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文档简介
1、精品文档第12章蛋白质的生物合成学习要求1掌握参与蛋白质生物合成的体系;原核生物蛋白质生物合成的基本过程及重要概念。2熟悉真核生物蛋白质合成过程;蛋白质合成后的加工修饰;蛋白质合成所需的各种因子;信号肽的概念及组成特点。3了解蛋白质的靶向输送;抗生素对翻译的抑制;干扰蛋白质生物合成的生物活性物质。基本知识点蛋白质的生物合成即翻译,是以20种编码氨基酸为原料,mRNA为模板,tRNA为运载工具,核糖体提供场所,酶、蛋白质因子、能源物质及无机离子参与的反应过程。蛋白质生物合成分三个阶段,即氨基酸的活化、肽链形成和肽链形成后的加工和靶向输送。氨基酸的活化是氨基酸与特异tRNA结合形成氨基酰-tRNA
2、的过程,由氨基酰-tRNA合成酶催化。原核生物起始的氨基酰tRNA是fMet-tRNAfMet,真核生物是Met-tRNAiMet。肽链的生物合成过程也称核糖体循环,分起始、延长和终止三个阶段。原核生物蛋白质生物合成起始阶段由mRNA与核糖体小亚基先结合,之后fMet-tRNAfMet与核糖体小亚基结合,最后结合了mRNA、fMet-tRNAfMet的小亚基再与核糖体大亚基结合共同组装成翻译起始复合物,需要IF-1、2和3参与。真核生物翻译起始与原核生物相似,区别在于核糖体小亚基先结合Met-tRNAiMet,再结合mRNA。原核生物肽链延长过程经进位、成肽、转位三个步骤不断反复,使肽链从N端
3、到C端不断延长。当核糖体A位上出现终止密码时,原核生物由RF-1、2和3,真核生物由eRF识别并与之结合,肽链合成终止。翻译后加工是使新生多肽链经加工后转变为具有天然构象的功能蛋白质。翻译后修饰包括多肽链折叠、一级结构和空间结构的修饰等。蛋白质的靶向输送使合成的蛋白质前体定向输送到相应细胞部位发挥作用。在真核细胞胞液合成的分泌型蛋白、溶酶体蛋白、内质网蛋白、线粒体蛋白、质膜蛋白和细胞核蛋白等前体肽链中特有的信号序列引导蛋白通过不同机制而被靶向输送。某些药物和生物活性物质能抑制或干扰蛋白质的生物合成。许多抗生素通过作用于蛋白质生物合成过程中的不同环节从而抑制蛋白质生物合成,最终发挥杀菌、抑菌或抗
4、肿瘤的作用;白喉毒素、干扰素等作用于特异的靶位点而干扰或抑制蛋白质的生物合成。自测练习题一、选择题(一)A型题1蛋白质生物合成A.从mRNA的3'端向5'端进行B.由N端向C端进行C.由C端向N端进行D.由28S-tRNA指导E.由5S-rRNA指导2蛋白质生物合成的延长阶段不需要A转肽酶BGTPCEF-Tu、EF-Ts、EFGDmRNAEfMet-tRNAfMet3有关蛋白质合成的叙述正确的是A真核生物先靠S-D序列使mRNA结合核糖体B.真核生物帽子结合蛋白复合物(eIF-4F复合物)在起始过程中发挥作用C.IF比eIF种类多D原核生物和真核生物使用不同的起始密码E.原核生
5、物有TATAAT作为起始序列,真核生物则是TATA4关于氨基酸密码子的描述错误的是A密码子有种属特异性,所以不同生物合成不同的蛋白质B密码子阅读有方向性,从5'端向3'端进行C.一种氨基酸可有一组以上的密码子D一组密码子只代表一种氨基酸E.密码子第3位(3'端)碱基在决定掺入氨基酸的特异性方面重要性较小5遗传密码的简并性是A蛋氨酸密码可作起始密码B一个密码子可编码多种氨基酸C多个密码子可编码同一种氨基酸D密码子与反密码子之间不严格配对E.所有生物可使用同一套密码6遗传密码的摆动性正确含义是A一个密码子可以代表不同的氨基酸B密码子与反密码子可以任意配对C.一种反密码子能与
6、第三位碱基不同的几种密码子配对D指核糖体沿着mRNA从5'端向3'端移动E.热运动所导致的DNA双螺旋局部变性7一个tRNA的反密码子为5'-IGC-3',它可识别的密码是AGCABGCGCCCGDACGEUCG8.信号肽识别颗粒(signalrecognitionparticles,SRP)可识别A.RNA聚合酶B.DNA聚合酶C.核小体D分泌蛋白的N端序列E多聚腺苷酸9.下列关于多聚核糖体(polysome)叙述正确的是A是一种多顺反子B是mRNA的前体C.是mRNA与核糖体小亚基的聚合体D是核糖体大、小亚基的聚合体E.是一组核糖体与一个mRNA不同区段的结
7、合物10关于蛋白质生物合成的描述哪一项是错误的A氨基酸必须活化成活性氨基酸B氨基酸的羧基被活化C20种编码氨基酸各自有相应的密码D活化的氨基酸靠相应的tRNA搬运到核糖体EtRNA的反密码子与mRNA上的密码子严格按碱基配对原则结合11核糖体结合位点(ribosomalbindingsite,RBS)A.也称Pribnow盒B.在原核生物mRNA上C.真核生物转录起点D.由Meselson-stahl首先发现E.在tRNA分子上12翻译延长的进位A指翻译起始复合物的生成B.肽酰-tRNA进入P位C.由延长因子EF-G带领,不需消耗能量D是下一位氨基酸的氨基酰-tRNA进入核糖体的A位E.多肽链
8、离开核糖体13翻译延长需要A.氨基酰-tRNA转移酶B.磷酸化酶C.氨基酸合成酶D.肽链聚合酶E.转肽酶14蛋白质生物合成中多肽链的氨基酸排列顺序取决于A.相应tRNA的专一性B.相应氨基酰-tRNA合成酶的专一性C.相应tRNA上的反密码D.相应mRNA中核甘酸排列顺序E.相应rRNA的专一性15肽链合成终止的原因是A.翻译到达mRNA的尽头B.特异的tRNA识别终止密码C.释放因子能识别终止密码子并进入A位D.终止密码子本身具有酯酶功能,可水解肽酰基与tRNA之间的酯键E.终止密码子部位有较大阻力,核糖体无法沿mRNA移动16蛋白质合成终止时,使多肽链从核糖体上释出的因素是A.终止密码子B
9、.转肽酶的酯酶活性C.释放因子D.核糖体解聚E.延长因子17蛋白质合成中,有关肽链延长叙述正确的是A.核糖体向mRNA5'端移动三个核甘酸距离B.肽酰-tRNA转位到核糖体的A位CGTP水解成GDP和H3PO4以提供能量D.空载的tRNA从P位进入A位EATP直接供能18多聚核糖体中每一核糖体A.从mRNA的3'端向5'端前进B,可合成多条多肽链C.可合成一条多肽链D.呈解离状态E.可被放线菌酮抑制19氨基酸通过下列哪种化学键与A.糖甘键 B.酯键20信号肽的作用是A .保护N-端的蛋氨酸残基C.保护蛋白质不被水解E.传递蛋白质之间的信息21下列那一项是翻译后加工tRN
10、A 结合C.酰胺键 D.磷酸酯键E.氢键B.引导分泌性蛋白进入内质网腔D 维护蛋白质的空间构象A.力口5'端帽子结构B.力口3'端poly(A)尾C.酶的激活D.酶的变构E.氨基酸残基的糖基化22干扰素抑制蛋白质生物合成是因为A.活化蛋白激酶,而使eIF-2磷酸化B.抑制肽链延长因子C.阻碍氨基酰-tRNA与小亚基结合D.抑制转肽酶E.使核糖体60S亚基失活23下列哪一种物质抑制氨基酰-tRNA与小亚基结合A.土霉素B.氯霉素C.红霉素D.链霉素E.林可霉素24哺乳动物细胞中蛋白质生物合成的主要部位在A.细胞核B.线粒体C.核糖体D.高尔基复合体E.核仁25靶向输送到细胞核的蛋
11、白多肽链含有特异信号序列,下列叙述错误的是A多肽链进细胞核定位后不被切除B位于N末端C.不同多肽链的特异信号序列无共同性D.富含赖、精及脯氨酸E.也称为核定位序列26下列哪种物质直接抑制真核生物核糖体转肽酶A.放线菌酮B.四环素C.土霉素D.链霉素和卡那霉素E.利福平27氯霉素可抑制原核生物的蛋白质合成,其原因是A.特异性的抑制肽链延长因子(EFT)的活性B.与核糖体的大亚基结合,抑制转肽酶的活性,而阻断翻译延长过程C.活化一种蛋白激酶,从而影响起始因子(IF)磷酸化D间接活化一种核酸内切酶使mRNA降解E阻碍氨基酰-tRNA与核糖体小亚基结合28白喉毒素的作用是A抑制信号肽酶B.与位于内质网
12、膜表面的受体蛋白结合C.使延长因子-2(eEF-2)发生ADP糖基化而失活,阻断多肽链延长D.加速肽酰-tRNA从A位移到P位,造成氨基酸缺失,从而生成无功能的蛋白质E通过抑制GTP和fMet-tRNAfMet在小亚基上的结合,抑制蛋白合成的起始29出现在蛋白质分子中的氨基酸,下列哪一种没有遗传密码A.色氨酸B.蛋氨酸C.谷胺酰胺D.脯氨酸E.羟脯氨酸30在体内,氨基酸合成蛋白质时,其活化方式为A.磷酸化B.与蛋氨酸结合C.生成氨基酰辅酶AD.生成氨基酰-tRNAE.与起始因子结合31不属于蛋白质合成后加工修饰的过程为A.肽链N端修饰B.亚基聚合C.疏水脂链的共价连接D多肽链折叠为天然构象的蛋
13、白质E酶的变构调节B型题A.进位B.成肽C.转位D.终止E.释放1氨基酰-tRNA进入核糖A位称为2肽酰-tRNA-mRNA与核糖体位置的相互变更称为3 P位上的肽酰基与A位上的氨基酰-tRNA的氨基形成肽键称为A.链霉素B.氯霉素C.林可霉素D.喋吟霉素E.白喉毒素4对真核及原核生物蛋白质合成都有抑制作用的抗生素是5主要抑制真核细胞蛋白质合成的是A.蛋白质6-磷酸甘露糖基化B.滞留信号序列C.囊泡D分泌小泡E前体形式6靶向输送至溶酶体信号是7靶向输送至内质网的蛋白质多肽链C-端含8质膜蛋白质的靶向输送需要A.信号肽B.信号肽酶C.信号肽识别颗粒D.分泌性蛋白E.对接蛋白9有碱性N端、疏水核心
14、和加工区三个区域的是10属于蛋白核酸复合体的是A.肽键B.酯键C.氢键D.磷酸二酯键E.糖甘键11核苷酸之间的连接键12氨基酸之间的连接键13碱基与核糖之间的连接键14氨基酸与tRNA之间的连接键A.RNase抑制因子B.干扰素C.喋吟霉素D.红霉素E.链霉素15.抑制RNase活性的是16能诱导合成2'-5'寡聚腺苷酸的是17与酪氨酰-tRNA结构相似的是(三)X型题1参与蛋白质合成的物质是A.mRNAB.GTPC.转肽酶D.核糖体E.聚合酶2翻译后加工包括A.剪切B.共价修饰C.亚基聚合D.加入辅基E.水解修饰3蛋白质合成后可靶向运输到A.留在胞液B.线粒体C.细胞核内D.
15、内质网E.溶酶体4引起读码错误的抗生素有A.巴龙霉素B.链霉素C.潮霉素BD.新霉素E.喋吟霉素5真核生物的hnRNA要具有模板作用,必须进行A.剪接B.首尾修饰C.插入稀有碱基D.切除内含子E.碱基甲基化6关于S-D序列的叙述,正确的是A.也称核糖体结合位点B.与16SrRNA3'端-UCCUCC-互补C.碱基序列-AGGAGG-为核心D.位于起始密码上游E.即起始序列7翻译的准确性与下列哪些因素有关A.氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和相应tRNA都有高度特异性B.氨基酰-tRNA分子中tRNA的反密码可通过碱基配对识别mRNA分子的遗传密码C.氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性
16、D.延长因子EF-G有转肽酶活性E.核糖体对氨基酰-tRNA的进位有校正功能8关于分子伴侣A.高温应激可诱导该蛋白合成增加B.与分泌性蛋白同在C.能加快多肽链折叠速度D.增加功能性蛋白折叠产率E.可促进需折叠的多肽链折叠为天然构象的蛋白质9在蛋白质生物合成中A20种编码氨基酸是原料BtRNA携带氨基酸CmRNA起模板作用DrRNA是合成的场所E.氨基酰-tRNA合成酶识别并结合相应的氨基酸和tRNA10干扰素的作用是A 调解细胞生长分化D.间接诱导核酸内切酶B.激活免疫系统C.抗病毒E.诱导使eIF-2磷酸化的蛋白激酶活化A 主要在内质网发挥作用B 促二硫键变构D 催化错配的二硫键断裂并形成正
17、确二硫键C.胞液中活性高E.促蛋白质变性11关于蛋白质二硫键异构酶、是非题1蛋白质生物合成所需的能量都由ATP直接供给。2每种氨基酸只能有一种特定的tRNA与之对应。3原核细胞新生肽链N端第一个氨基酸残基为fMet,真核细胞新生肽链N端为Met。4一种tRNA只能识别一种密码子。5每种生物都是有自己特有的一套遗传密码。6生物体的所有编码蛋白质的基因都是可以由DNA的核苷酸序列推导出蛋白质氨基酸序列。7.蛋白质生物合成中核糖体沿mRNA的3'-5'端移动。8在大肠杆菌中,一种氨基酸只对应于一种氨基酰-tRNA合成酶。9.氨基酸活化时,在氨基酰-tRNA合成酶的催化下,由ATP供能
18、,消耗一个高能磷酸键。10每一种氨基酸都有两种以上密码子。11 .核糖体的活性中心“A”位和“P”位都主要在大亚基上。12 AUG既可作为fMet-tRNAfMet和Met-tRNAiMet相对应的密码子,又可作为肽链内部Met的密码子。13构成密码子和反密码子的碱基都只是A、U、C、G。14.真核生物帽子结合蛋白复合物(eIF-4F复合物)在起始过程中发挥作用。15核定位序列位于N末端。16.白喉毒素的作用是使延长因子-2(eEF-2)发生ADP糖基化而失活,阻断多肽链延长。17分子伴侣能加快多肽链折叠速度。18滞留信号是靶向输送至溶酶体信号。三、填空题1 遗传密码共有个,其中个为氨基酸编码
19、,AUG既编码多肽链中的,又作为多肽链合成的。肽链合成的终止密码是2蛋白质的生物合成是以为模板,以为原料直接供体,以为合成场所。3核糖体阅读mRNA密码子是从方向进行的,肽链合成是从方向进行的。4 蛋白质生物合成终止需要因子,原核生物有种,真核生物有种。5 原核生物的起始氨基酰-tRNA以表示,真核生物的起始氨基酰-tRNA以表示,延伸中的甲硫氨酰-tRNA以表示。6氨基酰-tRNA合成酶的专一性是指对和两种底物都能高度特异识别;校正活性是的催化活性。7原核生物mRNA上的S-D序列又成为,紧接其后的小核苷酸序列可被辨认结合。8蛋白质合成后一级结构的修饰包括和。9蛋白质合成后空间结构的修饰包括
20、和。10参与多肽链折叠为天然功能构象的蛋白质有,。分子伴侣包括和两大类。11 在形成氨基酰-tRNA时,由氨基酸的基与tRNA3'末端的基形成酯键。12 肽链合成终止时,由识别并结合进入A位的,同时二者结合后触发核糖体构象改变,使酶活性转变为酶活性,水解酯键,释放合成的肽链。13蛋白质生物合成是耗能过程,延长时每个氨基酸活化为氨基酰-tRNA消耗个高能键,进位、转位各消耗个高能键,为保持蛋白质生物合成的高度保真性,任何步骤出现不正确连接都消耗能量而水解清除,因此每增加一个肽键平均需要消耗由GTP或ATP提供的个高能磷酸键。14蛋白质中可进行磷酸化修饰的氨基酸残基主要为,15由许多核糖体
21、连接到一个mRNA分子上形成的复合物称为。16原核生物的释放因子有三种,其中RF-1识别终止密码子,_RF-2识别,;真核中的释放因子只有一种。四、名词解释1 translation2 codon3 ORF4 degeneracy5 wobblebasepairing6 ribosomalcycle7 registration8 posttranslationalmodification9 molecularchaperon10 signalsequence11 signalpeptide12 NLS13 S-Dsequence14 polysome15 SRP16 proteintarget
22、ing五、问答题1何谓遗传密码?有何特点?2真核生物翻译后修饰有哪些方式?3简述氨基酸活化及相关酶的作用特点。4原核生物和真核生物翻译过程有何异同?5为什么嘌呤霉素可抑制蛋白质的生物合成?6干扰素干扰蛋白质生物合成的机制是什么?7原核生物mRNA在核糖体小亚基上如何准确定位?8简述抗生素与毒素的种类及其作用机制。9简述各种RNA在蛋白质生物合成中的功能。10试述蛋白质生物合成过程的忠实性是如何保持的?11原核生物蛋白质合成起始复合物有哪些成份组成?该复合物的形成过程。12简述蛋白质生物合成过程的延长过程。、选择题(1) A型题1 B2E3B4A5C6C7A8D10 E11B12D13E14D1
23、5C16B17C19 B20B21E22A23A24C25B26A28 C29E30D31E(2) B型题1 A2C3B4D5E6A7B8C10C11D12A13E14B15A16B17CX型题4 ABCD 5 ABD 61ABCD2BCDE3ABCDE7 ABCE8ABDE9ABCE10ABCDE11AD二、是非题1 B2B3A8 A9B10B15B16A17B三、填空题9 E18 C27 B9 AABCDBA4 B5 B6 B711 B12 A13 B1418 B1 6461甲硫氨酸起始信号UAAUAGUGA2 mRNA氨基酰-tRNA核糖体3 53'N端-C端4释放因子315 f
24、Met-tRNAfMetMet-tRNAiMetMet-tRNAMet6氨基酸tRNA水解酯酶7核糖体结合位点核糖体小亚基蛋白rpS-18肽链水解化学修饰9亚基聚合辅基连接10分子伴侣蛋白质二硫键异构酶肽-脯氨酰顺反异构酶核糖体结合性分子伴侣非核糖体结合性分子伴侣11.e竣羟12释放因子终止密码子转肽酯1321514丝氨酸苏氨酸酪氨酸15多核糖体16UAAUAGUAAUGAeRF四、名词解释1 translation翻译,即蛋白质的生物合成。是细胞内以mRNA为模板,按照mRNA分子中由核苷酸组成的密码信息合成蛋白质的过程。其本质是将mRNA分子中4种核苷酸序列编码的遗传信息(核酸语言),解读
25、为蛋白质一级结构中20种氨基酸的排列顺序(蛋白质语言)。2 codon密码子,在mRNA的开放阅读框架区,每三个相邻的核苷酸为一组,代表一种氨基酸或肽链合成的其它信息,这种三联体形式的核苷酸序列称为密码子。共64个密码子,其阅读方向是5'-3'。3 ORF开放读码框架,从mRNA5'端起始密码子AUG到3'端终止密码子之间的核苷酸序列。4 degeneracy简并性,一种氨基酸可具有两个或两个以上的密码子为其编码,这一特性称为遗传密码的简并性。为同一种氨基酸编码的各密码子称为简并密码子,也称同义密码子。多数情况下,同义密码子的头两位碱基相同,仅第三位碱基有差异。
26、5 wobblebasepairing摆动配对,mRNA密码子的第3位碱基与tRNA反密码子的第1位碱基之间常出现不严格遵守碱基互补配对规律的现象,称为摆动配对。6 ribosomalcycle核糖体循环,指肽链合成的延长阶段经进位、成肽和转位三个步骤而使氨基酸依次进入核糖体并聚合成多肽链的过程。这一过程在核糖体上连续循环进行直至终止称为核糖体循环。每次核糖体循环肽链从N端向C端增加一个氨基酸残基。广义的核糖体循环是指翻译的全过程。7 registration注册,也称进位,是指一个氨基酰-tRNA按照mRNA模板的指令进入并结合到核糖体A位的过程。8 posttranslationalmod
27、ification翻译后修饰,新生多肽链不具备蛋白质的生物学功能,必须经过复杂的加工过程才能转变为具有天然构象的功能蛋白质,这一加工过程称为翻译后修饰。包括多肽链折叠为天然的三维构象及对肽链一级结构和空间结构的修饰等。9 molecularchaperon分子伴侣,是细胞内的一类可识别肽链的非天然构象、促进各功能域和整体蛋白质正确折叠的保守蛋白质。10 signalsequence信号序列,所有靶向输送的蛋白质结构中都存在分选信号,主要是N端特异氨基酸序列,可引导蛋白质转移到细胞适当靶部位的这类序列称为信号序列。11 signalpeptide信号肽,多数靶向输送到溶酶体、质膜或分泌到细胞外的
28、蛋白质,其肽链的N端有一长度为13-36个氨基酸残基的信号序列称为信号肽。12 NLS核定位序列,所有靶向输送到细胞核的蛋白质其多肽链内含有特异信号序列,称为核定位序列。NLS是含4-8个氨基酸残基的短序列,富含带正电荷的赖氨酸、精氨酸和脯氨酸,可位于肽链的不同部位。NLS在蛋白质进核定位后不被切除。13 S-DsequenceS-D序列,又成核糖体结合位点(RBS),存在于原核生物mRNA起始AUG密码上游约8-13个核苷酸部位,存在4-9个核苷酸的一致序列,富含喋吟碱基,如-AGGAGG-,称为Shine-Dalgarno序歹简称S-D序列。此与原核生物核糖体小亚基16S-rRNA3
29、9;端富含嘧啶的短序列,如-UCCUCC-可配对结合,通过这种RNA-RNA相互作用,mRNA序列上的起始AUG即可在核糖体小亚基上准确定位而形成复合体。14 polysome多聚核糖体,是指多个核糖体结合在一条mRNA链上,同时进行多肽链的合成(翻译)所形成的聚合物。多聚核糖体的形成可以使蛋白质合成以高速度、高效率进行。15 SRP信号肽识别颗粒,由6个多肽亚基和1分子7S-RNA组成的复合体。可同时与新生肽链的信号肽及核蛋白体结合,具有GTP酶活性,能引导新生肽链识别并结合到内质网膜上。16 proteintargeting蛋白质靶向输送,蛋白质合成后被定向输送到其发挥作用的靶部位的过程。
30、五、问答题1何谓遗传密码?有何特点?答:遗传密码是存在于mRNA开放阅读框架区的三联体形式的核苷酸序列。由A、G、C、U四种碱基组成64个三联体密码子,其中AUG编码甲硫氨酸和作为多肽链合成的起始信号;UAA、UAG、UGA作为多肽链合成的终止信号;其余61个密码分别编码不同的氨基酸。遗传密码具有以下特点:(1)方向性。密码子及组成密码子的各碱基在精品文档mRNA序列中的排列具有方向性,翻译时的阅读方向是5'-3',即读码从mRNA的起始密码子AUG开始,按5'-3'的方向逐一阅读,直至终止密码子。mRNA开放阅读框架中5'-3'的核甘酸排列顺序
31、决定了蛋白质多肽链氨基酸从N端到C端的排列顺序。(2)连续性。mRNA序列上的各密码子及密码子的各碱基是连续排列的,密码子及密码子的各碱基之间没有间隔,即具有无标点性。翻译时从起始密码子AUG开始向3'端连续读码,每次读码时每个碱基只读一次,不重叠阅读。(3)简并性。一种氨基酸具有两个或两个以上的密码子为其编码的特性称为遗传密码的简并性。64个密码子中,除甲硫氨酸和色氨酸只对应1个密码子外,其它氨基酸都有2、3、4或6个密码子为之编码。为同一种氨基酸编码的各密码子称为简并密码子或同义密码子。多数情况下,同义密码子的头两位碱基相同,仅第三位碱基有差别。(4)通用性。除动物细胞的线粒体和植
32、物细胞的叶绿体外,几乎生物界所有物种都使用同一套遗传密码即通用密码。(5)摆动性。mRNA密码子的第3位碱基和tRNA反密码子的第1位碱基之间不严格遵守碱基互补配对规律的现象称为摆动配对。如tRNA反密码子的第1位碱基若是I(次黄喋吟),可以和mRNA密码子的第3位的A、U或C配对等。2真核生物翻译后修饰有哪些方式?答:新生多肽链不具备蛋白质的生物活性,必须经过复杂的加工修饰才能转变为有天然构象的功能蛋白质。真核生物翻译后修饰包括多肽链折叠为天然的三维构象及对肽链一级结构的修饰、空间结构的修饰等。(1)多肽链折叠为天然构象的蛋白质。需要以下酶或蛋白质因子的辅助:分子伴侣:识别肽链的非天然构象,
33、促进各功能域和整体蛋白质正确折叠;蛋白质二硫键异构酶:催化多肽链内或肽链之间二硫键的正确形成或催化错配的二硫键断裂并形成正确的二硫键,使蛋白质形成天然构象;肽-脯氨酰顺反异构酶:是蛋白质三维构象形成的限速酶,在肽链合成需要形成顺式构型时,可使多肽链在各脯氨酸弯折处形成准确折叠。(2)蛋白质一级结构的修饰主要是肽键水解和化学修饰。水解主要是切除肽链N端和C端的部分序列。此外,水解加工使某些无活性的蛋白前体经蛋白酶水解生成有活性的蛋白质、多肽或小分子活性肽类;化学修饰可对蛋白质分子中的氨基酸残基进行多种化学修饰,包括糖基化、羟基化、甲基化、磷酸化、二硫键形成、亲脂性修饰等。(3)空间结构的修饰包括
34、亚基聚合和辅基连接。具有四级结构的蛋白质各亚基之间通过非共价键聚合形成寡聚体才能发挥作用;结合蛋白合成后需要结合相应的辅基才能成为天然功能的蛋白质。3 .简述氨基酸的活化及相关酶的作用特点。答:氨基酸与特异tRNA结合形成氨基酰-tRNA的过程称为氨基酸的活化。由氨基酰-tRNA合成酶催化。其反应如下:氨基酸+ATP-E一氨基酰-AMP-E+PPi氨基酰-AMP-E+tRNA一氨基酰-tRNA+AMP+E该酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。另外还具有较正活性,即可将反应任一步骤中出现的错配加以改正。此酶对维持蛋白质合成高度保真性是必不可少的。4 .原核生物和真核生物翻译过程有何异同?答:
35、相同点:(1)底物相同(20种编码氨基酸);(2)搬运氨基酸的工具均是tRNA;(3)模板(mRNA);(4)合成场所(核蛋白体);(5)掺入肽链前需氨基酸活化;(6)化学键(肽键);(7)合成过程(三个阶段);(8)聚合方向(N端一C端);(9)产物(多肽链);(10)通用一套遗传密码;(11)需消耗能量;(12)需酶和蛋白质因子参与;(13)需无机离子Mg2+和K+;(14)需翻译后加工;(15)多聚核蛋白体现象翻译原核生物真核生物不同点模板mRNA结构多顺反子mRNA,有S-D序列,rpS-1辨认序列单顺反子mRNA,有5'帽子、3'poly(A)尾、编码区和非编码区核蛋
36、白体的组成三种rRNA(16S、5S、23S)和57种蛋白质四种rRNA(18S、5S、5.8S、28S)和82种蛋白质与转录的关系转录和翻译都在胞质中,同步进行转录在细胞核,翻译在细胞质,/、同步进行起始起始氨基酰tRNA,八fMetfMet-tRNA一,八.MetMet-tRNAi起始因子三种(IF-1、IF-2、IF-3)10种(eIF-1、2、2B、3、4A、4B、4E、4G、5、6)翻译起始复合物形成时各成份的结合顺序mRNA先于fMet-tRNAfMet结合小业基mRNA后于Met-tRNAiMet结合小业基mRNA与小亚基结合的机制S-D序歹U/16S-rRNA(RNA-RNA)
37、、rpS-1辨认序列/rpS-1(RNA-蛋白质)涉及多种蛋白因子形成的复合物(如帽子结合蛋白复合物一eIF-4F复合物,包括4A、4E、4G各组分)能量消耗的种类GTPATP和GTP正延长因子种类EF-T(Tu)EF-T(Ts)EF-GeEF1-“eEF1-31eEF-2功能促进氨基酰-tRNA进入A位,结合并分解GTP调节亚基有转位酶活性,促进转位反应促进氨基酰-tRNA进入A位,结合并分解GTP;相当于EF-T(Tu)调节业基;相当于EF-T(Ts)有转位酶活性,促进转位反应;相当于EF-G终止释放因子种类RF-1RF-2RF-3eRF功能识别UAA、UAG,诱导转肽酶变为酯酶识别UAA
38、、UGA,诱导转肽酶变为酯酶介导RF-1与RF-2的作用;有GTP酶活性识另ijUAA、UAG、UGA;诱导转肽酶变为酯酶;有GTP酶活性翻译后加工修饰简单,无蛋白质的靶向运输复杂,有蛋白质的靶向运输卸载tRNA排出方式进入E位然后排出直接从P位脱落(核蛋白体无E位)5 .为什么喋吟霉素可抑制蛋白质的生物合成?答:喋吟霉素结构与酪氨酰-tRNA相似,在翻译中可取代某些氨基酰-tRNA而进入核糖体的A位,但延长中的肽酰-喋吟霉素容易从核糖体脱落,中断肽链合成。6 .干扰素干扰蛋白质生物合成的机制是什么?答:干扰素是真核细胞感染病毒后分泌的一类具有抗病毒作用的蛋白质,可抑制病毒的繁殖。机制是:(1
39、)干扰素在某些病毒dsRNA存在下,诱导特异蛋白激酶活化,此活化的蛋白激酶使真核eIF-2磷酸化而失活,从而抑制病毒蛋白质合成。(2)与dsRNA共同活化特殊的2'-5'寡聚腺甘酸合成酶,以ATP为原料合成2'-5'寡聚腺甘酸(2'-5'A),2'-5A可活化RNaseL,后者使病毒mRNA发生降解从而阻断病毒蛋白质合成。7 .原核生物mRNA在核糖体小亚基上如何准确定位?答:原核生物mRNA在核糖体小亚基上准确定位结合涉及两种机制:(1)在各种mRNA起始AUG密码上游约8-13个核甘酸部位,存在一段由4-9个核甘酸组成的一致序列,富含
40、喋吟碱基,如-AGGAGG-,称为S-D序列,又称核糖体结合位点。此与原核生物核糖体小亚基16S-rRNA3端富含喀呢的短序列,如-UCCUCC-可配对结合,以促使mRNA与小亚基结合。(2)mRNA序列上紧接S-D序列后的小段核甘酸序列,可被核糖体小亚基蛋白rpS-1识别并结合。通过以上RNA-RNA、RNA-蛋白质相互作用,mRNA序列上的起始AUG即可在核糖体小亚基上准确定位而形成复合体。8 .简述抗生素与毒素的种类及其作用机制。答:(1)抗生素:是一类由某些真菌、细菌等微生物产生的药物,有抑制其它微生物生长或杀死其它微生物的能力,对宿主无毒性的抗生素可用于预防和治疗人、动物和植物的感染
41、性疾病。包括影响翻译起始的抗生素和影响翻译延长的抗生素(如干扰进位的抗生素、引起读码错误的抗生素、影响肽键形成的抗生素、影响转位的抗生素)。作用机制:抗生素作用位点作用原理应用伊短菌素原核、真核核蛋白体小业基1阻碍翻译起始复合物的形成抗肿瘤药四划、素、土霉素原核核蛋白体小业基抑制氨基酰-tRNA与小业基结合抗菌约链霉素、新霉素、巴龙霉素原核核蛋白体小业基改变构象引起读码错误、抑制起始抗菌药氯霉素、林口霉素、红霉素原核核蛋白体大亚基抑制转肽酶、阻断肽链延长抗菌药喋吟霉素原核、真核核蛋白体使肽酰基转移到它的氨基上后脱落抗肿瘤药放线菌酮真核核蛋白体大业基抑制转肽酶、阻断肽链延长医学研究夫西地酸、细球
42、菌素;EF-G抑制EF-G、阻止转位抗菌约大观霉素原核核蛋白体小业基阻止转位抗菌约(2)毒素:包括白喉毒素和篦麻蛋白。作用机制:白喉毒素作为一种修饰酶,可使eEF-2发生ADP糖基化共价修饰,生成eEF-2腺甘二磷酸核糖衍生物,使eEF-2失活。篦麻蛋白可作用于真核生物核糖体大亚基的28SrRNA,催化其中特异腺甘酸发生脱喋吟基反应,使28SrRNA降解,使核糖体大亚基失活。9 .简述各种RNA在蛋白质生物合成中的功能。答:mRNA是蛋白质生物合成的直接模板,以三联体密码的方式将遗传信息从核酸传递给蛋白质,转变为蛋白质一级结构信息。tRNA是氨基酸的运载工具,以氨基酰-tRNA的形式将底物氨基酸搬运至核糖体上生成肽链。rRNA与核内蛋白质结合组成核糖体,作为蛋白质生
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