天然药物化学

1、第七章第七章 糖类糖类糖的理化性质糖的理化性质2糖的结构测定糖的结构测定4糖的分类糖的分类3 1糖的提取分离3 3糖的提取分离三、糖的提取分离三、糖的提取分离1溶于冷水和温乙溶于冷水和温乙醇醇用醇温浸，用醇温浸，铅盐沉淀，除去铅盐沉淀，除去其他物质后结晶其他物质后结晶溶于温水，难溶溶于温水，难溶于冷水，不溶于于冷水，不溶于乙醇乙醇温水浸，温水浸，铅盐沉淀蛋白质铅盐沉淀蛋白质后脱铅，乙醇沉后脱铅，乙醇沉淀淀溶于冷水不溶于溶于冷水不溶于乙醇乙醇水提，水提，铅盐沉淀，脱铅铅盐沉淀，脱铅后乙醇沉淀后乙醇沉淀难溶于水，可溶难溶于水，可溶于稀碱于稀碱用稀用稀NaOH提取，加提取，加醇沉淀析出醇沉淀析出1.

2、 糖的提取糖的提取234三、糖的提取分离三、糖的提取分离Sevag 法法酶解法酶解法三氟三氯乙烷法三氟三氯乙烷法三氯三氯醋酸法醋酸法脱除蛋白脱除蛋白质的方法质的方法三、糖的提取分离三、糖的提取分离化学沉淀法化学沉淀法离子交换法离子交换法铅盐和铅盐和活性炭法活性炭法杂质的去除杂质的去除主要有主要有3种种2. 糖的分离糖的分离三、糖的提取分离三、糖的提取分离糖的糖的分离分离方法方法钙、锶及钡钙、锶及钡复盐形式法复盐形式法铅盐沉淀法铅盐沉淀法分级沉淀或分级沉淀或 分级溶解法分级溶解法活性炭柱色谱活性炭柱色谱纤维素柱色谱纤维素柱色谱淀粉柱色谱淀粉柱色谱离子交换法离子交换法季铵盐沉淀法季铵盐沉淀法 凝胶

3、柱色谱凝胶柱色谱制备型区域电泳制备型区域电泳第七章第七章 糖类糖类糖的理化性质糖的理化性质2糖的结构测定4糖的分类糖的分类3 1糖的提取分离糖的提取分离3 3糖的结构测定糖的结构测定四、糖的结构测定四、糖的结构测定 多糖的结构测定与常见天然产物有许多不同之多糖的结构测定与常见天然产物有许多不同之处，本节不做详细介绍。天然产物中的苷类成分多处，本节不做详细介绍。天然产物中的苷类成分多为固体化合物。其结构鉴定应通过以下各项程序进为固体化合物。其结构鉴定应通过以下各项程序进行：行： 四、糖的结构测定四、糖的结构测定12345纯度的测定纯度的测定分子量的测定分子量的测定单糖种类的鉴定单糖种类的鉴定连接

4、位置的鉴定连接位置的鉴定苷键构型的鉴定苷键构型的鉴定基基本本步步骤骤四、糖的结构测定四、糖的结构测定( (一一) ) 纯度的测定纯度的测定 超离心法，高压电泳法，凝胶柱色谱法，旋超离心法，高压电泳法，凝胶柱色谱法，旋光测定法光测定法四、糖的结构测定四、糖的结构测定( (二二) ) 分子量的测定分子量的测定 近年来广泛应用质谱分析的方法测定分子量和近年来广泛应用质谱分析的方法测定分子量和分子式。苷类化合物一般极性较大，无挥发性，遇分子式。苷类化合物一般极性较大，无挥发性，遇热气化时易于分解，采用电子轰击质谱热气化时易于分解，采用电子轰击质谱( (EI- -MS) )常常常不能获得分子离子峰。常不

5、能获得分子离子峰。 四、糖的结构测定四、糖的结构测定 现多采用化学电离质谱现多采用化学电离质谱( (CI- -MS) )、场解吸质、场解吸质谱谱( (FD- -MS) )、快原子轰击质谱、快原子轰击质谱( (FAB- -MS) )和电喷和电喷雾质谱雾质谱( (ESI- -MS) )等方法来获得分子离子蜂，尤其等方法来获得分子离子蜂，尤其是是ESI- -MS及及FAB- -MS两种质谱法更是目前测定苷两种质谱法更是目前测定苷类分子量常用的方法。类分子量常用的方法。四、糖的结构测定四、糖的结构测定( (三三) ) 单糖的鉴定单糖的鉴定1. 多糖的完全水解多糖的完全水解 常用稀酸水解，注意掌握适合的

6、条件使多聚糖常用稀酸水解，注意掌握适合的条件使多聚糖完全水解，又不使水解下来的单糖变化或重新聚合。完全水解，又不使水解下来的单糖变化或重新聚合。四、糖的结构测定四、糖的结构测定2. 糖的纸色谱（糖的纸色谱（ PC ） 糖类的糖类的PC常用的展开剂大多为含水的溶剂系统，常用的展开剂大多为含水的溶剂系统，其中以正丁醇其中以正丁醇- -醋酸醋酸- -水和用水饱和的苯酚两种系统水和用水饱和的苯酚两种系统应用得最普遍，如正丁醇应用得最普遍，如正丁醇- -醋酸醋酸- -水水( (4:1:5) )，乙酸乙乙酸乙酯酯- -吡啶吡啶- -水水( (2:1:2) )等。等。四、糖的结构测定四、糖的结构测定 糖类的

7、糖类的Rf 值与溶剂的含水量有关，因此配制值与溶剂的含水量有关，因此配制展开剂时必须注意，尤其对于三元组成的展开剂，展开剂时必须注意，尤其对于三元组成的展开剂，其混合比例更应力求准确，并需用标准品同时点其混合比例更应力求准确，并需用标准品同时点样作为对照。样作为对照。四、糖的结构测定四、糖的结构测定展开剂展开剂薄层色谱薄层色谱显色剂显色剂吸附剂吸附剂3. 糖的薄层色谱糖的薄层色谱四、糖的结构测定四、糖的结构测定 糖类的糖类的TLC常选用硅胶薄层，由于糖的极性强，常选用硅胶薄层，由于糖的极性强，一般点样量不能大于一般点样量不能大于5 ug，但这一缺点在用硼酸溶，但这一缺点在用硼酸溶液或一些无机盐

8、的水溶液代替水调制吸附剂进行铺液或一些无机盐的水溶液代替水调制吸附剂进行铺板时得到克服，显著提高了上样量，并改善分离效板时得到克服，显著提高了上样量，并改善分离效果。果。吸附剂吸附剂四、糖的结构测定四、糖的结构测定 制备这种硅胶薄层板时，所用的盐一般是强制备这种硅胶薄层板时，所用的盐一般是强碱弱酸碱弱酸( (或中强酸或中强酸) )盐，如盐，如0.3mol/L的磷酸氢二钠的磷酸氢二钠或磷酸二氢钠的水溶液。或磷酸二氢钠的水溶液。 四、糖的结构测定四、糖的结构测定 糖类硅胶薄层色谱常用的展开剂为正丁醇糖类硅胶薄层色谱常用的展开剂为正丁醇- -丙丙酮酮- -水、正丁醇水、正丁醇- -醋酸醋酸- -水或

9、正丁醇水或正丁醇- -吡啶吡啶- -水。水。展开剂展开剂四、糖的结构测定四、糖的结构测定 糖的糖的PC或或TLC所用的显色剂有些是相同的，所用的显色剂有些是相同的，其显色原理主要是利用糖的还原性或由于形成糖醛其显色原理主要是利用糖的还原性或由于形成糖醛后引起的呈色反应。有些显色剂不仅可以决定糖的后引起的呈色反应。有些显色剂不仅可以决定糖的斑点的位置，尚可区分其类型。斑点的位置，尚可区分其类型。显色剂显色剂四、糖的结构测定四、糖的结构测定 常用的显色剂有苯胺常用的显色剂有苯胺- -邻苯二甲酸试剂、三苯邻苯二甲酸试剂、三苯四氮盐试剂四氮盐试剂( (TTC试剂试剂) )、间苯二酚、间苯二酚- -盐酸

10、试剂、双盐酸试剂、双甲酮甲酮- -磷酸试剂等。磷酸试剂等。四、糖的结构测定四、糖的结构测定苯胺苯胺- -邻苯邻苯二甲酸二甲酸显色剂对不同的糖往往显不同的颜色显色剂对不同的糖往往显不同的颜色已醛糖已醛糖糖醛酸糖醛酸戊醛糖戊醛糖棕色棕色棕色棕色红色红色四、糖的结构测定四、糖的结构测定 有些显色剂中含有硫酸，因此只能用于有些显色剂中含有硫酸，因此只能用于TLC。例如茴香醛例如茴香醛- -硫酸试剂、间苯二酚硫酸试剂、间苯二酚- -硫酸试剂、硫酸试剂、- -萘萘酚酚- -硫酸试剂、百里酚硫酸试剂、百里酚- -硫酸试剂、酚硫酸试剂、酚- -硫酸试剂等，硫酸试剂等，喷后一般要在喷后一般要在100左右加热数分

11、钟至斑点显现。左右加热数分钟至斑点显现。 以以CMC-Na为粘合剂的硅胶薄层板，在使用含为粘合剂的硅胶薄层板，在使用含浓硫酸的显色剂时亦应注意加热的温度与时间。浓硫酸的显色剂时亦应注意加热的温度与时间。显色剂显色剂四、糖的结构测定四、糖的结构测定制备成三甲基硅醚等增加挥发性制备成三甲基硅醚等增加挥发性 难于挥发难于挥发用用NaBH4等还原成多元醇，制成乙酰等还原成多元醇，制成乙酰化物或三氟乙酰化物化物或三氟乙酰化物 形成端基异构体形成端基异构体4. 糖的气相色谱及气质联用色谱糖的气相色谱及气质联用色谱两个不利因素两个不利因素四、糖的结构测定四、糖的结构测定5. 糖的离子交换色谱糖的离子交换色谱

12、 应用糖的硼酸络合物进行离子交换应用糖的硼酸络合物进行离子交换四、糖的结构测定四、糖的结构测定( (四四) ) 多糖的部分酸水解多糖的部分酸水解 把大分子裂解成较小的片段，部分酸水解产物把大分子裂解成较小的片段，部分酸水解产物的基本结构具有代表性。的基本结构具有代表性。四、糖的结构测定四、糖的结构测定1,3连接连接1,4连接连接生成脱生成脱氧糖酸氧糖酸生成生成3- -脱脱氧氧- -2- -羟甲羟甲基糖酸基糖酸( (五五) )多糖的碱水解多糖的碱水解速度为速度为后者后者的的10倍倍四、糖的结构测定四、糖的结构测定多糖全甲基化多糖全甲基化90%甲酸全水解甲酸全水解H2SO4或三氟乙酸水解或三氟乙酸水解乙酰化新羟基乙酰化新羟基气相色谱分析气相色谱分析步骤步骤(六六) 多糖的甲基化多糖的甲基化四、糖的结构测定四、糖的结构测定( (七七) )多糖的多糖的Smith降解降解 每开裂一个每开裂一个C- -C消耗一分子过碘酸消耗一分子过碘酸。测定过。测定过碘酸消耗量，甲酸生成量和剩余糖的比例可推测碘酸消耗量，甲酸生成量和剩余糖的比例可推测多糖的结构。多糖的结构。四、糖的结构测定四、糖的结构测定Smith降解降解OOHOROHOHCH2OHIO4-OCH2OHOHCOHCORKBH4OCH2OHHOH2CH