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1、精选植物生理学实验报告实验题目：过氧化物酶活性的测定姓名 班级 学号精选一、实验原理和目的原理： 过氧化物酶广泛分布于植物的各个组织器官中。 在有过氧化氢存在下， 过氧化物酶 能使愈创木酚氧化生成醌类化合物， 此化合物进一步缩合或与其它分子缩合， 生成茶褐色物 质，该化合物在 470nm 处有最大的吸收值，可用分光度计测量生成物的含量 。目的：学习测定植物组织中过氧化物酶活性的方法。二、实验器具和步骤材料：女贞树叶器具：分光光度计、离心机、秒表、天平、研钵、磁力搅拌器试剂： 0.1mo1/L 过氧化氢； ， 0.1mo1/L 磷酸缓冲液 pH7.0；0.3%愈创木酚反应液： 100 mmo1L

2、 磷酸缓冲液（ pH 70）100 ml 于烧杯中，加入愈创木酚 0.3ml ，于磁力搅拌器上加热搅拌，直至愈创木酚溶解。步骤：1.称取植物材料约 0.2g,加入，0.1mo1/L磷酸缓冲液（pH7.0） 6ml（分次加入2ml,2ml,2ml, 最后用于洗研钵），在研钵中研磨成匀浆，过滤或以8000r/min离心15min，上清液为酶的提取液。2.1ml0.3%愈创木酚反应液，加0.8ml磷酸缓冲液7.0,加2ml0.1mo1/L过氧化氢，最后加酶液 200ul （视酶活性大小而定，如酶浓度高可稀释后再测定），摇匀，立即在分光光度计 470nm下测吸光度，从加入酶液时立即开启秒表记录时间，1

3、min读数一次（也可 2min,视材料而定）。3.以每分钟吸光度变化 0.01 为一个酶活力单位。 过氧化物酶活性 （U）= A470 X稀释倍数 三、实验数据和作业精选过氧化物酶活性(U)= A470 X稀释倍数 /g.Fw.min.0.01=(0.133-0.124)*20/ (0.2*2*0.01) =45四、数据分析 A 470的值太小可能是由于叶片放置过久导致过氧化物酶活性丧失。五、思考题1)过氧化物酶在植物体内的主要作用是什么？答：它与光合作用、呼吸作用 及生长素的氧化等都有关系。在植物生长发育过程中它的活性不断发生变化。一般老化组织中活性较高，幼嫩组织中活性较弱。 这是因为过氧化物酶 能使组织中所含的某些碳水化合物转化成木质素，增加木质化程度，而且发现早衰减产的水稻根系中过氧化物酶 的活性增加，所以过氧化物酶可作为组织老化的一种生理指标。(2)比色时为什么要在3min内完成答：因为这个反应

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