湿热灭菌讲稿

1、63条：任何灭菌工艺在投入使用前，都必须通过物条：任何灭菌工艺在投入使用前，都必须通过物理检测手段验证其对产品的适用性及灭菌效果，即理检测手段验证其对产品的适用性及灭菌效果，即每种被灭菌产品和物品的所有部位都达到了设定的每种被灭菌产品和物品的所有部位都达到了设定的灭菌要求，必要时还应进行生物指示剂试验，作为灭菌要求，必要时还应进行生物指示剂试验，作为灭菌监控的补充手段。灭菌监控的补充手段。64条：应对灭菌工艺的有效性定期进行再验证（每条：应对灭菌工艺的有效性定期进行再验证（每年至少一次）。设备有重大变更后，应进行再验证年至少一次）。设备有重大变更后，应进行再验证。应保存再验证的结果和记录。应保

2、存再验证的结果和记录。65条：所有的待灭菌物品均须按规定的要求处理，条：所有的待灭菌物品均须按规定的要求处理，以获得良好的灭菌效果，灭菌工艺的设计应确保灭以获得良好的灭菌效果，灭菌工艺的设计应确保灭菌完全。菌完全。66条：应通过验证确认灭菌设备腔室内待灭菌产品条：应通过验证确认灭菌设备腔室内待灭菌产品和物品的装载方式。和物品的装载方式。67条：应按供应商的要求保存和使用生物指示剂，条：应按供应商的要求保存和使用生物指示剂，并通过阳性对照来确认其质量。使用生物指示剂时并通过阳性对照来确认其质量。使用生物指示剂时，应采取严格措施，防止由其所致的微生物污染。，应采取严格措施，防止由其所致的微生物污染

3、。68条：应有明确区分已灭菌产品和待灭菌产品的方条：应有明确区分已灭菌产品和待灭菌产品的方法。每一车（盘或其它装载设备）产品或物料均应法。每一车（盘或其它装载设备）产品或物料均应贴签，清晰地注明品名、批号并标明是否已经灭菌贴签，清晰地注明品名、批号并标明是否已经灭菌。必要时，可用湿热灭菌指示带加以区分。必要时，可用湿热灭菌指示带加以区分。69条：每一个灭菌批次都应有灭菌记录。应把灭菌条：每一个灭菌批次都应有灭菌记录。应把灭菌记录作为该批产品放行的依据。记录作为该批产品放行的依据。 第一条第一条 无菌药品是指法定药品标准中列有无菌检查项目无菌药品是指法定药品标准中列有无菌检查项目的制剂和原料药，

4、包括非经肠道制剂、无菌的软膏剂、眼的制剂和原料药，包括非经肠道制剂、无菌的软膏剂、眼膏剂、混悬剂、乳剂及滴眼剂等。膏剂、混悬剂、乳剂及滴眼剂等。 第二章第二章 原则原则 第四条第四条 无菌药品的生产必须满足其质量和预定用途的无菌药品的生产必须满足其质量和预定用途的要求，最大限度降低微生物、各种微粒和热原的污染。生要求，最大限度降低微生物、各种微粒和热原的污染。生产人员的技能、所接受的培训及其工作态度是达到上述目产人员的技能、所接受的培训及其工作态度是达到上述目标的关键因素，无菌药品的生产必须严格按照精心设计并标的关键因素，无菌药品的生产必须严格按照精心设计并经验证的方法及规程进行，产品的无菌或

5、其他质量特性绝经验证的方法及规程进行，产品的无菌或其他质量特性绝不能只依赖于任何形式的最终处理或成品检验。不能只依赖于任何形式的最终处理或成品检验。 第五条第五条 无菌药品按生产工艺可分为两类：采用最终灭无菌药品按生产工艺可分为两类：采用最终灭菌工艺的为最终灭菌产品；部分或全部工序采用无菌生产菌工艺的为最终灭菌产品；部分或全部工序采用无菌生产工艺的为非最终灭菌产品。工艺的为非最终灭菌产品。 第十二章第十二章 最终灭菌最终灭菌 热力灭菌热力灭菌 热力灭菌通常有湿热灭菌和干热灭菌。热力灭菌通常有湿热灭菌和干热灭菌。 第七十三条第七十三条 在验证和生产过程中，用于监测或记在验证和生产过程中，用于监测

6、或记录的温度探头与用于控制的温度探头应分别设置录的温度探头与用于控制的温度探头应分别设置，设置的位置应通过验证确定，每次灭菌均应记，设置的位置应通过验证确定，每次灭菌均应记录灭菌过程的时间录灭菌过程的时间/温度曲线。温度曲线。 如采用自控和监测系统，该系统应经过验证，以如采用自控和监测系统，该系统应经过验证，以确保符合关键工艺的要求。该系统应能记录系统确保符合关键工艺的要求。该系统应能记录系统本身以及工艺运行过程中出现的故障，操作人员本身以及工艺运行过程中出现的故障，操作人员应监控这类故障的发生。应定期将独立的温度显应监控这类故障的发生。应定期将独立的温度显示器的读数与灭菌过程中记录获得的图谱

7、对照示器的读数与灭菌过程中记录获得的图谱对照 第七十四条第七十四条 可使用化学或生物指示剂监控灭菌工艺，但可使用化学或生物指示剂监控灭菌工艺，但他们不得替代物理测试。他们不得替代物理测试。 第七十五条第七十五条 灭菌时间应从能保证所有被灭菌品都达到设灭菌时间应从能保证所有被灭菌品都达到设定的灭菌温度后才开始计算。每种装载方式所需升温时间定的灭菌温度后才开始计算。每种装载方式所需升温时间均须测定并记录。均须测定并记录。 第七十六条第七十六条 应有措施防止灭菌冷却过程中已灭菌物品遭应有措施防止灭菌冷却过程中已灭菌物品遭受污染，任何与产品相接触的冷却用介质（液体或气体）受污染，任何与产品相接触的冷却

8、用介质（液体或气体）应经过灭菌或除菌处理，除非能证明生产过程中可剔除任应经过灭菌或除菌处理，除非能证明生产过程中可剔除任何渗漏的产品。何渗漏的产品。 湿热灭菌 第七十七条第七十七条 湿热灭菌工艺监控的参数应包括灭菌温度、湿热灭菌工艺监控的参数应包括灭菌温度、时间和压力。时间和压力。 对腔室底部装有排水口的灭菌柜而言，可能需要测定并记对腔室底部装有排水口的灭菌柜而言，可能需要测定并记录该点在灭菌全过程中的温度数据。如灭菌工艺中包括抽录该点在灭菌全过程中的温度数据。如灭菌工艺中包括抽真空操作，则应经常对腔室作检漏测试。真空操作，则应经常对腔室作检漏测试。 第七十八条第七十八条 被灭菌物品如不密封容

9、器中的产品，则应用被灭菌物品如不密封容器中的产品，则应用合适的材料将其适当包扎，所用材料及包扎方式应有利于合适的材料将其适当包扎，所用材料及包扎方式应有利于空气排放，蒸汽穿透并在灭菌后能防止污染。在规定的温空气排放，蒸汽穿透并在灭菌后能防止污染。在规定的温度和时间内，被灭菌物品所有部位均应与灭菌介质充分接度和时间内，被灭菌物品所有部位均应与灭菌介质充分接触。触。 湿热灭菌湿热灭菌 参数应包括灭菌时间、温度或压力参数应包括灭菌时间、温度或压力 应经常对腔室作检漏测试应经常对腔室作检漏测试 被灭菌物品应用合适的材料适当包扎被灭菌物品应用合适的材料适当包扎 直接接触产品的包装容器、灌装设备、胶塞及可

10、能与直接接触产品的包装容器、灌装设备、胶塞及可能与产品接触的工器具等的湿热灭菌应采用纯蒸汽产品接触的工器具等的湿热灭菌应采用纯蒸汽 ISO 11135ISO 17665PDA No.1 技术文件技术文件Validation of Moist Heat Sterilization Processes: Cycle Design, Development Qualification and Ongoing Control Technical Report No. 1 (2007 Revision)British Standard BS EN 285:2008 Sterilization-Steam

11、 sterilizers-Large sterilizersEN 554FDA CGMP（2004）EU CGMP（2008）灭菌技术和验证指南日本灭菌技术和验证指南日本其它其它 获得有效合理的灭菌参数获得有效合理的灭菌参数 证明湿热灭菌设备对被灭菌品的适用性证明湿热灭菌设备对被灭菌品的适用性 不同灭菌程序的可靠性和重现性不同灭菌程序的可靠性和重现性 蒸汽热穿透性强蒸汽热穿透性强 灭菌效率高灭菌效率高温度相对较低温度相对较低灭菌时间相对短灭菌时间相对短 灭菌过程不产生任何化学物理污染灭菌过程不产生任何化学物理污染 灭菌设备控制参数少，运行稳定，方便管理药物制剂生产过灭菌设备控制参数少，运行稳定

12、，方便管理药物制剂生产过程中最常用的方法程中最常用的方法湿热灭菌介质：湿热灭菌介质： 饱和蒸汽饱和蒸汽:是指饱和状态下的蒸汽，是由气体分子之间的热运动现象是指饱和状态下的蒸汽，是由气体分子之间的热运动现象造成的造成的 过热水过热水:指水达沸点（指水达沸点（100）却没有沸腾的水）却没有沸腾的水,如果加入其他物质会如果加入其他物质会突然暴沸突然暴沸D值值(Decimal reduction time)：就是在一定的处理环境中和在一：就是在一定的处理环境中和在一定的热力致死温度条件下某细菌数群中每杀死定的热力致死温度条件下某细菌数群中每杀死90%原有残存活菌原有残存活菌数时所需要的时间。数时所需要

13、的时间。Z值是指灭菌时间减少到原来的值是指灭菌时间减少到原来的1/10所需升高的温度或在相同灭所需升高的温度或在相同灭菌时间内，杀灭菌时间内，杀灭99%的微生物所需提高的温度。的微生物所需提高的温度。 F值（值（F0值）在一定温度下杀灭一定浓度微生物所需加热的时间值）在一定温度下杀灭一定浓度微生物所需加热的时间（min）。通常指在）。通常指在120加热致死状态。是加热杀菌的致死值加热致死状态。是加热杀菌的致死值，可用来衡量杀菌强度。，可用来衡量杀菌强度。 蒸汽的质量蒸汽的质量 干燥值（干燥值（Dryness value ） 不冷凝气体（不冷凝气体（Noncondesable Gases ） 饱

14、和蒸汽饱和蒸汽（Saturated Steam ） 过度杀灭程序过度杀灭程序（Overkill Approach） 预真空程序预真空程序（Prevacuum Process） 蒸汽空气混合气体蒸汽空气混合气体（Steam- Air Mixture）灭菌）灭菌 过热水程序过热水程序（Superheated Water Process） 无菌保证水平无菌保证水平（Sterility Assurance Level, SAL） 是是 热热 不不 稳稳定定 产产 品品 吗吗?是否采 用 特 殊 方 法采 用 过 度 杀 灭 法被 灭 菌 品的 形 式 ?多 孔 / 固 体 物 品密 封 液 体 产 品

15、需 考 虑 抽真 空 ?需 加 压 吗 ?现 有 抽 真空 灭 菌 器 ?重 力 置 换 程 序脉 动 真 空 程 序无有要可 用 过 热水 程 序 ?过 热 水 或 S A M任 何 湿 热 程 序可不可不要要S A M 程 序 过度杀灭法。过度杀灭法。 假设：假设： N0106 D1211分钟分钟 Z10 将数据代入公式，得将数据代入公式，得L=1，再按计算，达到微生物，再按计算，达到微生物残存概率为一百万分之一所需的物理及生物杀灭力残存概率为一百万分之一所需的物理及生物杀灭力如下：如下： 物理杀灭力物理杀灭力FPHY为为12分钟，分钟， 生物杀灭力生物杀灭力 FBIO D121（LogN

16、0Log NF）12分钟分钟 残存概率法残存概率法 假设产品的生物负荷测试中：假设产品的生物负荷测试中： N0102 D1211分钟分钟 Z10 经灭菌后，微生物残存概率经灭菌后，微生物残存概率NF小于小于10-6 利用上面的数值，可以计算出微生物残存概率小于利用上面的数值，可以计算出微生物残存概率小于10-6所需的所需的FPHY和和FBIO如下：如下： F0FPHYFBIOD121（LogN0Log NF）8分分钟钟 装载类型的界定装载类型的界定 考虑到装载的特性及特定装载的方式。例如，多孔考虑到装载的特性及特定装载的方式。例如，多孔/固体物品通常包括但不局限于以下物品：固体物品通常包括但不

17、局限于以下物品： 过滤器（薄膜式过滤器、筒式过滤器、预过滤器等）过滤器（薄膜式过滤器、筒式过滤器、预过滤器等） 胶塞和其它聚合物密封件胶塞和其它聚合物密封件 管道和软管管道和软管 工作服、口罩工作服、口罩 清洁用具清洁用具 设备更换部件，如药液灌装设备更换部件，如药液灌装 液体装载通常包括但不局限于以下物品：液体装载通常包括但不局限于以下物品： 已灌装入最终容器（如小瓶、软包装、玻瓶或安瓿）的产已灌装入最终容器（如小瓶、软包装、玻瓶或安瓿）的产品（溶液、混悬剂或乳剂）品（溶液、混悬剂或乳剂） 已检验或加工后剩下的可能含有致病菌的废液。已检验或加工后剩下的可能含有致病菌的废液。微生物的种类和数量

18、:微生物的种类、发育阶段、微生物的数量等。蒸汽性质：蒸汽有饱和蒸汽、湿饱和蒸汽和过热蒸汽。热压灭菌应采用饱和蒸汽。药品性质和灭菌时间:一般而言，灭菌温度愈高，时间愈长，药品被破坏的可能性愈大。因此，在设计灭菌温度和时间时必须考虑药品的稳定性。其他：介质PH等影响湿热灭菌的因素 美国FDA规定的残存概率法 灭菌过程8 F012分钟 适用于热稳定性不很好的产品 通过控制工艺过程的微生物污染和灭菌工艺参数使产品无菌 无菌保证值不小于6 过度杀灭法 F0不低于12 热稳定性好的产品 以彻底杀灭任何污染的微生物为实现无菌的手段 无菌保证值不小于6 F0值低于8的灭菌工艺 热稳定性很差的产品 以无菌生产工

19、艺为基础，灭菌是提高无菌保证水平的辅助手段 不计算F0值，污染概率不大于0.1% 除血液制品外，发达国家这类大容量注射剂几乎没有 小容量注射剂也少见 液体注射剂产品的灭菌液体注射剂产品的灭菌 空气蒸汽混合物（空气蒸汽混合物（SAM） 过热水喷淋法过热水喷淋法 重力置换法（不推荐）重力置换法（不推荐）下排式蒸汽灭菌柜下排式蒸汽灭菌柜（重力置换法）（重力置换法）下排式灭菌柜压力表温度计空气蒸汽档板排放蒸汽进下排式蒸汽灭菌柜下排式蒸汽灭菌柜工作原理图工作原理图1、蒸汽进入、蒸汽进入2、高温度蒸汽比重、高温度蒸汽比重小，在上部小，在上部3、蒸汽不断进入蒸汽不断进入4、冷凝水及低温度冷凝水及低温度空气在

20、底部被挤走空气在底部被挤走Gravity Displacement Autoclave在相同的温度和压力，空气是事实上比蒸汽密度的平均值的在相同的温度和压力，空气是事实上比蒸汽密度的平均值的1.5倍。倍。热交换器由不锈钢制造、卫生级、双功能（加热及冷却），有效，安全。湍流、速热交换器由不锈钢制造、卫生级、双功能（加热及冷却），有效，安全。湍流、速度、液体循环交换（蒸汽和冷却水）自动实现热交换器内部的清洁。度、液体循环交换（蒸汽和冷却水）自动实现热交换器内部的清洁。控控制制柜柜卫生离心泵：保持水的高速循环，这对实现温度的均一性至关重要。卫生离心泵：保持水的高速循环，这对实现温度的均一性至关重要。

21、CA除菌除菌过滤器过滤器Temperature/Pressure Chart 温度温度/压力表压力表Hot Water Shower Process 热水淋浴的过程热水淋浴的过程Temperature (C)Pressure (bar)Time (min)02040601208010000.51.01.52.02.5140120100 80 60 40 20 0排气排气Fo热水喷雾消毒器热水喷雾消毒器本图为旋转式喷淋灭菌柜本图为旋转式喷淋灭菌柜水喷淋水喷淋-高效热交换，程序短高效热交换，程序短可用于乳剂、氨基酸等可用于乳剂、氨基酸等配外部双管板热交换器配外部双管板热交换器过程：进过程：进PW蒸

22、汽加热循环蒸汽加热循环水水 在过压保护条件下在过压保护条件下 水水喷淋产品喷淋产品 达到灭菌温度达到灭菌温度-保保温温冷却冷却平衡压力平衡压力-出料出料转速：转速：1-5转转/分分产品温差可控产品温差可控 0.5被灭菌品被灭菌品纯化水纯化水门门密密封封条条喷淋管喷淋管固定架固定架传动传动装置装置用脂肪乳剂等转笼热水喷雾消毒器用脂肪乳剂等转笼热水喷雾消毒器Initialization 程程 序序 开开 始始Filling PW 进进PW到到设定液位设定液位Heating 逐步加热逐步加热加压缩空气加压缩空气Sterilizing 灭菌灭菌压缩空气压缩空气Draining 排放气排放气/水水Saf

23、ety exhaust check 0.1 bar 安全压力检查安全压力检查Safety cooling Check -0.07MPa进蒸汽：进蒸汽： 运行运行3次次121保温至保温至设定的时间设定的时间排气排气抽真空干燥抽真空干燥约约15分钟分钟至设定的至设定的灭菌温度灭菌温度进过滤气体进过滤气体平衡压力平衡压力程序结束程序结束温度温度脉动真空：抽真空脉动真空：抽真空- -进蒸汽进蒸汽- -抽真空抽真空- -进蒸汽进蒸汽 预真空预真空升温升温保温保温干燥干燥降温降温排气排气结束结束123真空真空蒸汽脉动灭菌器蒸汽脉动灭菌器100121 DQ 在选用蒸汽灭菌器时，首先应根据产品的工艺来考虑蒸汽

24、灭在选用蒸汽灭菌器时，首先应根据产品的工艺来考虑蒸汽灭菌器的选型，主要是装量的大小、灭菌温度与时间的可控制菌器的选型，主要是装量的大小、灭菌温度与时间的可控制性、灭菌程序的可选择性、灭菌时腔室内温度的一致性、升性、灭菌程序的可选择性、灭菌时腔室内温度的一致性、升温与降温速率的稳定性、控制及记录系统的可靠性等。温与降温速率的稳定性、控制及记录系统的可靠性等。 首先对所选灭菌器进行确认（首先对所选灭菌器进行确认（IQ/OQ） 例如：例如： 空气过滤器的泄漏测试空气过滤器的泄漏测试 容积、真空度、压力以及泄漏率测试容积、真空度、压力以及泄漏率测试 如有夹层，必须消除运行风险如有夹层，必须消除运行风险 蒸汽质量测试蒸汽质量测试 传感器的测试传感器的测试 验证设备的校准验证设备的校准 其他其他 PQ 空载热分布试验空载热分布试验 满载热分布试验满载热分布试验 热穿透和生物挑战试验热穿透和生物挑战试验 升温、降温速度对生产工艺、产品的影响；升温、降温速度对生产工艺、产品的影响；