急淋(血液检验)课件

1、-2急淋(血液检验)第二节第二节 急性急性(jxng)淋巴细胞白血病的应用淋巴细胞白血病的应用第一页，共五十二页。-2急淋(血液检验)第二节第二节 急性急性(jxng)淋巴细胞白血病的应用淋巴细胞白血病的应用熟悉急性淋巴细胞白血病的临床特点熟悉急性淋巴细胞白血病的临床特点(tdin)、并发症。、并发症。 掌握急性淋巴细胞白血病的实验室检查及诊断。掌握急性淋巴细胞白血病的实验室检查及诊断。掌握三型急性淋巴细胞白血病（掌握三型急性淋巴细胞白血病（L1、L2、L3）形态学）形态学鉴别要点。鉴别要点。了解急性淋巴细胞白血病的治疗。了解急性淋巴细胞白血病的治疗。第二页，共五十二页。-2急淋(血液检验)一

2、、概述一、概述(i sh)acute lymphocytic leukemia， ALL简称急淋，是一种起源简称急淋，是一种起源B或或T系淋巴细胞系淋巴细胞的常见的常见(chn jin)白血病白血病发病率约发病率约0.67/ 10万万其骨髓中原、幼淋巴细胞异常增生其骨髓中原、幼淋巴细胞异常增生第三页，共五十二页。-2急淋(血液检验)二、临床表现特点二、临床表现特点(tdin)多发于多发于儿童及青少年儿童及青少年常有全身常有全身淋巴结肿大淋巴结肿大、肝及脾肿大、肝及脾肿大骨、关节痛明显骨、关节痛明显易发生易发生脑膜白血病脑膜白血病，可发生在疾病的任何阶，可发生在疾病的任何阶段段儿童、青少年的急淋

3、儿童、青少年的急淋缓解缓解(hun ji)率明显高于成率明显高于成人人易发生睾丸白血病和高尿酸血症易发生睾丸白血病和高尿酸血症第四页，共五十二页。-2急淋(血液检验)三、检查三、检查(jinch)ALL血象血象ALL骨髓象骨髓象ALL细胞细胞(xbo)化学染色化学染色ALL免疫分型免疫分型ALL细胞遗传学和分子生物学检查细胞遗传学和分子生物学检查第五页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL 血血 象象细胞计数细胞计数(j sh)白细胞白细胞 常常，50109/L；少数；少数红细胞红细胞 常常血小板血小板 常常第六页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL 血血 象象血涂片血涂片以原、幼淋增加

4、为主，常以原、幼淋增加为主，常70中性成熟粒细胞明显减少。中性成熟粒细胞明显减少。涂抹涂抹(tm)细胞易见细胞易见有时可见幼红、幼粒，血小板少见有时可见幼红、幼粒，血小板少见第七页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL血片（放大血片（放大(fngd)100倍）倍）第八页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL骨髓骨髓( su)象象增生程度增生程度有核细胞增生有核细胞增生极度极度(jd)活跃活跃淋系：极度增生淋系：极度增生以原、幼淋增生为主，以原、幼淋增生为主，常为常为50-90棒状小体未见，棒状小体未见，成熟淋巴细胞少成熟淋巴细胞少涂抹细胞易见涂抹细胞易见淋系细胞分裂象染色体淋系细胞分裂象染

5、色体较粗短较粗短第九页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL骨髓骨髓( su)象象粒系粒系增生明显增生明显(mngxin)抑制或缺如抑制或缺如红系红系增生明显抑制或缺如增生明显抑制或缺如巨系巨系增生明显抑制或缺如，血小板少见增生明显抑制或缺如，血小板少见第十页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL骨髓骨髓( su)片（放大片（放大100倍）倍）第十一页，共五十二页。-2急淋(血液检验) 胞体较胞体较小小，10-18m10-18m 浆量浆量少少、蓝色至深蓝色、蓝色至深蓝色 染色质染色质较细致较细致(xzh)(xzh)或较粗或较粗原淋巴细胞形态原淋巴细胞形态(xngti)特点特点第十二页，共五

6、十二页。-2急淋(血液检验)ALL骨髓骨髓( su)片片第十三页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL骨髓骨髓( su)片中涂抹细胞易片中涂抹细胞易见见涂抹细胞第十四页，共五十二页。-2急淋(血液检验)形态学分型（形态学分型（FAB分型）分型）细胞学特征细胞学特征ALLALL1 1ALLALL2 2ALLALL3 3 细胞大小小小细胞为主大小较一致大大细胞为主大小不一大大细胞为主大小较一致核染色质较粗较粗结构较一致较疏松结构不一致均匀细点状结构一致核形规则,偶有凹陷、折叠不规则不规则, ,常见凹陷、折叠较规则核仁小而不清小而不清少或不见清楚，1或多个明显，1或多个小泡状胞质量少不一定，常较多

7、常较多较多较多胞质嗜碱性轻或中度不一定,有些较深蓝深蓝色深蓝色胞质空泡不定不定常明显，呈蜂呈蜂窝状窝状第十五页，共五十二页。-2急淋(血液检验)急淋急淋L1，L2，L3亚型亚型形态学分型（形态学分型（FAB分型）分型） 细胞大小细胞大小 核核 核染色质核染色质 核形核形 核仁核仁 胞质胞质 胞质量胞质量(zhling) 胞质嗜碱性胞质嗜碱性 胞质空泡胞质空泡第十六页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL1骨髓骨髓( su)片片第十七页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL2骨髓骨髓( su)片片第十八页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL3骨髓骨髓( su)片片第十九页，共五十二页。-

8、2急淋(血液检验)第二十页，共五十二页。-2急淋(血液检验)标准标准 记分记分高核浆比（高核浆比（N/CN/C）的细胞）的细胞 0.75 +0.75 +低核浆比（低核浆比（N/CN/C）的细胞）的细胞 0.25 -0.25 -核仁核仁(h rn)(h rn)0-10-1（小）的细胞（小）的细胞 0.75 +0.75 +核仁核仁11（明显）的细胞（明显）的细胞 0.25 -0.25 -核形不规则的细胞核形不规则的细胞 0.25 -0.25 -大细胞大细胞 0.50 -0.50 -鉴别鉴别(jinbi)L1、L2积分系统的标准积分系统的标准第二十一页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL细胞化学

9、细胞化学(huxu)染色染色POX染色染色(rns)阴性阴性（阳性率（阳性率3%）PAS染色染色常常阳性阳性，阳性率，阳性率20-80 呈呈粗颗粒状、块状阳性粗颗粒状、块状阳性第二十二页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL细胞化学细胞化学(huxu)染色染色氯乙酸氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色萘酚酯酶染色(NAS-DCE) 均均阴性阴性(ynxng)醋酸醋酸AS-D萘酚酯酶染色萘酚酯酶染色(NAS-DAE) 阴性或弱阳性，阴性或弱阳性， 阳性者加阳性者加NaF不抑制不抑制第二十三页，共五十二页。-2急淋(血液检验)氯乙酸氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色萘酚酯酶染色(rns)(NAS-DCE) 氯乙酸

10、氯乙酸ASD萘酚酯酶（萘酚酯酶（naphythol AS-D chloroacetate esterase,NAS-DCE）水解基质液中的氯乙酸）水解基质液中的氯乙酸ASD萘酚，产萘酚，产生生ASD萘酚，进而与基质液中的重氮盐偶联形成不溶性的有萘酚，进而与基质液中的重氮盐偶联形成不溶性的有色沉淀，定位于色沉淀，定位于(wiy)细胞质内酶所存在的部位。本试验常用的细胞质内酶所存在的部位。本试验常用的重氮盐为坚牢紫酱重氮盐为坚牢紫酱GBC，形成的有色沉淀为红色。，形成的有色沉淀为红色。NASDCE几乎仅出现在粒细胞，其特异性高，因此又称为几乎仅出现在粒细胞，其特异性高，因此又称为“粒细粒细胞酯酶胞

11、酯酶”、“特异性酯酶特异性酯酶”。 第二十四页，共五十二页。-2急淋(血液检验)醋酸醋酸(c sun)AS-D萘酚酯酶染色萘酚酯酶染色 (naphythol AS-D acetate esterase,NAS-DAE) NASDAE染色属于中性染色属于中性(zhngxng)非特异性酯酶染色，在鉴别白血非特异性酯酶染色，在鉴别白血病类型时需同时做病类型时需同时做NaF抑制试验。急性粒细胞白血病的原粒细胞抑制试验。急性粒细胞白血病的原粒细胞NASDAE染色可呈阳性反应，且不被氟化钠抑制；急性早幼粒细胞白染色可呈阳性反应，且不被氟化钠抑制；急性早幼粒细胞白血病的白血病性早幼粒细胞血病的白血病性早幼粒

12、细胞NASDAE染色为阳性或强阳性反应，染色为阳性或强阳性反应，亦不被氟化钠所抑制；急性单核细胞白血病的原、幼单核细胞亦不被氟化钠所抑制；急性单核细胞白血病的原、幼单核细胞NASDAE染色多呈阳性或强阳性反应，但能被氟化钠抑制；急性粒染色多呈阳性或强阳性反应，但能被氟化钠抑制；急性粒单核细胞白血病的阳性反应的单核细胞系白血病细胞能被氟化钠抑制，单核细胞白血病的阳性反应的单核细胞系白血病细胞能被氟化钠抑制，而粒系白血病细胞则不被抑制；急性淋巴细胞白血病的原、幼淋巴细而粒系白血病细胞则不被抑制；急性淋巴细胞白血病的原、幼淋巴细胞呈阴性或弱阳性反应，且不被氟化钠抑制。胞呈阴性或弱阳性反应，且不被氟化

13、钠抑制。 第二十五页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL POX染色染色(rns)粒细胞强阳性第二十六页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL PAS染色染色(rns)原幼淋巴细胞呈粗颗粒状块状阳性(yngxng)PAS染色(rns)第二十七页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL NSE染色染色(rns)原有淋巴细胞呈弱阳性NAS-DAE染色(rns)加NaF后仍呈弱阳性NAS-DAE+NaF染色(rns)第二十八页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL NAS-DCE染色染色(rns)NAS-DCE染色(rns)粒细胞强阳性(yngxng)第二十九页，共五十二页。-2急淋(血液检

14、验)淋巴细胞免疫学标志淋巴细胞免疫学标志(biozh)系列一线单抗二线单抗T淋巴系 CD2、CyCD3、CD7CD1、CD4、CD5、CD8B淋巴系CD10、CD19、CyCD22、CyD79aCD20、CD24、Cy、SmIg第三十页，共五十二页。-2急淋(血液检验)B淋巴细胞成熟过程淋巴细胞成熟过程(guchng)中抗原的表达中抗原的表达第三十一页，共五十二页。-2急淋(血液检验)T淋巴细胞成熟淋巴细胞成熟(chngsh)过程中抗原的表达过程中抗原的表达第三十二页，共五十二页。-2急淋(血液检验)CyCD3CyCD3 （胞质（胞质 CD3 ）只表达于不成熟）只表达于不成熟 T 细胞的胞质中

15、，它只是细胞的胞质中，它只是 CD3 的前体蛋的前体蛋白白 链，是诊断链，是诊断 T-AIL 最敏感而又特最敏感而又特异的指标。异的指标。 CyCD3 只能只能(zh nn)用识别用识别 CD3 抗原抗原 链的单克隆抗体才能检测到。链的单克隆抗体才能检测到。 第三十三页，共五十二页。-2急淋(血液检验)CD7CD7 抗原为抗原为 T-ALL 细胞的共同表面标志细胞的共同表面标志(biozh)，是诊断，是诊断 T-ALL 的一个敏感指标，的一个敏感指标，但有时与急性粒细胞白血病（但有时与急性粒细胞白血病（ ANLL ）有交叉反应。有交叉反应。 第三十四页，共五十二页。-2急淋(血液检验)CD19

16、不成熟不成熟(chngsh) B 细胞的标志，如细胞的标志，如 CD19 、 CD20 等等 第三十五页，共五十二页。-2急淋(血液检验)CyCD22CyCD22现认为是现认为是B-ALL最敏感的标志最敏感的标志在在AML均未见均未见CyCD22表达近来发现表达近来发现(fxin)CD20是是B-ALL较可靠的表达之一较可靠的表达之一 第三十六页，共五十二页。-2急淋(血液检验)T系系-ALL细胞细胞(xbo)免疫分型免疫分型类型CyCD3CD7TdTHLA-DRCD2CD1CD4CD8FAB分型preT-ALL型+-/+-L1,L2T-ALL型+-/+-+-/+-/+-/+L1,L2第三十七

17、页，共五十二页。-2急淋(血液检验)B系系-ALL细胞细胞(xbo)免疫分型免疫分型 类 型HLA-DRCD79aCD19CD22CD20CD10CyIgMSmIgFAB分型前前B细胞型 + +-/+ - - - - - L1,L2普通型 + + +-/+-/+ + - -L1,L2前B细胞型 + + + + + + + - L1B细胞型 + + + + +-/+-/+ + L3第三十八页，共五十二页。-2急淋(血液检验)B淋巴细胞白血病流式结果淋巴细胞白血病流式结果(ji gu)CD19+、CD10+ 、 CD20+第三十九页，共五十二页。-2急淋(血液检验)B淋巴细胞白血病流式结果淋巴细胞

18、白血病流式结果(ji gu)CD19+、CD10+ 、 CD20+第四十页，共五十二页。-2急淋(血液检验)B淋巴细胞白血病流式结果淋巴细胞白血病流式结果(ji gu)CD19+、CD10+ 、 CD20+第四十一页，共五十二页。-2急淋(血液检验)B淋巴细胞白血病流式结果淋巴细胞白血病流式结果(ji gu)CD19+、CD10+ 、 CD20+第四十二页，共五十二页。-2急淋(血液检验)细胞细胞(xbo)遗传学和分子生物学遗传学和分子生物学检查检查大约大约7070-90-90的患者有克隆性染色体异常的患者有克隆性染色体异常染色体数目染色体数目(shm)(shm)异常和染色体结构异常异常和染色

19、体结构异常非特异性包括非特异性包括6q-6q-、t/delt/del（9p9p）、）、t/delt/del（12p12p）特异性包括特异性包括t t（1 1；1919）、）、 E2A-PBX1E2A-PBX1 t t（4 4；1111）、）、 MLL-AF4MLL-AF4 t t（9 9；2222）、）、 ABL-BCRABL-BCR t t（8 8；1414）、）、 MYC-IgHMYC-IgH详细特点见详细特点见表表4 410107 7第四十三页，共五十二页。-2急淋(血液检验)急淋的费城急淋的费城(fi chn)染色体染色体第四十四页，共五十二页。-2急淋(血液检验) ALL诊断诊断(z

20、hndun)标准标准 具有急性白血病的临床表现及骨髓象特征具有急性白血病的临床表现及骨髓象特征 骨髓中原淋巴细胞幼淋巴细胞骨髓中原淋巴细胞幼淋巴细胞3030、伴有形、伴有形 态学异常态学异常 TdTTdT及单克隆抗体诊断及单克隆抗体诊断T T或或B B细胞系急淋（与细胞系急淋（与AMLAML相相 鉴别），进一步分亚型鉴别），进一步分亚型 与免疫学亚型相关的特异性结构重排及其分子生与免疫学亚型相关的特异性结构重排及其分子生 物学异常，对诊断、判断物学异常，对诊断、判断(pndun)(pndun)预后和微量残留病的检预后和微量残留病的检 测有重要意义测有重要意义第四十五页，共五十二页。-2急淋(血

21、液检验)急性急性(jxng)白血病的诊断白血病的诊断(1) 具有急性白血病的临床表现具有急性白血病的临床表现(2) 骨髓中原加幼淋骨髓中原加幼淋30%伴有形态异常伴有形态异常(3) TdT及单克隆抗体及单克隆抗体(kngt)鉴别鉴别T,B ALL及及AML遗传学及分子生物学检验加以诊断及鉴别遗传学及分子生物学检验加以诊断及鉴别诊断诊断第四十六页，共五十二页。-2急淋(血液检验)末端脱氧核苷酸转移酶末端脱氧核苷酸转移酶 terminal deoxynucleotidyl transferase;TdT 一种参与免疫球蛋白基因重排的酶。基因重一种参与免疫球蛋白基因重排的酶。基因重排时，其无须模板即

22、可将核苷酸随机排时，其无须模板即可将核苷酸随机(su j)插入插入到基因片段间。到基因片段间。 第四十七页，共五十二页。-2急淋(血液检验)中枢神经中枢神经(zhngshshnjng)系统白血病诊断系统白血病诊断标准标准（1）有中枢神经系统症状和体征）有中枢神经系统症状和体征（2）有脑积液的改变）有脑积液的改变 压力增高，压力增高，1.96kpa 白细胞数白细胞数0.01109/L 涂片见到白血病细胞涂片见到白血病细胞 蛋白蛋白450mg/l,潘氏试验阳性潘氏试验阳性（3）排除其他原因）排除其他原因(yunyn)的中枢神经系统或脑脊的中枢神经系统或脑脊液有相似改变的疾病液有相似改变的疾病第四十八页，共五十二页。-2急淋(血液检验)ALL诊断