基嘌呤，N-苄基腺苷，丙烯酸正丁酯，白 色或类白色晶体，难溶于水，微溶于乙醇，在酸、碱中稳定，属广谱性植物生长调节 剂，可促进植物细胞

11、生长，抑制植物叶绿素的降解，提高氨基酸的含量，延缓叶片衰 老等。42, 4-滴：白色至黄色、晶体粉末、无臭、工业品略带酚气味。具有代表性的合成植物生长素auxin，是一种生长素类似物，简称 2， 4-D。在普通的植物生长素定 量法中显示有高的活性，但在采用植物生长素标准定量法的燕麦伸长试验中，其效颇低。5萘乙酸：白色结晶，无气味，易溶于热水、丙酮、乙醇、乙醚、苯、氯仿、乙酸和碱液，微溶于冷水。萘乙酸系萘类具有生长素类活性的植物生长调节剂，由根、茎、叶吸收。萘乙酸广泛用于农业、林业、蔬菜、花卉、果树等领域，诱发不定根形成，提高树木扦插成活率；提高座果率，防止采前落果。表1 4-氯苯氧乙酸钠、6-

12、苄基腺嘌呤、2，4-滴、赤霉素、萘乙酸的相关性质序号中文名称英文名称分子式分子量CAS号14-氯苯氧乙酸4-ChlorophenoxyaceticacidGH/CIQ186.59122-88-326-苄基腺嘌吟6-benzylam inopurineC12H1N5225.251214-39-73赤霉素Gibberellic acidC19H2Q348.3977-06-542，4- 滴2,4-DC8H6G Q221.0494-75-75萘乙酸1-Naphthylacetic acidG2H0Q186.2186-87-33.4 液相色谱-质谱联使用条件确实定流动相确实定由于电喷雾质谱的电离是在溶液

13、状态电离，因此流动相的组成和配比不但影响目标化合物的色谱行为，还会影响到目标化合物的离子化效率，从而影响灵敏度。对多种成 分分析测定多采用梯度洗脱。采用梯度洗脱的方法不仅可以降低基质中的杂质干扰， 而且提高别离效果。通过比拟甲醇-超纯水、乙腈-超纯水、甲醇-1 mmol/L乙酸铵和 甲醇-1 mmol/L乙酸铵水-0.1%甲酸水等不同的流动相，发现在流动相甲醇 -1 mmol/L 乙酸铵水-0.1%甲酸水梯度洗脱时，响应最高，因此选用流动相为甲醇-1 mmol/L乙酸 铵水-0.1%甲酸水的洗脱方法2。表2流动相及梯度洗脱条件时间min流速mL/minA 甲醇%B 1 mmol/L乙酸铵水-0

14、.1%甲酸水%0.000.2510900.600.2545552.000.2560403.500.2570303.600.2545553.700.2510905.000.251090342质谱条件确实定标准品调谐条件实验以甲醇-1 mmol/L乙酸铵-0.1%甲酸水溶液梯度为基准流动 相，采用“ T三通方式，对4-氯苯氧乙酸钠、6-苄基腺嘌呤、2, 4-滴、赤霉素、萘 乙酸的质谱条件进行优化，采用负离子扫描模式，多反响监测色谱图见附录C。根本参数如下：a色谱柱：Ci8柱，100 mm< 2.1 mmx 1.7卩m b流动相A为1 mmol/L乙 酸铵水-0.1%甲酸水溶液；B为甲醇；梯度

15、洗脱条件见表2 c柱温：35C； d进样体 积：5卩L; e离子源类型：ES; f扫描方式：正、负离子扫描；g检测方式：多反 应监测；h毛细管电压：2.8 kv; i离子源温度:110 C； j去溶剂气温度:350 C； k去 溶剂气流量:900 L/hr ;1锥孔反吹气流量:50 L/hr ；m碰撞气He流速:0.21 mL/min。 优化各个待测物的碰撞能量，选择响应值最高的两个碎片离子分别作为定量和定性离 子，用于选择反响监测。具体参数见表 3。序号中文名称英文名称ESI保存时间min定量离子M/Z定性离子M/Z去簇电压V碰撞能量V14-氯苯氧乙酸4-chlorphenoxyacetic

16、ESI-2.52185.0/127.1*185.0/127.1* ;187.0/129.02015; 1526-苄基腺嘌呤6-benzylaminopurine+ESI2.91226.3/148.1*226.3/148.1* ;226.3/91.22036; 213赤霉素Gibberellic acid+ESI2.02363.9/329.2*363.9/329.2* ;363.9/239.12020; 1542, 4- 滴2,4-DESI-2.07219.0/161.0*219.0/161.0* ;220.9/162.520; 1610; 185萘乙酸1-Naphthylacet ic aci

17、dESI-2.72185.0/141.1*185.0/141.1*1010注释:带*为定量离子，4-氯苯氧乙酸钠以4-氯苯氧乙酸表示343工作曲线的绘制用空白样品基质溶液配成一系列浓度为 10.00卩g/L、20.00卩g/L、50.00卩g/L、 100.0卩g/L、200.0卩g/L和500.0卩g/L的氯苯氧乙酸钠、6-苄基腺嘌呤、2, 4-滴、 赤霉素、萘乙酸混合标准工作液，用于做标准曲线。在浓度范围为10.00旧/L至500卩g/L 之间，响应值与进样量呈良好的线性关系，相关系数r>0.99，结果见表4 绿豆芽基质为例表4基质标样绿豆芽标样校准曲线名称参数校准曲线4-氯苯氧乙酸

18、钠y=ax+by=10.61x+23.68r0.99726-苄基腺嘌吟y=ax+by =7.923x+8.132r0.9964赤霉素y=ax+by=2.113x+14.51r0.99522，4- 滴y=ax+by=11.61x+108.6r0.9955萘乙酸y=ax+by= 0.7512x+1.297r0.99793.5样品前处理方法确实定关于豆芽中4-氯苯氧乙酸钠、6-苄基腺嘌呤、2, 4-滴、赤霉素、萘乙酸残留量的测定 液相色谱质谱联用法，该检测方法概述于下表5。本标准在该检测的根底上进行了条件试验，包括提取试剂确实定，同时对不同基质的样品进行了回收率试验，并最终确 定了前处理方案。表5豆

19、芽中4-氯苯氧乙酸钠、6-苄基腺嘌呤、2，4-滴、赤霉素、萘乙酸残留量的测定液相色谱质谱联用法概要豆芽中4-氯苯氧乙酸钠、6-苄基腺嘌呤、2，4-滴、赤霉素、萘乙酸残留量的测定液相色谱质谱联用法备注种类5种/仪器液相色谱-串联质谱/提取液0.1%甲酸-乙腈/定量限10.00 ®/kg/提取试剂确实定分别采用0.1%甲酸-乙腈、甲醇、丙酮作提取剂时，发现甲醇和丙酮和水层不易别离， 且丙酮较易挥发，而乙腈通过盐析法可以较好的将有机相和水相分层，因此我们选用 0.1%甲酸-乙腈作为提取剂，以绿豆芽为空白基质，添加浓度为20.00卩g/kg为例，回收率83.5%-97.1%完全满足实验要求。

20、表6 0.1%甲酸-乙腈提取的回收率n=5绿豆芽农药名称20.00 /kg回收率%RSD (%)4-氯苯氧乙酸钠93.94.26-苄基腺嘌吟93.74.1赤霉素85.44.22, 4-滴93.13.2萘乙酸83.53.1前处理方法确实定称取试样10 g精确至0.01g于50 mL聚四氟乙烯离心管中，参加10.0 mL提取液后，超声10 min，滤液收集到装有1 g3 g氯化钠的50 mL另外一支聚四氟乙烯离心管中，剧烈震荡2 min,在室温下静置30 min,使乙腈相和水相分层。取1m上清液高速10000rpm/min离心10min,过0.22卩m滤膜，待测。基质效应的分析配制一系列溶剂标样，

21、浓度分别为 10.00冯/L、20.00卩g/L、50.00卩g/L、100.0卩g/L、 200.0卩g/L、500.0卩g/L。称取空白样品以绿豆芽基质为例说明，按照444所述 步骤操作，在空白提取液中添加混合标样，使5种成分混合标样浓度分别为10.00卩g/L、 20.00 卩 g/L、50.00 卩 g/L、100.0 卩 g/L、200.0 卩 g/L和500.0 卩 g/L ;分别以标样浓度 为横坐标、峰面积为纵坐标进行线性回归。溶剂标样和基质标样在在10.00500.0卩g/L 范围内线性良好，相关系数r均大于0.99。基质与溶剂标准曲线斜率的比值ratio 可反响基质效应的强弱

22、。5种成分的斜率比值为0.6081.23 数据见表8，其中4-氯 苯氧乙酸钠、6-苄基腺嘌呤和赤霉素基质抑制效应较强；2, 4-滴和萘乙酸，基质增强 效应较强，因此根据基质标样计算豆芽中 4-氯苯氧乙酸钠、6-苄基腺嘌呤、2, 4-滴、 赤霉素、萘乙酸残留量。表7溶剂标样校准曲线和基质标样绿豆芽校准曲线及其斜率比值名称参数溶剂标样校准曲线基质标校准曲线4-氯苯氧乙酸钠y=ax+by =13.47x +62.48y=10.61x+23.68r0.99850.9972ratio0.7886-苄基腺嘌吟y=ax+by =13.04x+3.810y =7.923x+8.132r0.99920.9964

23、ratio0.608赤霉素y=ax+by =2.195x+6.216y=2.113x+14.51r0.99780.9952ratio0.9632, 4-滴y=ax+by =9.445x+82.81y=11.61x+108.6r0.99590.9955ratio1.23萘乙酸y=ax+by = 0.7387x +0.6288y= 0.7512x+1.297r0.99760.9979ratio1.02定性测定在相同条件下进行样品测定时，如果检出的色谱峰保存时间与标准品相一致，并 且在扣除背景后的样品谱图中，所选择的离子均出现，而且所选择的离子丰度比与标 准样品的离子丰度比相一致相对丰度50%允许土

24、 20%偏差；相对丰度20%-50% 允许土 25%偏差；相对丰度10%- 20% 允许土 30%偏差；相对丰度w 10% 允许土 50% 偏差，那么可判断样品中存在这种农药。定量测定采用外标法-标准曲线法定量测定，为减少基质对定量测定的影响，定量应采用基质 混合标准溶液绘制标准曲线，并且保证所测样品中农药的相应值均在仪器的线性范围 内。平行试验按以上步骤对同一试样进行平行试验。空白试验除不称取试样外，均按上述步骤进行。3.6准确度根据GB/T 5009.1-2003，准确度为测定平均值与真值的相符程度。准确度的测定： 将某一稳定样品中参加不同水平量的标准物质将标准物质的量作为真值，称为加标样

25、品，同时测定样品和加标样品，加标样品扣除样品空白值后与真值的误差即为该方法的准确度。按所述的前处理步骤，选取经检测为空白的植物源性样品， 进行添加浓度分别为10.00、20.00和100.0 旧/kg的回收实验，每档浓度进行 5个 平行的操作。具体数据见表9-表11。表8不同添加浓度的回收率n=5绿豆芽基质名称10.00 g/kg20.00 g/kg100.0 g/kg回收率%RSD ( %)回收率%RSD (%)回收率%RSD ( %)4-氯苯氧乙酸钠83.44.693.94.285.11.16-苄基腺嘌吟93.53.393.74.194.34.4赤霉素82.42.085.44.282.63

26、.42，4- 滴86.15.193.13.294.33.9萘乙酸83.33.483.53.182.33.9表9不同添加浓度的回收率n=5黄豆芽基质名称10.00 c/kg20.00 g/kg100.0 g/kg回收率%RSD (%)回收率%RSD (%)回收率%RSD (%)4-氯苯氧乙酸钠83.04.390.45.684.24.66-苄基腺嘌吟92.53.290.26.595.84.3赤霉素81.42.887.35.582.96.42，4-滴85.14.190.25.694.63.4萘乙酸82.73.684.74.285.24.1表10不同添加浓度的回收率n=5黑豆芽基质名称10.00 g/

27、kg20.00 g/kg100.0 g/kg回收率%RSD ( %)回收率%RSD (%)回收率%RSD (%)4-氯苯氧乙酸钠81.54.884.96.085.04.26-苄基腺嘌吟92.63.793.74.193.55.0赤霉素82.74.484.66.182.92.52，4-滴89.73.293.53.591.16.1萘乙酸82.35.683.1r 8.083.45.93.7定量限LOQ定量限是指可以进行准确定性和定量测定的最低水平，在该水平下得到的准确度应满足表12的要求。添加标准溶液质量浓度得到的信噪比一般为10。表11不同添加水平对回收率的要求添加水平mg/kg范围%相对标准偏差%

28、切.00150120< 35> 0.001 卫0160120< 30> 0.01 卫170120< 20> 0.1 兰170110< 15> 170110< 10根据3倍信噪比S/N计算豆芽中5种农药的检出限LOD为0.93.0血/kg ,根据10倍信噪比确定的定量限LOQ均为0.93.0血/kg，为配合实际样品和定量准确， 本试验从添加水平3.0冯/kg 直添加到10.00 pg/kg，通过添加回收率试验和准确 定量的要求，发现在添加浓度在10.00 旧/kg，回收率和准确度才符合定量限的要求， 因此，5种农药的定量限在植物源食品中的定量

29、限均为 10.00 pg/kg，详见表13。表12 5种农药的定量限序号名称定量限LOQ /g/kg14-氯苯氧乙酸钠10.0026-苄基腺嘌吟10.003赤霉素10.0042，4-滴10.005萘乙酸10.003.8方法重现性和再现性为考察不同检测人员对方法的重复性，本实验室3位检测人员分别进行添加回收实验，添加浓度为20.00 pg/kg。检测结果如表13所示：名称A (n=3)B (n=3)C (n=3)平均值/g/kg标准偏差 /g/kg相对标准偏差%平均值/g/kg标准偏差/g/kg相对标准偏差%平均值/g/kg标准偏差gg/kg相对标准偏差%4-氯苯氧乙酸钠18.11.15.917

30、.80.94.917.51.16.06-苄基腺嘌吟18.80.31.618.60.31.719.11.05.5赤霉素17.20.42.016.81.06.016.40.52.82, 4-滴18.61.26.518.41.16.018.71.15.7萘乙酸16.91.05.616.90.42.117.21.27.0据表13,以参数6-苄基腺嘌呤，三个人员检测的数值为例进行分析，平均值相对差异较大的为A和C,相对标准偏差相对差异较大的为 A和Co对A和C这一组，进行F检验,2 2=11. 816Sa(5.5)2SC2F. 0.10 匚匚由 a =0.10 及 df1 =3-仁2, df2 =3-仁

31、2,查得 1勺=口皿5 =19.0，因为 F v1"1.。5，故认为T A=c C, A和C总体方差无显著性差异。当总体方差相等的情况下，进行t检验:2 2，其中S2(nX -1)Sx (ny-1)Synx +ny -2t 001t 0-01可得，t =0.073，对于 a =0.01 及 df =3+3-2 = 4,查得 1 月=4.604，因为 t v 1勺故A和C无显著性差异。因此A B C检测结果无显著性差异。同上述计算过程，对每个参数的测定值进行显著性差异比拟，结果三组数据的每个参数的结果均无显著性差异。说明此方法进行样品分析结果是可靠的。按照GB/T 6379.2-200

32、4?测量方法与结果的准确度第2局部 确定标准测量方法重复性与再现性?的根本方法，进行实验室间方法的重复性和再现性评价。参与复核 的实验室为4家。以绿豆芽中添加浓度为20.00 / kg 6-苄基腺嘌呤为例的计算过程 见表14和表15,统计结果见表16至表20o表14实验室间方法的重复性和再现性评价统计结果以绿豆芽中添加浓度为 20.00皿kg 6-苄基腺嘌吟为例实验室编号实验室名称平均值Yj重复m方差Si21农业部食品质量监督检验测试中心成都19.05651.05 X 102大连市农产品质量监测中心18.96054.68 X 103海南省食品检验测试中心19.1205-13.97 X 104中

33、国热带农业科学测试中心19.42053.20 X 10-2检验单元方差柯克伦检验值C0.719柯克伦检验临界值0.721 ( 1 %)0.629 (5 %)判定正常值检验单元平均值格拉布斯检验值Gp1.403格拉布斯临界值1.496 (1 %)1.481 (5 %)判定正常值格拉布斯检验值G1.804格拉布斯临界值1.496 (1 %)1.481 (5 %)判定正常值比对试验的统计结果参加的实验室数目，p4可接受的数目4平均值(gg/kg) , m=TT318.969Sr2= T5T3 - P-73.91 X 102SL2=页-T_& XT£P TT3(P )T3 T4-85

34、.05 X 10Sr2= Sr2+ Sl2-73.40 X 10重复性，r=2.8腭0.002再现性，R=2.8jg0.002T1= BiiYi0.379T2= BliYi20.00720T3= Bn20T4= Bii2100T5= B>-1)S2-66.25X 10表15绿豆芽中离群值检验汇总统计表汎统计量参数X添加浓度10.00 g/ kg20.00 / kg100.0/ kgCGpG1CGpG1CGpG14-氯苯氧乙 酸钠0.8441.994*1.063*0.6091.7071.562*0.8751.4441.978*6-苄基腺嘌吟1.011.7878*2.214*0.7191.4

35、02*1.804*1.311.998*2.279*赤霉素0.9722.112*0.932*0.9822.001*1.890*1.141.242*1.902*2，4-滴0.9491.780*1.548*1.13*1.431*2.185*0.8121.428*2.113*萘乙酸0.9722.112*0.932*0.6221.941*1.402*1.981.458*1.820*备注：C:代表柯克伦检验统计量，Gp , Gi :代表格拉布斯检验统计量。柯克伦检验临界值 0.721( 1 %)和0.629 (5 %)格拉布斯临界值：1.496 (1 %)和1.481 (5 %)表16黄豆芽中离群值检验汇

36、总统计表统计量参数x添加浓度10.00 / kg20.00 / kg100.0/ kgCGpG1CGpG1CGpG14-氯苯氧乙酸钠0.8502.019*1.2390.8091.687*2.485*1.011.05*2.657*6-苄基腺嘌吟0.9732.110*2.133*1.59*1.362*2.330*1.451.924*2.482*赤霉素1.052.33*1.094*1.08*2.649*1.543*2.582.379*2.132*2, 4- 滴0.8171.656*1.475*1.41*1.667*2.762*1.201.890*2.051*萘乙酸0.6421.736*1.386*0

37、.851*2.060*1.402*1.181.627*1.624*备注：C :代表柯克伦检验统计量，Gp , G1 :代表格拉布斯检验统计量。 柯克伦检验临界值 0.721( 1 %)和0.629 (5 %)。格拉布斯临界值：1.496 (1 %)和1.481 (5 %)表17黑豆芽中离群值检验汇总统计表统计量添加浓度、10.00 g/ kg20.00 g/kg100.0 g/kg参数CGpG1CGpG1CGpG14-氯苯氧乙 酸钠0.9291.565*1.795*0.782*1.213*2.385*1.801.367*2.412*6-苄基腺嘌吟1.042.304*2.352*0.927*1.

38、723*1.647*1.421.753*2.826*赤霉素0.7991.733*1.501*0.888*2.462*1.712*1.031.327*2.020*2，4-滴0.7741.971*2.028*0.593*1.580*1.582*1.731.587*2.243*萘乙酸1.201.891*1.3951.05*1.333*2.581*1.632.180*1.977*备注：C :代表柯克伦检验统计量，Gp , Gi :代表格拉布斯检验统计量。 柯克伦检验临界值 0.721( 1 %)和0.629 (5 %)。格拉布斯临界值：1.496 (1 %)和1.481 (5 %)表18实验室间方法的

39、重复性和再现性评价汇总统计结果(绿豆芽中)、统计量参数'、添加浓度10.00 / kg20.00 / kg100.0 g/kgrRrRrR4-氯苯氧乙 酸钠0.0090.0080.0020.0020.0020.0076-苄基腺嘌吟0.0100.0090.0020.0020.0060.006赤霉素0.0010.0010.0010.0010.0050.0062, 4-滴0.0010.0010.0010.0010.0010.002萘乙酸0.0010.0010.0010.0020.0060.007备注：r为重复性限，R为再现性限，计算公式见表 24和表25注：r是置信概率为95%时该方法的重复

40、性；R是置信概率为95%时该方法的再现性。表19实验室间方法的重复性和再现性评价汇总统计结果(黄豆芽中)'、统计量参数、V、添加浓度10.00 g/kg20.00 g/ kg100.0 g kgrRrRrR4-氯苯氧乙酸 钠0.0020.0010.0020.0020.0060.0106-苄基腺嘌吟0.0010.0010.0020.0020.0060.006赤霉素0.0010.0010.0020.0020.0080.0082，4-滴0.0010.0010.0020.0020.0060.006萘乙酸0.0010.0010.0020.0020.0070.008备注：r为重复性限，R为再现性限

41、，计算公式见表 24和表25注：r是置信概率为95%时该方法的重复性；R是置信概率为95%时该方法的再现性。统计量参数、添加浓度10.00 g/kg20.00 g/ kg100.0 g kgrRrRrR4-氯苯氧乙酸 钠0.0010.0010.0020.0030.0060.0106-苄基腺嘌吟0.0010.0010.0020.0020.0070.007赤霉素0.0010.0010.0020.0020.0040.0062，4-滴0.0010.0010.0010.0010.0080.009萘乙酸0.0010.0010.0020.0020.0070.008备注：r为重复性限，R为再现性限，计算公式见

42、表 24和表25注：r是置信概率为95%时该方法的重复性；R是置信概率为95%时该方法的再现性。附录A :实验室间比对添加回收实验数据1、农业部食品质量监督检验测试中心成都比对结果表21 5种农药在绿豆芽中10.00 厲/kg浓度水平添加结果序号名称1#0kg2#©kg3# pg/kg4# p/kg5# pg/kg平均值旧/kg相对标准偏差%14-氯苯氧乙 酸钠8.458.028.428.498.768.433.126-苄基腺嘌吟9.019.458.429.329.469.134.83赤霉素8.368.068.498.808.288.403.342, 4-滴8.698.198.688

43、.878.788.643.15萘乙酸8.468.068.628.798.438.473.2表22 5种农药在绿豆芽中20.00 厲/kg浓度水平添加结果序号名称1# p/kg2#©kg3# pg/kg4# p/kg5# pg/kg平均值旧/kg相对标准偏差%14-氯苯氧乙 酸钠19.018.818.618.419.018.71.326-苄基腺嘌吟19.119.519.018.619.019.11.73赤霉素17.016.917.117.216.817.01.042, 4-滴18.618.218.518.818.518.51.05萘乙酸16.517.516.416.917.316.92

44、.8表23 5种农药在绿豆芽中100.0 ®/kg浓度水平添加结果序号名称1# p/kg2#©kg3# pg/kg4# p/kg5# pg/kg平均值旧/kg相对标准偏差%14-氯苯氧乙 酸钠89.589.889.789.389.589.50.226-苄基腺嘌吟96.495.795.694.597.495.91.13赤霉素86.185.085.485.386.185.60.642, 4-滴93.295.695.494.896.595.11.35萘乙酸87.385.686.786.485.786.30.8表24 5种农药在黄豆芽中10.00 ®/kg浓度水平添加结果

45、序号名称1# p/kg2#©kg3# pg/kg4# p/kg5# pg/kg平均值旧/kg相对标准偏差%14-氯苯氧乙 酸钠8.428.128.528.398.698.432.526-苄基腺嘌吟9.269.118.528.678.768.863.53赤霉素8.138.148.778.288.368.343.142, 4-滴8.538.098.768.158.718.453.75萘乙酸8.168.238.728.098.338.313.0序号名称1#0kg2#©kg3# pg/kg4# p/kg5# pg/kg平均值旧/kg相对标准偏差%14-氯苯氧乙 酸钠18.418.7

46、18.818.518.218.51.326-苄基腺嘌吟19.119.518.718.519.219.02.03赤霉素17.216.817.016.917.117.00.942，4-滴18.418.718.118.518.418.41.35萘乙酸16.217.416.217.216.916.83.5表26 5种农药在黄豆芽中100.0 ®/kg浓度水平添加结果序号名称1# p/kg2#©kg3# pg/kg4# p/kg5# pg/kg平均值旧/kg相对标准偏差%14-氯苯氧乙 酸钠89.488.588.188.289.688.80.726-苄基腺嘌吟95.297.794.5

47、96.296.696.01.33赤霉素87.186.188.588.389.287.81.442, 4-滴92.495.696.394.494.494.61.65萘乙酸88.187.085.185.085.086.01.7表27 5种农药在黑豆芽中10.00 ®/kg浓度水平添加结果序号名称1# p/kg2#©kg3# pg/kg4# p/kg5# pg/kg平均值旧/kg相对标准偏差%14-氯苯氧乙 酸钠8.128.168.548.698.718.443.426-苄基腺嘌吟9.119.128.598.889.439.033.53赤霉素8.098.248.768.678.3

48、48.423.442, 4-滴8.698.618.298.598.468.531.85萘乙酸8.318.258.768.688.268.452.9表28 5种农药在黑豆芽中20.00 ®/kg浓度水平添加结果序号名称1# p/kg2#©kg3# pg/kg4# p/kg5# pg/kg平均值旧/kg相对标准偏差%14-氯苯氧乙 酸钠18.418.118.818.418.218.41.626-苄基腺嘌吟19.319.118.919.418.619.11.83赤霉素17.917.618.117.618.217.91.542, 4-滴18.418.718.218.418.918.51.55萘乙酸16.316.817.617.416.716.93.3序号名称1#0kg2#©kg3# pg/kg4# p/kg5# pg/