清大天一个性化细胞培养基

1、清大天一个性化细胞培养基针对在生物制药行业使用个性化细胞培养基的必然趋势以及我国生物医药行业对个性 化细胞培养基的潜在需求，清大天一依托于在细胞培养基研发和动物细胞大规模培养方面具 有丰富经验的研发团队， 潜心研究，开发出了国有个性化细胞培养基，成功应用于生物制药企业，获得一致的市场好评。一.清大天一个性化细胞培养基简介清大天一个性化细胞培养基主要是在基础培养基如DMEM、199、MEM、MBRM、BBSM的基础上，针对生物制药中常用动物细胞基质而研制开发的，主要产品及其特点（参见表1）。表1清大天一个性化细胞培养基主要特点产品名称产品代 号特点DMEMMD205改良DMEM，具有较强细胞维持

2、能力， 可增加收液次数，提高病毒表达率。MD208DMEM培养基的改良低血清培养基，可用于CHO细胞的低血清培养。MD210改良DMEM，适用于 Marc145细胞培养。199MD502改良199,具有高缓冲性能，提高病毒滴度MD504199培养基的改良低血清培养基。可用于Vero细胞、地鼠肾细胞的低血清培养。MD505199培养基的改良低血清培养基。可用于Vero细胞微载体反应器低血清培养。MEMMD610适用于二倍体细胞的培养MD611MEM培养基的改良低血清培养基。可用于BHK21细胞的低血清培养。MBRMMD900不含苯酚红，可用于 Marc145细胞微载体反应器低血清悬浮培养。BBS

3、MMD910可用于BHK21细胞反应器低血清悬浮培养。SAF-CHO-G-001SAF106无血清无动物来源组分细胞培养基，CHO悬浮细胞生长培养基，不含苯酚红。SAF-CHO-F-001SAF107无血清无动物来源组分细胞培养基，CHO细胞培养基添加剂，不含苯酚红。SAF-NS0-G-001SAF110无血清无动物来源组分细胞培养基，NS0悬浮细胞生长培养基。二.清大天一个性化细胞培养基应用实例应用一：BHK21细胞生物反应器悬浮培养基和维持液的应用细胞培养基：清大天一 BHK21细胞悬浮培养细胞培养基MD910/MD920。MD910 :用于BHK21细胞增殖培养，血清浓度可降低为3%。M

4、D920 ,用于病毒培养，无需使用血清和水解乳蛋白。生物反应器：ClavorusTM650L反应器进行驯化培养，挑选良好的驯化细胞进行细胞克隆，并进行口蹄疫病毒敏感性实验，筛选出口蹄疫病毒敏感性悬浮培养BHK21细胞，确定为BHK21C13-BR细胞，作为口蹄疫疫苗生产的种子细胞。500L反应器：使用反应器逐级放大技术，BHK21细胞密度可达1-3 x 16Cells/ml。抗原产量：口蹄疫抗原产量是转瓶培养的10-20倍，换算为单位细胞产量为转瓶培养的3-7倍。应用二：Marc145细胞微载体培养基的应用细胞培养基：清大天一反应器Marc145细胞专用培养基 MD900微载体：cytodex

5、-1 , GEHC , 8-10g/L生物反应器：ClavorusTM 120L反应器细胞密度可达3.6 x 10cells/ml工艺路线：转瓶细胞直接接种培养工艺应用二：Vero细胞微载体培养基的应用某企业使用清大天一反应器高密度培养基（细胞培养：细胞培养后期培养液灌流体积可达到密度达到1 x 10cells/ml以上。病毒培养收获：接种狂犬病毒后可连续收液20天以上，收获病毒液使用小鼠脑内法检测病毒毒力在9.0以上。疫苗制备：使用工作体积为10L的反应器，收获的病毒液制备狂犬疫苗，每罐可制备23万人份，疫苗效力效价在4IU/瓶以上。应用四：Vero细胞微载体培养基的应用细胞培养基：清大天一

6、反应器咼密度Vero细胞专用培养基微载体：GE 的 Cytodex-1 5g/L细胞培养体积：65LVero细胞密度在4.5 x 10ells/ml时的照片：均匀、致密。应用五：Vero细胞微载体培养基的应用细胞培养基：清大天一反应器咼密度Vero培养基。微载体：GE 的 cytodex-1。在5升B.Braun生物反应器灌注培养Vero细胞，120hr时微载体上的细胞如下图，144hr细胞密度提高至7.1 x 1&cells/ml。左: 5升反应器培养 Vero细胞，120hr, 100x应用六：无血清无动物组分的研究050100150200Time（小时）)lm/ sle 密胞 细右：5升

7、反应器灌注培养CHO细胞培养基全悬浮培养细胞株：CHO工程株(上海某抗体药物公司构建)。无血清培养基：A :清大天一公司的 SAF-CH0-G-003 ;B :国外某培养基公司的无血清培养基实验方法：5X 10cells/ml接种，每天计数，留样测定IgG。结论：(1)批培养的最高细胞密度均可达到4.5 x 106cells/ml,细胞存活率基本一致。(2) IgG产量比较抗体浓度：清大天一：148ug/ml国外某公司：114ug/ml。清大天一提高 30%。00Vero细胞的生长曲线CHO细胞表达人源化单克隆抗体6050403020010国外某公司345Time/d%/yLDav706090

8、8020JTl/50 11111111012345678Time/d细胞活力比较0清大天一ii678160o2804001234567Time/dIgG产量比较抗体浓度应用七：无血清无动物组分 CHO细胞培养基在200升Wave反应器中培养 CHO细胞生产人 源化抗体细胞培养基：清大天一无血清无动物组分CHO培养基及CHO营养添加剂(无酚红)。细胞培养：在200升的Wave反应器中悬浮培养 CHO细胞, 活细胞密度达到1 x 10cells/ml，连续灌注1个月以上。抗体表达情况：抗体表达水平超过进口的无血清培养基。应用八：营养添加剂在流加培养CHO细胞表达抗体中的作用00246 810分组实

9、验：批培养：对照培养（con trol）流加培养：SAF-CHO-Feed-1营养添加剂实验方法：每天取样，计数、测定IgGtime/day当细胞密度达到 3 x 1&ells/ml左右时，隔天补加定量的营养添加剂。细胞生长和抗体生成情况应用九：EPO专用细胞培养基培养 CHO细胞生产重组促红细胞生成素培养基：清大天一 EPO生产专用细胞培养基；反应器： NBS7.5L反应器，FibraCel? Disks 细胞培养：CHO细胞密度约为6-8 x 10cells/ml。EPO产量（转瓶）：多收液1次，EPO产量提高了 27.5%。应用十：ST细胞专用细胞培养基的应用生物反应器：B.Braun反应器，工作体积5L 微载体：Cytod