




版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
1、蒲葵子的体外抗癌活性陈艳,林新华,李少光,翁绳美,姚宏【摘要】目的研究蒲葵子提取物的各萃取部位体外抗肿瘤作用。方式采纳四甲基偶氮畦盐3TT法)比色法,观看蒲葵子提取物的各萃取部位对肝癌细胞HepG2和白血病细胞HL60增殖的抑制作用。结果蒲葵子提取物的各萃取部位在体外对肝癌细胞HepG2和白血病细胞HL60有明显的抑制作用,正丁醇部位的半数抑制率别离为和,成效最为显著。结论蒲葵子提取物的各萃取部位能抑制肝癌细胞HepG2和白血病细胞HL60的增殖,有较强的体外抗肿瘤活性。【关键词】棕桐科;抗肿瘤药;提取法ABSTRACT:ObjectiveToinvestigateanti-tumoreffe
2、ctoftheextractsofLivistonachinesisinvitro.MethodsThecytotoxiceffectsofthefourkindextractsofLivistonachinesisontwotumorcelllinesculturedinvitroweretestedbyMTTassay.ThetumorcelllineswereHepG2andHL60.ResultsTheextractsofLivistonachinesisinducedsignificantgrowtharrestedintwomalignanttumorcelllineswhichc
3、ulturedinvitro.IC50ofthesecellsexposedtotheextractsfromN-butanolfor48hoursapproach%and%.ConclusionTheN-butanolextractsofLivistonachinesishadobviousanti-tumoractivityinvitro.KEYWORDS:Palmaceae;antineoplasticagents;extraction蒲葵(Livistonachinesis.)属于棕桐科(TrachycarPusFortinei)常绿乔木,蒲葵子为该植物种子,其性味平、淡,具有败毒抗癌
4、、消瘀止血之功效。民间经常使用其医治白血病、鼻咽癌、绒毛膜癌、食管癌,成效显著1-20笔者对福建产蒲葵子进行初步提取和分离,并研究各提取部位体外抗肿瘤活性,挑选有抗癌活性的提取部位。1材料与方式材料试剂全自动酶标仪(Mod550,美国Bio-Rad公司);二氧化碳培育箱(美国Forma公司);RPMI1640培育基(美国Gibco公司);小牛血清(美国Hyclone公司);胎牛血清(澳大利亚Maverick公司);四甲基偶氮口坐盐(MTT,美国Amresco);胰蛋白酶(美国Difco公司);嘎理蓝(华丽生物工程公司北京分公司);其余试剂均为国产分析纯。药物搜集福建福州地域产蒲葵子,经福建医科
5、大学天然药物学系张永宏教授鉴定为棕桐科植物蒲葵的干燥种子。方式供试品的制备蒲葵子粗粉1g用70%乙醇10mL回流提取3次(每次2h),归并提取液,浓缩,冷冻干燥,取得醇浸膏。醇浸膏用水30mL混悬,依次用石油酸、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,别离取得萃取液,浓缩,冷冻干燥,取得各个萃取部位浸膏。分取适量的石油酸、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取部位浸膏,以70%乙醇(最大终浓度5%。)助溶,加RPMI1640培育基,配成2000Hg/mL样品预备液。各样品预备液以RPMI1640培育基依次稀释成终浓度为1000,333,111,36,12ug/mL等5个浓度供试液,4C保留,备用。细胞培育人肝癌细胞株
6、(HepG2)和人早幼粒细胞白血病细胞株(HL60)由福建医科大学药理研究所冻存提供。HepG二、HL60均培育于含10%小牛血清、青霉素100IU/mL及链霉素100Ug/mL的RPMI1640培育基中,每3d换液1次,每5d传代1次。细胞均置于37、体积分数为的CO二、饱和湿度的培育箱中,取对数生长期细胞用于实验。MTT法取对数生长期HepG二、HL60细胞,以%胰酶-PBS液充分消化后,以RPMI1640培育基稀释成5X104mL-1单细胞悬液,接种于96孔细胞培育板,每一个浓度复种3孔,每孔180uLo置培育箱温育12h后,药物组每孔加不同浓度供试液20UL,平行设空白对照组(用等体积
7、的RPMI1640培育基代替受试药物),共培育48ho每孔加入1mg/mLMTT溶液50uL,继续培育4h后,吸尽上清液,每孔加入二甲基亚飒(DMS0)150UL,充分溶解MTT还原产物。置酶标仪上于492nm波优势测定各药物组和空白组的光密度(D),按公式计算取得药物对肿瘤细胞生长的抑制率QR,%)和半数抑制浓度(IC50),并对药效进行初步的评判。IR%=(1-加药组平均D值/对照组平均D值)X100%2结果萃取部位对HepG2细胞的细胞毒性对HepG2细胞作用48h后,各萃取部位不同浓度的抑制率呈量效关系。细胞的毒性大小依次为正丁醇>乙酸乙酯>石油酸&
8、gt;氯仿。其中,正丁醇具有较高的细胞毒性,IC50仅为Ug/mL(IC50<20Ug/mL);乙酸乙酯具有必然的细胞毒性(表1)。表1蒲葵子各萃取部位对HepG2的细胞毒性(略)萃取部位对HL60细胞的细胞毒性对HL60细胞作用48h后,采纳MTT法比色法,各萃取部位不同浓度的抑制率呈量效关系(表2)o细胞毒性大小依次为正丁醇>乙酸乙酯>石油醛>氯仿。其中,正丁醇和乙酸乙酯都具有较高的细胞毒性,IC50为和ug/mLo表2蒲葵子各萃取部位对HL60的细胞毒性(略)3讨论蒲葵子在民间被普遍用于医治各类癌症,其中福建民间将蒲葵子与猪肉一同炖
9、至肉熟烂,饮汤吃肉,用于鼻咽癌、食道癌的医治。国外文献报导,蒲葵子的水提物对肿瘤血管发生具有较强的抑制作用,且该水提物对人乳腺癌细胞(Mcf-7)、鼠成纤维瘤细胞和人结肠癌细胞(Ht-29)体外抑制作用较强,对成纤维细胞瘤小鼠模型具有较好的医治成效,未观看到毒副作用;蒲葵子的乙醇提取物g/mL)对人白血病细胞HL60生长有较强的抑制作用,IC50为1/50倍的提取液(即2ug/mL)3-4o本研究采纳MTT法对蒲葵子的石油酸、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取部位进行体外抗肿瘤活性挑选研究,结果说明,蒲葵子粗提物的上述各萃取部位对HepG2和HL60细胞有不同程度的抑制作用,均在给药后24h内成效明显
10、。乙酸乙酯对HepG2和HL60胞的最大抑制率别离达到%和%,正丁醇最大抑制率别离达到%和%,正丁醇部位的IC50别离为和Ug/mL,说明乙酸乙酯部位和正丁醇部位具有明显的体外抗肿瘤活性,且有明显的剂量依托性。本研究为抗肿瘤药物的粗筛,所用的样品为蒲葵子乙醇提取物的各个萃取部位。结果显示,石油酸部位和氯仿部位对HepG2和HL60的作用都不明显。可能是由于石油酸部位和氯仿部位的溶解性稍差,致使有效浓度太低,而其他部位均能达到较好的溶解。这一问题有待进一步研究。上述结果提示,在这两个萃取部位(乙酸乙酯部位和正丁醇部位)中可能存在抗癌作用较强的活性成份,因此,有必要对蒲葵子进行系统的物质基础研究。为寻觅到构效关系明确的活性单体成份,笔者拟对蒲葵子的各萃取部位进行进一步的植物化学细分工作,深切研究其化学成份及其抗肿瘤作用的特点,为开发出新的抗癌药物奠定基础,也为临床合理用药提供理论依据。【参考文献】1广州军队后勤部卫生部.经常使用中草药手册M.北京:人民卫生出版社,1969:772-773.2赵国平,戴慎,陈仁寿.中药大辞典M.下册.上海:上海科学技术出版社,2001:2459-2460.3 SartippourMR,LiuC,ShaoZM,etal.Livistonaextractinhibits
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 加强人才培养与教育承诺书6篇
- 2025年胸牌工牌项目申请报告
- 2025广东阳江市阳春市高校毕业生就业见习招募8人(第四期)考前自测高频考点模拟试题附答案详解(考试直接用)
- 一场春雨中的情感流露抒情作文4篇
- 难忘的一位朋友写人作文6篇
- 商务合同评审与签订快速指导手册
- 2025江苏南京公共交通(集团)有限公司招聘1人考前自测高频考点模拟试题完整参考答案详解
- 海外投资诚信保障书(5篇)
- 健康教育推动职责承诺书(6篇)
- 青海省海东市部分学校2024-2025学年高二下学期6月联考地理试题(解析版)
- 2025年贵州省贵阳市警(协警)招聘考试题库及答案
- 2025-2030中国啤酒企业海外并购案例及跨文化整合经验总结
- 2025成人高考政治真题及答案
- 2.2运动与相互作用(第2课时二力平衡)学案-八年级科学浙教版上册
- 2025年纪检监察业务知识试题库及参考答案
- 国开2025年《行政领导学》形考作业1-4答案
- 盆底(肌)康复理论及技术规范考核考核试题及答案
- 2025年甘肃省辅警考试真题及答案
- 2024-2025年广东省广州市番禺中学附属学校八年级上学期数学期中考试卷(含答案)
- (2025秋新版)人教版二年级数学上册全册教案(教学设计)
- 百万医疗险基础知识培训课件
评论
0/150
提交评论