医用臭氧对大鼠骨骼肌病理学的影响英文摘要

1、医用臭氧对大鼠骨骼肌病理学的影响英文摘要：Impact of Different Concertrations of Ozone Injection on Pathological Changes of Rat SkeletaMuscleAbstractObjectiveTo evaluated the pathological changes of skeletalmuscle in normalrabbit by different concentrations of ozone injection. Methods30 wistar rars were randomlydividedin

2、to5 groups (n=6).group ozone10， group ozone30， groupozone50， groupozone80，group control.In group， ， and ， 1ml of ozone 10 g/ml 、30g/ml 、50 g/ml 、80 g/mlwas injected into right ectogluteus respectively，and in group， punctura at the same pointwithout any injection. Biopsy was performed after 10min， 30

3、min and 3 weeks with thelightmicroscope，selectingthe injectionarea. ResultsComparedto the control,lightmicroscopeof group, and showed myocyte swelling, myocytes bouncary became unclear, transversestriation became disorder, myocyte necrosis, dissolve and vacuolus degeneration partly after10min both i

4、n two groups. Inflammation cells infiltrated in muscle interspace and blood vesselbased on myocyte necrosisand dissolveinthe injectionarea after30min. Myocyte atrophyobviously,fibroustissueaccrementitionponderosus, hyalinizationpartlycouldbe seen after3 weeks. Therewere no abnormal pathologicalchang

5、es ingroup and . ConclusionsMyocytedamage occurs afterinjectionofozone with concentrationof30 g/ml 、50g/mland 80g/ml ， fibroustissue repairsthe damage after 3 weeks. Ozone with concentration of 10g/mldo little harm to skeletal musle.Key words Medical Ozone; Skeletal Muscle; Pathology；中文摘要：【摘要】目的通过观察

6、医用臭氧注射后，不同时间段大鼠臀大肌结构的变化，来评价不同浓度医用臭氧在骨骼肌注射中的安全性。方法30只大鼠随机分 5组（ n=6），医用臭氧组：臭氧10、臭氧 30、臭氧50、臭氧 80组分别注射浓度为10g/ml 、 30 g/ml 、50g/ml 、 80 g/ml 的医用臭氧 1ml，对照组仅行穿刺不注射；穿刺注射部位在右侧臀大肌，注射的气体均为1ml。注射后 10min 、30min 及3周后分别对医用臭氧注射点取活检在光镜下行病理学检查。结果与对照组比较， 光镜下显示臭氧30、臭氧 50及臭氧 80三组注射医用臭氧后10min 注射点见肌细胞肿胀，肌细胞边界不清，部分肌细胞坏死溶解

7、，空泡变性；30min后在肌细胞坏死溶解的基础上出现了肌细胞间隙和血管内炎症细胞浸润；3周后切片显示肌细胞明显萎缩，较多纤维组织增生，部分伴有玻璃样变，而臭氧10组与对照组间比较没有明显差异。结论浓度为 30g/ml 、50 g/ml 、80g/ml 的医用臭氧肌肉注射后会产生程度相当的肌细胞损害，度为 10 g/ml 的医用臭氧及纯氧对肌肉组织没有明显损害作用。【关键词】医用臭氧；骨骼肌；病理学3周后纤维组织损伤修复，浓中文全文：臭氧 (ozone ，O3)治疗具有其独特的优越性，在临床上的应用不断推广，臭氧疗法已成为慢性疼痛微创治疗的新方法。臭氧治疗椎间盘突出症的效果显著，在欧洲得到了广泛

8、的应用，在国内近年来也逐渐开展该项目 1 ；此外，臭氧对肌肉、肌腱及关节软组织慢性疼痛的治疗也有明显的效果 2,3 。但臭氧局部注射后对组织影响如何尚未明了。本实验用不同浓度医用臭氧对大鼠骨骼肌及跟腱注射后，观察臭氧对大鼠骨骼肌及肌腱病理学的影响，评估臭氧肌肉及腱鞘内注射的氧化程度和影响范围，为临床安全应用臭氧治疗提供相关的依据。材料与方法动物分组： 30 只 wistar 大鼠随机分为 5组 (n=6) ， 医用臭氧组：臭氧 10、臭氧 30、臭氧 50、臭氧 80 组分别注射浓度为 10 g/ml 、30g/ml 、 50 g/ml 、80g/ml 的医用臭氧，对照组仅行穿刺不注射。不同浓

9、度医用臭氧的获取：用橡胶管将瓶装医用纯氧与臭氧发生器的氧气入口相连；接通电源，打开开关，调校好氧气输出量及臭氧浓度，以获取所需臭氧浓度。用注射器按压臭氧发生器取气口即可获得臭氧，在取气时须利用气体压力将注射器活塞向上推以获取臭氧，避免主动抽取混入空气。给药：以3%戊巴比妥钠30mg/kg麻醉大鼠，大鼠俯卧位，右臀部备皮，碘酒、酒精消毒，臭氧10、臭氧30、臭氧 50、臭氧 80 组分别在右侧臀大肌处各注射浓度为10 g/ml 、30g/ml 、 50 g/ml 、80g/ml的医用臭氧 1ml ，对照组仅行穿刺不注射。取材：常规碘酒、酒精消毒大鼠臀部皮肤后，在右臀部作一长约1.5cm 的斜行切

10、口，一次切开皮肤及皮下组织，暴露右侧臀大肌，在注射处取大小约0.5cm3 的肌肉组织，以10%的甲醛溶液固定。光学显微镜下检查：制成切片，行HE染色，在光学显微镜下分别观察不同时间点、不同浓度臭氧注射后肌肉组织的病理学变化。结果与对照比较， 臭氧 30组、臭氧 50组及臭氧 80组大鼠注射臭氧后10min，大体标本肉眼观见注射部位肌肉稍肿胀、苍白；光镜下见肌细胞肿胀，间隙变窄或不清。30min 后肌细胞边界不清，横纹紊乱，部分肌细胞坏死，空泡变性，并有部分肌细胞间隙和血管壁炎细胞浸润。 3周后切片显示肌细胞明显萎缩，大量纤维组织增生，部分伴有玻璃样变。臭氧 10组与对照组比较无明显差异（见图

11、13）。图1.5组大鼠骨骼肌注射臭氧10min 后注射部位活检病理改变(HE×100)：臭氧 10组，肌细胞轻度肿胀，细胞膜光滑完整，细胞未见明显变性坏死，肌间隔有少量红细胞，无炎症细胞浸润；：臭氧 30组，肌细胞轻度肿胀，部分细胞边界不清，少量细胞变性，肌间隔有少量红细胞，未见明显炎症细胞浸润；：臭氧50组，肌细胞轻度肿胀，细胞边界不清，部分变性，肌间隙有少量红细胞；：臭氧80组，肌细胞肿胀，细胞边界模糊不清，肌细胞间有较多红细胞；：对照组组，肌细胞无明显肿胀，细胞膜光滑完整，肌间隔有少量红细胞，无炎症细胞浸润。图2.5组大鼠骨骼肌注射臭氧30min 后注射部位活检病理改变(HE&

12、#215;100)：臭氧 10组，肌细胞轻度肿胀，细胞膜光滑完整，细胞未见明显变性坏死，肌间隔有少量红细胞及炎症细胞浸润；、：臭氧30、50、80组，肌细胞肿胀，肌细胞边界不清，横纹紊乱，部分肌细胞坏死溶解，空泡变性，肌间隔、血管壁炎症细胞浸润；：对照组，肌细胞无明显肿胀，细胞膜光滑完整，肌间隔有少量红细胞，无炎症细胞浸润。图3两组大鼠骨骼肌注射臭氧2周后注射点、旁开1 cm 活检部位病理改变 (HE×200)：臭氧 10组，肌细胞轻度萎缩，细胞膜光滑完整，细胞未见明显变性坏死，肌间隔无明显纤维组织增生；、：臭氧30、50、80组，肌细胞萎缩，较多纤维组织增生，部分伴有玻璃样变；：对

13、照组，肌细胞无明显肿胀，细胞膜光滑完整，无纤维组织增生。讨论臭氧 (O3) 是氧气的同素异形体，由氧分子携带一个氧原子组成，相对分子质量48，性质不稳定，极易分解，在携带的氧原子除氧化后，组合为氧气(O2) 进入稳定状态。臭氧具有不稳定性和很强的氧化能力，常温常态下半衰期约为2030 min1，所以在临床应用时应即造即用，以免其化学性状发生改变。Bocci等2 的研究发现，臭氧浓度为1g/ml 80g/ml 时，对血液中红细胞无明显破坏作用，当臭氧浓度超过这个范围时，则可发生组织损伤。这是因为体内具有多种抗氧化酶和谷胱甘肽等物质，可以抵消或部分抵抗臭氧的氧化损伤作用，当臭氧的剂量超出体内抗氧化

14、系统的抗氧化能力时，则可造成组织器官的损伤作用。所以国内外采用臭氧治疗时浓度均在80g/ml 以下，通常为 30 g/ml50 g/ml 。本实验选用的臭氧浓度分别为10 g/ml 、30g/ml 、 50 g/m 和80g/ml ，以观察各种浓度的医用臭氧对大鼠骨骼肌和跟腱的影响。臭氧是已知可利用的最强氧化剂之一，其氧化能力仅次于氟，它能与极性有机化合物反应，导致不饱和有机分子破裂，而臭氧分子结合在有机分子的双键上，生成过氧化物。臭氧在进入机体时，即可与细胞膜脂质发生反应，生成脂质过氧化产物，后者参与一系列的生物调节活动，是臭氧发挥治疗作用的因素之一；臭氧也可与细胞壁脂类双键反应，穿入细胞内

15、部，作用于脂蛋白和脂多糖，改变细胞的通透性，从而导致细胞溶解和死亡。本研究结果显示浓度为50 g/m 和 80 g/ml 的臭氧肌肉注射后肌肉整个病理改变过程与上述臭氧导致细胞溶解、坏死的机制非常吻合。文献报道，臭氧能严重损害髓核内结构及终板，而对神经根、脊髓和腰大肌损伤影响较小；病理学检查结果显示损伤边缘出现新鲜的血细胞，大部分伴随有淋巴细胞炎性组织增生。亦有报道直接将臭氧注入腰大肌内治疗腰肌劳损，至今没有造成明显的损害。本实验发现臭氧肌肉注射后 2 h 病理切片发现有炎症细胞浸润，与报道相似。臭氧的治疗具有双面性，臭氧的氧化程度与臭氧的浓度呈正比，浓度过低疗效欠佳，浓度过高则对周围组织产生

16、强刺激，甚至导致组织器官的损伤3 。本研究结果显示，浓度为 30、50、80g/ml 的臭氧均可对正常肌细胞造成轻度损伤，而10 g/ml 的臭氧及对照组均没有见到类似的损伤表现。考虑到样本含量和抽样误差，并不能得出细胞损伤程度与注射的臭氧浓度没有关联的结论。本研究结果，提示在临床应用中， 10 g/ml 的臭氧浓度对肌肉组织无明显损伤，而30 g/ml 80g/ml 可对肌肉造成轻度损伤，3周后纤维组织修复损伤。结论本研究初步提示浓度范围为10 g/ml的臭氧对肌肉组织无明显损伤， 30g/ml 80 g/ml 的臭氧可对肌肉造成轻度损伤，该损伤 3周后纤维组织修复损伤。以上浓度的臭氧肌肉注射基本安全。参考文献1. Bocci V. Autohaemotherapy after treatment of blood with ozone: a