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文档简介
1、选修1专题2课题1微生物的实验室培养教案一、课题目标1 .知识目标a. 了解有关培养基的根底知识.b. 了解消毒和灭菌方法.2 .水平目标a.进行无菌技术操作.b.进行微生物培养.3 .情感目标形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神.二、课题重点无菌技术操作.三、课题难点无菌技术操作.四教学流程教学教师活动学生设计流程活动意图环节1.专题导入:提供章页图材料和微生物相关图片,讲解微生物与人类的密切关阅田一:系,导入本专题.读、导入课程材料:生物学的开展史说明,诸多革命性改变人类对生命熟悉的事件,都与微倾本早导入和本生物有着千丝万缕的联系.例如,肺炎双球菌转化实验证实DNA遗传物质,听.节目
2、青霉素的发现,A个在和DNA分子的体外构建等.标.微生物包括五类:3黄毒、细菌;放线菌、真菌;野生动物.2.课题导入:讲解课题背景和课堂目标.课题背景:19世纪中期,关系到法国经济命脉的酿造业曾一度遭受消灭性打击.在生产过程中,出现了葡萄酒变酸、变味的怪事.经过一番研究,法国科学家巴期德发现,导致生产失败的根源在于发酵物混入杂菌.由此人们认识到保持培养物纯洁的重要性.预防杂菌入侵,获得纯洁的培养物,是研究和应用微生物的前提.在实验室培养微生物,一方面需要为培养的微生物提供适宜的营养和环境条件,另一方面需要保证其他微生物无法混入.在本课题,我们将通过培养大肠杆菌实验,学习微生物培养的根本技术.课
3、题目标:a.了解有美培养基的根底知识;b,进行无菌技术的操作;c.进行微生物的培养.一、根底知识()比加基1 .概念:讲解培养基概念:由人工方法配制而成的,专供微生物生长繁殖使用的混合营养基质.2 .种类展示培养基相关图片,讲解根据物理性质划分的培养基种类、用途.阅读、倾听.分析、回答.归纳、回了解基相关知识.标派齿养基类型.配制特点与主要旗口物理的固体培养基#参加琼脂转多口雷冲别离.鉴定.计毅.半固体埼养基参加晾腾较少,菌加保价役体培养基.不参加就/工业生玄,迄矣静*3.成分(1)根本W:iooc培养基成成分mL牛肉膏蛋E分明东培养基的营养超9成表格,让学生分析提供的主要营界物质答复以下问题
4、.牛肉膏5g碳源、磷酸盐和维生素蛋白月东10g氮源和维生素NaCl5g无机盐H2O定容至1000ml氢兀素、氮兀素问题1:培养基包括哪些根本成分水、碳源、氮源、无机盐问题2:从细胞的化学元素组成来看,培养基中为什么都含有这些营养成分CH、QN、P、S是构成细胞原生质的根本元素,约占原生质总量的97%以上.【小结】共同归纳培养基的根本成分和主要来源.营界物质含义主要来源碳源能提供碳元素的物质无机物:CO2NaHCO3有机物:糖类、脂肪酸、石油、花生粉饼等环节二:讲授新课氮源能提供氮元素的物质无机物:N2、NH3氨盐、硝酸盐;有机物:尿素、牛肉膏、蛋白月东等水细胞生命沽动必/、可少的物质培养基、大
5、气、代谢产物无机盐提供除碳、氮兀素以外的各种重要元素,包括某些大量元素培乔基、大气(2)特殊成分和条件提醒学生培养基还需要满足不同微生物生长对PH氧气、特殊营养物质的要求:如乳酸杆菌时需要添加维生素,霉菌需要将培养基pH调节为酸性,细了解消毒和灭菌方法.菌时需要将pH调节为中性或微碱性.倾听、阅读、思考、回答.(二)无菌技术讲解:无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有预防杂菌污染的方法.强调无菌操作是培养微生物成功的关键.1 .主要方面讲解无菌技术主要方面:(1)对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒;(2)将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌;(3)为预防周围微生物污染,实验操
6、作应在酒精灯火焰附近旁进行;(4)预防已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触.2.消毒与灭菌的比拟工程理化因素强度消灭微生物数量是否消火芽抱和抱子知温和局部否灭菌强烈全部是3.常用的消毒与灭菌的方法列表让学生进行比拟.比较、回答.让学生阅读教材“实验室常用的消毒和灭菌方法材料,共同归纳常用的消毒与灭菌的方法,答复以下问题.(1)消毒方法:日常生活经常用到的是煮沸消毒法;对一些不耐高温的液体,那么使用巴氏消毒法(作简要介绍)对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果,然后使用紫外线进行物理消毒.实验操作者的双手使用酒精进行消毒;饮水水源用氯气进行消毒.2灭菌方法:接种环
7、、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱;培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅.外表灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯.问题1.无菌技术除了用来预防实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的还能有效预防操作者自身被微生物感染.问题2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌.如果需要,请选择合适的方法.1培养细菌用的培养基与培养皿;2玻棒、试管、烧瓶和吸管;3实验操作者的双手1、2需要灭菌;3需要消毒.【典型例题】2021江苏做“微生物的别离与培养实3时,以下表达正确的选项是A.高压灭菌加热结束时
8、,翻开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖B.倒平板时,应将翻开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C.为了预防污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上二、实验操作一制备牛肉膏蛋白月东培养基让学生阅读教材,讲解制备步骤:1 .计算:根据配方比例,计算100mL培养基各成分用量.2 .称量:准确称取各成分.称取牛肉膏和蛋白月东时动作要迅速,目的是预防牛肉膏吸收空气中水分.3 .溶化:加水加热熔化牛肉膏;参加蛋白月东和氯化钠继续加热;参加琼脂;用蒸储水定容到100mL整个过程不断用玻棒搅拌,目的是预防琼脂糊底而导致烧杯破裂.4 .调pH:用1mol/
9、LNaOH溶液调节pH至偏碱性.5 .灭菌:将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加塞包扎后用高压蒸汽灭菌锅灭菌;所用培养皿用报纸包扎后用干热灭菌箱灭菌.6 .倒平板:待培养基冷却至50c左右时在酒精灯火焰附近操作进行.阅读、倾听、思考、回答.【方法点拨】倒平板的方法及考前须知图文讲解倒平板的方法及考前须知,让学生答复以下问题.火焰旁右手拿锥形瓶,左手拔出棉塞;右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰;左手将培养皿翻开一条缝隙,右手将培养基倒入培养皿,马上盖上皿盖.待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置.问题1.培养基灭菌后,需要冷却到50c左右时,才能用来倒平板.你用什么方法来估计培养基的温度问题2.
10、为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰问题3.平板冷凝后,为什么要将平板倒置问题4.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗为什么二纯化大肠杆菌讲述:微生物接种方法很多,最常用的接种方法有:平板划线法和稀释涂布平板法.1 .平板划线法(1)定义和目的讲解平板划线法定义和目的:通过接种环在琼脂固体培养基外表连续画线的操作,将聚集的菌钟逐步稀释分散到培养基的外表.在数次画线后,可以别离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落.别离后,一个菌体便会形成一个菌落,这是消除污染杂菌的通用方法,也是用于筛选菌株的最简便方法之一.(2)操作步骤让学生
11、阅读教材平板划线法操作图文资料,讲解操作步骤,让学生答复以下问题.将接种划、在酒精外火焰上灼烧直至烧红.在酒精灯火焰旁冷却接种环,并翻开大肠杆菌的菌种试管的棉塞.将菌种试管口通过火焰到达消灭试管口杂菌的目的.将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种.将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞.将皿盖打心条缝隙,把接种环伸入平板内划35条平行线,盖上皿盖,不要划破土口加小.灼烧接种环,冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线.重复上述过程,完成三、四、五区域内划线.注意不要将第五区的划线与A区划线相连.将平板倒置放在培养箱中培养.问题1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环在划线操作结束时
12、,仍然需要灼烧接种环吗为什么问题2.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线问题3.在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线2 .稀释涂布平板法(1)定义和目的讲解定义和目的:将菌液进彳L系列梯度稀释,并将不向稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养.当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成倾听、思考.阅读、倾听、思考、回答.进行微生物培养.的标准菌落.2操作步骤让学生阅读教材稀释涂布平板法的系列稀释操作和涂布平板操作图文材料,解相关操作步骤,让学生答复以下问题.系列稀释操作用灼烧冷却的移液管吸取103、104、105、106.1mL菌液注入编号为101试
13、管中,并吹吸3次,使之混匀.从101倍液中吸取1mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀,获彳#102倍液.依此类推.注意:移液管需要经过灭菌.操作时,试管口和移液管离火焰12cm处.涂布平板操作途而翱柱涂布幡注在盛仃泗柑的烧杯中值少量阐泄小超过Imb碗川I到哈界陆刃而【典型例题】拘油有少量酒稻的添布器在火焰上弓I燃.猛泗柏燃或jlT"i.岗1工抬1JK用涂为裾枸菌液均勾地:涂相在地芥-J感必山I滁布时可转的1111.H'lVf淞涂布均.J2021江苏卷.25多项选择漆酶属于木质降解酶类,在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途.以下图是别离、纯化和保存漆酶菌株的过程,相关表达
14、正确的是倾听、阅读、思考、回答.A.生活污水中含有大量微生物,是别离产漆酶菌株的首选样品B.筛选培养基中需要参加漆酶的底物,通过菌落特征挑出产漆前的菌落C.在涂布平板上长出的菌落,在通过划线步纯化D.斜面培养基中含有大量营养物,可在常温卜长期保存菌株【答案】BC三、结果分析与评价让学生分析答复相关问题,加以讲解.1 .未接种的培养基外表是否后菌落生长如果后菌落生长,说明什么培养未接种培养基作用是对照,有菌落形成,说明培养基灭菌不彻底.2 .接种大肠杆菌培养基上,独立菌落颜色、形状、大小如何大肠杆菌菌落呈白色,为圆形,光滑有光泽,边缘整洁.3 .培养12h和24h后,观察到结果一样吗如果不向,分析产生差异原因.菌落大小不同;菌落分布位置相同.原因是时间越长,菌落中细菌繁殖越多,菌落体积越大;菌落的位置不动,但菌落数增多.4 .如果你在培养基上观察到/、向形态菌落,可能是哪些原因引起的培养基火菌/、彻底或杂国感染等.能够对实验结果进行分析.演练、回答.分析、回答.环节三:课堂小结共同回忆本节要点:一笆关坦、/口笠Lg(1)营养
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