多糖的分子量与分子量分布测定标准操作规程_第1页
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1、ujixruj.SSbopcon好好学习天天向上中国 3000 万经理人首选培训网站更多免费资料下载请进：http:/好好学习社区多糖的分子量与分子量分布测定标准操作规程目的：建立多糖的分子量与分子量分布测定的标准操作规程。2.依据：中华人民共和国药典2000 年版二部。3.范围：适用于药品中多糖的分子量与分子量分布的测定。4.职责：QC 检验员对本标准的实施负责。5.程序：5.1.对仪器的一般要求：色谱柱为测多糖专用凝胶柱（按所测样品的分子量大小选择特定排阻范围的凝胶 柱）。检测器为示差折光检测器。5.2.系统适用性试验：按各品种项下要求对仪器进行适用性试验，规定分析状态下色谱柱的最小理论板

2、数 （n）和供试品在该分析状态下的分配系数（Kd）应达到规定的要求。Kd= -tRt式中 tR为供试品峰的保留时间；t0为完全被填料颗粒网孔排阻的大分子的保留时间，一般指蓝色葡聚糖的保留时间。tT为能自由进出填料颗粒网孔的小分子的保留时间，一般指葡萄糖的保留时间。5.3.测定法：5.3.1.系统校正：根据供试品分子量大小，一般选用5 个已知分子量的多糖标准品（常用的为葡聚糖）分别用流动相制成每 1ml 中约含 10mg 的标准溶液，分别取上述标准溶 液ujixruj.SSbopcon好好学习天天向上中国 3000 万经理人首选培训网站更多免费资料下载请进：http:/好好学习社区25 卩 I,

3、注入液相色谱仪，记录色谱图。由 GPC 专用软件绘制标准曲线，得线性回归方程:1gMw=a+btR式中 MW为标样的已知重均分子量;tR为标样的保留时间。5.32 样品测量：取供试品溶液 25d注入液相色谱仪，记录色谱图，按下式计算 分子量：Mn二艺Rli/艺(Rli/Mi)Mw=E( RliMi) /艺RliD =MW/Mn式中 Mn为数均分子量；Rli为为样品 i 级分的物质量，即供试品在保留时间 i 的峰高；Mi为样品 i 级分的分子量，即供试品在保留时间 i 的分子量。5.4.结果处理：采用 GPC 专用软件，可获得供试品归一化色谱图，微分、积分分子量分布图，各 时间点的分子量(片段数据)和各种平均分子量。根据供试品需要选择各项测定结果。ujixruj.SSbopcon好好学习天天向上中国 3000 万经理人首选培训网站更多免费资料下载请进：http

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