再障和低危的鉴别

1、浙大一院血液科浙大一院血液科金洁金洁再障和低危再障和低危MDS的鉴别的鉴别第一页，共66页。病 例 患者，女，38岁 主诉：主诉：发现贫血八年余，加重半月 病史：病史：患者八年余前产检发现贫血，无不适，予输血对症治疗（具体不详），后复查血常规指标较前升高（未见报告），患者未予重视。三年前患者劳累后出现头晕乏力，偶有头痛，余无不适。至浙一就诊，血常规：WBC2.7*109/L，N1.4*109/L，HB 85g/L，PLT125*109/L，Ret2.0。骨髓涂片：有核细胞量少，粒红系增生活跃，巨核细胞数量中等, 产板功能佳。VitB12、叶酸、血清铁、自身抗体无殊。 Coombs试验阴性。CD

2、55、CD59检测未见异常， 予升血宁及铁剂等对症治疗，自觉上述症状好转。第二页，共66页。半月前上述症状加重，劳累时出现头痛，有耳鸣，听力下降，至当地查血常规 WBC1.78*109/L,N1.6*109/L,HB69g/L, PLT 123*10E9/L”，予中药治疗自觉无好转，遂至我院门诊，2015-8-17拟“贫血”收住。 第三页，共66页。血常规：WBC 2.2，N 1.2，L 0.8，HB 45，MCV 110.3，MCH 38.5，PLT98，Ret 3.2%。叶酸 8.42，血清维生素B12 532pg/ml，铁蛋白585.6ng/ml.CD55,CD59表达正常。抗核抗体等检

3、查阴性。第四页，共66页。骨髓小粒少骨髓小粒少, ,有核细胞量显著减少，易见多量脂肪滴。有核细胞量显著减少，易见多量脂肪滴。 粒系增生活跃，以中幼粒以下阶段增生为主。各阶段比例，形态无殊。粒系增生活跃，以中幼粒以下阶段增生为主。各阶段比例，形态无殊。 红系增生活跃红系增生活跃，以中晚幼红细胞增生为主。幼红细胞可偶见核出芽。成熟红细胞轻度大小，以中晚幼红细胞增生为主。幼红细胞可偶见核出芽。成熟红细胞轻度大小不一。不一。 成熟淋巴细胞比例明显增高占成熟淋巴细胞比例明显增高占35%35%，形态无殊。，形态无殊。 巨核细胞数量减少巨核细胞数量减少，全片共见巨核，全片共见巨核2 2个，皆为颗巨个，皆为颗

4、巨. . 骨髓小粒呈空架状骨髓小粒呈空架状，以非造血细胞增生为主，外铁，以非造血细胞增生为主，外铁( (无小粒无小粒) ) 内铁：幼红细胞少内铁：幼红细胞少 5第五页，共66页。骨髓流式检查：骨髓流式检查：未见明显异常原始以及幼稚细胞。骨髓活检：骨髓活检：骨髓造血组织增生十分低下，可见少量粒红造血血细胞以中晚幼为主，巨核细胞偶见，并见多小簇幼稚细胞增生，网状纤维轻度增生。染色体：染色体：46，XY20基因突变：基因突变：DNMT3A(+), IDH1/2(-), SFSB1(-), U2AF1(-), SRSF2(-)第六页，共66页。诊断：诊断：u 再生障碍性贫血？u低增生性骨髓增生异常综合

5、征？第七页，共66页。AA诊断思路除外其他引起全血细胞减少的疾病多部位骨髓检查，明确诊断再生障碍性贫血，是一组骨髓造血组织减少，造血功能衰竭，导致周围血全血细胞减少的综合病征。良第八页，共66页。MDS诊断思路排除反应性病态造血和其他血细胞减少证明病态造血和血细胞减少是MDS克隆所致骨髓增生异常综合征是起源于造血干细胞的一组异质性髓系克隆性疾病恶第九页，共66页。Overlap in bone marrow failure syndromes第十页，共66页。haematologica | 2009; 94(2)鉴别诊断应做的检查多部位骨穿，包括胸骨穿刺第十一页，共66页。骨髓细胞学骨髓活检形

6、态学染色体核型分析FISH细胞遗传学结合临床80%MDS患者可以诊断20%？第十二页，共66页。AA 与hMDS鉴别诊断 1. 形态 2.克隆证据 3.克隆演变第十三页，共66页。difference in morphologic diagnosesDiscordance, defined as a difference in morphologic diagnoses between the referring center and MDACC, was documented in 109 of the 915 (12%) patients.第十四页，共66页。Morphological d

7、ifferentiation of severe aplastic anaemia from hypocellular refractory cytopenia of childhoodHistopathology (2012) 61, 1017RCC, Refractory cytopenia of childhood; SAA, severe aplastic anaemia第十五页，共66页。形态易鉴别原始比例（5%）有病态，病态比例高，有特殊病态类型(RARS)合并较明显骨髓纤维化-MDS合并MPN第十六页，共66页。红系粒系巨核系细胞核核出芽，核间桥核碎裂，多核（奇数）核分叶减少，核

8、分叶呈花瓣状、核不规则、子母核巨幼样变胞质环状铁粒幼细胞空泡PAS染色阳性胞体小或异常增大核分叶减少（假Pelger-Hut；pelgeriod）不规则核分叶增多环状核胞质颗粒减少或无颗粒假Chediak-Higashi颗粒Auer小体小巨核细胞核分叶减少多核（正常巨核细胞为单核分叶）单圆核多圆核微巨核胞质巨大血小板气球样血小板红系巨幼变诊断MDS意义最小，微巨核细胞为最可靠的发育异常标志。各系发育异常表现各系发育异常表现各系特征性形态改变各系特征性形态改变第十七页，共66页。MDS形态学改变( 病态发育）最常见的骨髓细胞发育异常征象最常见的骨髓细胞发育异常征象多核35%巨幼变56%细胞核改变

9、40%假性佩尔格尔细胞49%颗粒形成减少45%单圆核巨核细胞47%核碎裂32%小巨核细胞29%第十八页，共66页。单纯病态发育如何鉴别？ 部分AA可有轻度红系病态（巨幼样变） 单一轻度红系病态慎重诊断为MDS 粒系和巨核系病态对MDS重要意义 病态发育并非MDS特有第十九页，共66页。骨髓活检的鉴别价值 不成熟前体细胞异常定位、原始细胞簇hMDS 脂肪组织增生AA 网硬蛋白超过（+），排除AAJ Clin Pathol 1985;38:1218-24.第二十页，共66页。AA 与hMDS鉴别诊断 1. 形态 2.克隆证据 3.克隆演变第二十一页，共66页。中国专家共识 寻找MDS克隆性造血证据

10、的手段常规染色体核型分析、FISH、流式细胞术检测、基因芯片、基因点突变分析第二十二页，共66页。ChromosomalabnormalitiesconsideredpresumptiveevidenceofdiseaseMDS克隆证据染色体核型分析第二十三页，共66页。第二十四页，共66页。Am J Hematol. 2013 October ; 88(10): 831837Acquisition of Cytogenetic Abnormalities (ACA) in Patients with IPSSdefined Lower-Risk Myelodysplastic Syndrom

11、e Acquisitionofcytogeneticabnormalitieswasdetectedin107patients(29%).Cytopenicpatients(5%bonemarrowblast)willcarrylesschromosomalabnormality(21%).Cytopenicpatientsonlywithdysplasiawillrarelycarrychromosomalabnormality(?).第二十五页，共66页。RCC（ refractory cytopenia of childhood ）骨髓细胞数和核型异常Interim analysis o

12、f studies EWOG-MDS 1998 and 2006.Hematology Am Soc Hematol Educ Program. 2011;2011:84-9.第二十六页，共66页。+8、20q-、-y不能作为MDS唯一的推定证据第二十七页，共66页。NEnglJMed.2011Jun30;364(26)Blood2013;112(22)111 genes - 738 patients in Europe104 genes - 944 patients in Japan & GermanLeukemia.2014Feb;28(2)18 genes - 439 patie

13、nts in USAMDS克隆证据基因突变第二十八页，共66页。MDS基因突变频率Papaemmanuil,etal.Blood.2013Nov21;122(22):3616-27Hafelachetal.Leukemia.2013.(e-pubaheadofprint)第二十九页，共66页。MDS mutation landscapeMayoClinProc.July2015;90(7):969-983第三十页，共66页。 当缺乏特定形态诊断标准时，基因突变是否基因突变是否可以替代染色体异常染色体异常作为MDS证据？第三十一页，共66页。MDS基因突变的频率？ Frequency-exclu

14、sionNoJAK2mutation-PVisessentiallyexcluded.ThereisnosinglegenethatismutatedinthemajorityofcasesofMDS.第三十二页，共66页。MDS mutation landscapeMayoClinProc.July2015;90(7):969-983第三十三页，共66页。MDS基因突变的特异性？ Specificity - presumptive evidence第三十四页，共66页。第三十五页，共66页。Metaphase karyotyping & SNP-A karyotypingBLOOD,

15、23JUNE2011VOLUME117,NUMBER25AA的克隆证据第三十六页，共66页。第三十七页，共66页。辨别真克隆与假克隆？HematologyAmSocHematolEducProgram.2011;2011:90-5第三十八页，共66页。基因突变的意义？ Highly frequent gene mutation: not specific less frequent gene mutation: may be specific Somatic mutation: BRAF- HCL STAT3/5BT/NK FLT-ITD, IDH1/2, NPM1 AMLgermline m

16、utations: RUNX1, CEBPA, GATA2, ETV6, DDX41, TERT, DKC1-IBMF, secondary MDS 第三十九页，共66页。AA 与hMDS鉴别诊断 1. 形态 2.克隆证据 3.克隆演变第四十页，共66页。非肿瘤患者外周血DNA的全外显子测序authorNO.compositiongeneGenovese et al12,3806135 (psychiatric disorders),6245(healthy Controls)unselected for cancer or hematologic phenotypesJaiswal et a

17、l17,18222 population-based cohorts in three consortia(genomicrisk factors for cardiovascular morbidity and mortality) 160 genes ( known associated with myeloid and lymphoid cancersNEnglJMed.2014Dec25;371(26):2488-98NEnglJMed.2014Dec25;371(26):2477-87第四十一页，共66页。CHIP, Clonal Hematopoiesis of Indetermi

18、nate PoteniallAbsence of definitive morphological evidence of a hematological neoplasml Does not meet diagnostic criteria for PNH,MGUS, or MBLl Presence of a somatic mutation associated with hematological neoplasia at a variant allele freqency of at least 2%(eg. DNMT3A, TET2, ASXL1, JAK2, SF3B1, TP5

19、3, CBL, GNB1, BCOR, U2AF1, CREBBP, CUX1, SRSF2, MLL2, SETD2, SETDB1, GNAS, PPM1D, BCORL1)l Odds of progression to overt neoplasia are approximately 0.5-1% per year, similar to MGUS第四十二页，共66页。CHIP和年龄相关110NEnglJMed.2014Dec25;371(26):2488-98NEnglJMed.2014Dec25;371(26):2477-87第四十三页，共66页。CHIP是髓系肿瘤的前驱状态第四

20、十四页，共66页。从克隆造血到MDS的演变NEnglJMed.2014Dec25;371(26):2477-87第四十五页，共66页。克隆发展模型Nat Med. 2014 December ; 20(12): 14721478. 第四十六页，共66页。第四十七页，共66页。MDS疾病谱CHIPNon-clonal ICUSCHIPCCUSMDS-Ulower risk MDSHigherriskMDScytopenia+-+dysplasia-+ (10%)+(10%)+clonality-+BM blast%5%5%5%5%5%19%Overall riskVery lowVerylowL

21、ow (?)Low(?)lowhighAdaptedfromClonal cytopeniaMDS by WHO 2008Traditional ICUS第四十八页，共66页。AA演变为MDS既往观点 MDACC 128MDACC 128名名AAAA患者随访患者随访1010年发现，年发现，9.3%9.3%的的AAAA患者转化成患者转化成MDSMDS。 原因原因1.低增生性MDS 初诊AA，6月内确诊的MDS2.克隆转化 初诊AA，6月后确诊的MDS（1）免疫抑制剂使用(经39月随访，AA免疫抑制剂治疗患者发生克隆性疾病几率是移植患者15倍）（2）AA向MDS的内在转化（单独接受雄激素治疗患者与

22、接受免疫抑制剂患者发生克隆性疾病几率相似） 可能机制可能机制 AA患者端粒缩短起重要作用遗传不稳定Cancer.2007Oct1;110(7):1520-6.JAMA. 2010 September 22; 304(12): 13581364.第四十九页，共66页。Behavior of SNP-A characterized lesions through the clinical courseBLOOD,23JUNE2011VOLUME117,NUMBER25AA的细胞遗传学演变如今第五十页，共66页。一名再障患者的克隆演变一名再障患者的克隆演变NENGLJMED373;1July2,2015第五十一页，共66页。 AA患者中伴发PNH的演变(115)(19)(2)(2)HematologyAmSocHematolEducProgram.2011;2011:90-5第五十二页，共66页。167 名重型再障患儿治疗及MDS/AML 转化Blood, Vol 90, No 3 (August 1), 1997: pp 1009-1013第五十三页，共66页。可能机制：免疫选择压力下的克隆转化HematologyAmSocHematolEducProgram.2011;2011:90-5第五十四页，共66页。AA和hMDS的