氢化可的松注射液的鉴别及含量测定

1、实训十三实训十三 氢化可的松注射液的氢化可的松注射液的鉴别及含量测定鉴别及含量测定一、实训要求一、实训要求1 1掌握氢化可的松注射液的鉴别原理、方法。掌握氢化可的松注射液的鉴别原理、方法。2 2掌握掌握UVUV法测定药物含量的原理、方法及结果法测定药物含量的原理、方法及结果计算，能规范操作紫外计算，能规范操作紫外- -可见分光光度计。可见分光光度计。3 3学会注射剂的含量计算和结果判定。学会注射剂的含量计算和结果判定。二、实训器材二、实训器材1 1试药：氢化可的松注射液、硫酸苯肼试液、试药：氢化可的松注射液、硫酸苯肼试液、硫酸、无水乙醇。硫酸、无水乙醇。2 2仪器：电子分析天平、水浴锅、烧杯、

2、移仪器：电子分析天平、水浴锅、烧杯、移液管、容量瓶、紫外液管、容量瓶、紫外- -可见分光光度计。可见分光光度计。三、实训内容及操作三、实训内容及操作 （一）鉴别（一）鉴别 取氢化可的松注射液约取氢化可的松注射液约1ml 1ml ，置水浴上蒸，置水浴上蒸干，残渣作如下试验：干，残渣作如下试验： 1 1取本品约取本品约0.1mg0.1mg，加乙醇，加乙醇1ml 1ml 溶解后，溶解后，加临用新制的硫酸苯肼试液加临用新制的硫酸苯肼试液8ml 8ml ，在，在7070加热加热1515分钟，即显黄色。分钟，即显黄色。 2 2取氢化可的松注射液约取氢化可的松注射液约2mg 2mg ，加硫酸，加硫酸2ml

3、2ml 使溶解，放置使溶解，放置5 5 分钟，显棕黄色至红分钟，显棕黄色至红色，并显绿色荧光；将此溶液倾入色，并显绿色荧光；将此溶液倾入10ml10ml水水中，即变成黄色至橙黄色，并微带绿色荧中，即变成黄色至橙黄色，并微带绿色荧光，同时生成少量絮状沉淀。光，同时生成少量絮状沉淀。（二）含量测定（二）含量测定 精密量取氢化可的松注射液精密量取氢化可的松注射液5ml 5ml ，置，置100ml 100ml 量瓶中，量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取加无水乙醇稀释至刻度，摇匀；精密量取5ml5ml，置，置另一另一100ml 100ml 量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，量瓶中，用无水乙醇

4、稀释至刻度，摇匀，照紫外照紫外- -可见分光光度法，在可见分光光度法，在242nm 242nm 的波长处测定的波长处测定吸光度，按吸光度，按C C2121H H3 3O O5 5的吸收系数（的吸收系数（ ）为）为435 435 计算，计算，即得。即得。 注：本品含氢化可的松注：本品含氢化可的松(C(C2121H H3 3O O5 5) )应为标示量的应为标示量的93.093.0107.0107.0。%11cmEWFZ UV2000WFZ UV2000型型紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计操作规程操作规程开开 机机 1. 1. 打开电源开关，预热打开电源开关，预热30min30min后使

5、用后使用2. 2. 用用MODEMODE键设置测试方式：透射比（键设置测试方式：透射比（T T），吸光），吸光度（度（A A），已知标准样品浓度值方式（），已知标准样品浓度值方式（C C）和已知）和已知标准样品斜率方式（标准样品斜率方式（F F）3. 3. 转动波长旋钮，观察波长显示窗，调节至需要的转动波长旋钮，观察波长显示窗，调节至需要的测量波长。测量波长。4.4.将参比样品溶液和被测样品溶液分别倒入将参比样品溶液和被测样品溶液分别倒入比色皿中，打开样品室盖，将盛有溶液的比色皿中，打开样品室盖，将盛有溶液的比色皿分别插入比色皿槽中，盖上样品室比色皿分别插入比色皿槽中，盖上样品室盖。一般情况下

6、，参比样品放在第一个槽盖。一般情况下，参比样品放在第一个槽位中。比色皿透光部分表面不能有指印、位中。比色皿透光部分表面不能有指印、溶液痕迹，被测溶液中不能有气泡、悬浮溶液痕迹，被测溶液中不能有气泡、悬浮物，否则也将影响样品测试的精度。物，否则也将影响样品测试的精度。5.5.在透视比（在透视比（T T）模式，将遮光体放入样品架，合上）模式，将遮光体放入样品架，合上样品室盖，拉动样品架拉杆使其进入光路。按下样品室盖，拉动样品架拉杆使其进入光路。按下调节调节0%0%键，屏幕显示键，屏幕显示000.0000.0或或-000.0-000.0时，调节时，调节T T零零完成。如果显示不到完成。如果显示不到1

7、00.0%(T)100.0%(T)，可适当增加灵敏，可适当增加灵敏度的档数。然后将被测溶液置于光路中，数字显度的档数。然后将被测溶液置于光路中，数字显示值即为被测溶液的透光率。示值即为被测溶液的透光率。 6.6.调节调节100%T/A100%T/A 先用空白溶液洗涤比色皿先用空白溶液洗涤比色皿2-32-3次，将空白溶液倒次，将空白溶液倒入比色皿，溶液量约为比色皿高度的入比色皿，溶液量约为比色皿高度的3/43/4，用擦镜，用擦镜纸将透面擦拭干净，按一定方向，将比色皿放入纸将透面擦拭干净，按一定方向，将比色皿放入样品架。合上样品室盖，拉动样品架拉杆使其进样品架。合上样品室盖，拉动样品架拉杆使其进入

8、光路。入光路。 按下调按下调100.0%100.0%键，屏幕显示键，屏幕显示“BLABLA”延时数秒出现延时数秒出现“100.0100.0”（T T模式）或模式）或 “000.0000.0”、“-000.0-000.0”。（A A模式）调节模式）调节100%T/A100%T/A完成完成测测 量量 用待测溶液洗涤比色皿用待测溶液洗涤比色皿2-32-3次，将待测溶液次，将待测溶液倒入比色皿，溶液量约为比色皿高度的倒入比色皿，溶液量约为比色皿高度的3/43/4，用擦镜纸将透面擦拭干净，按一定方向，用擦镜纸将透面擦拭干净，按一定方向，将比色皿放入样品架。合上样品室盖，拉将比色皿放入样品架。合上样品室盖，拉动样品架拉杆使其进入光路。读取测量数动样品架拉杆使其进入光路。读取测量数据。据。测量完毕测量完毕 1. 1. 测量完毕，清理样品室，将比色皿清洗干测量完毕，清理样品室，将比色皿清洗干净，倒置晾干后收起。净，倒置晾干后收起。2.2.关闭电源，盖好防尘罩，结束实验。关闭电源，盖好防尘罩，结束实验。注意事项注意事项 1. 1. 测定波长在测定波长在360nm360nm以上时，可用玻璃比色皿；波以上时，可用玻璃比色皿；波长在长在360nm360nm以下时，要用石英比色皿。比色皿外部以下时，要用石英比色皿。比色皿外部要用吸水纸吸干，不能用手触摸光面的表面。要用吸水纸吸干，不能用