第三章灭菌与无菌制剂

1、第三章第三章 灭菌制剂与无菌制剂灭菌制剂与无菌制剂第一节第一节 概述概述第二节第二节 注射剂注射剂第三节第三节 注射剂的制备注射剂的制备第四节第四节 输液输液第五节第五节 注射用无菌粉末注射用无菌粉末第六节第六节 眼用液体制剂眼用液体制剂第七节第七节 其他灭菌与无菌制剂其他灭菌与无菌制剂 一、基本概念一、基本概念 灭菌灭菌( (sterilazationsterilazation) ) 灭菌法灭菌法(the technique of sterilization)(the technique of sterilization) 无菌无菌( (sterilitysterility) ) 无菌操作无

2、菌操作( (aseptic techniqueaseptic technique) ) 防腐防腐( (antisepsisantisepsis) ) 消毒消毒( (disinfectiondisinfection) ) 第一节第一节 概概 述述中国药典中国药典20052005年版年版q制剂通则、品种项下要求无菌的制剂及标示无菌的制剂制剂通则、品种项下要求无菌的制剂及标示无菌的制剂应符合无菌检查法规定应符合无菌检查法规定q口服给药制剂口服给药制剂细菌数：细菌数：10001000个个/g/g、100100个个/ml/ml；霉菌和酵母菌：；霉菌和酵母菌：100100个个/g/g（mlml）；大肠埃希

3、菌：不得检出）；大肠埃希菌：不得检出q局部给药制剂局部给药制剂应符合无菌应符合无菌检查法规定检查法规定细菌数：细菌数：1010个个/ g/ g（mlml）；霉菌数和酵母）；霉菌数和酵母菌数、金葡菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌：不得检出菌数、金葡菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌：不得检出 中国药典中国药典20052005年版年版细菌数：细菌数：100100个个/g/g（mlml、10cm10cm3 3）；霉菌数和酵母菌数：）；霉菌数和酵母菌数： 1010个个/g/g（mlml、10cm10cm3 3）；）；金葡菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌不得检出；金葡菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌不得检出；细菌数：细菌

4、数：100100个个/g/g（mlml）；霉菌数）；霉菌数和酵母菌数：和酵母菌数： 1010个个/g/g（mlml）；金葡菌、铜绿假单胞菌不）；金葡菌、铜绿假单胞菌不得检出；得检出；细菌数：细菌数：100100个个/g/g，100100个个/ml/ml；霉菌数和；霉菌数和酵母菌数：酵母菌数： 100100个个/g/g（mlml）；金葡菌、铜绿假单胞菌、大）；金葡菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌不得检出；肠埃希菌不得检出；细菌数：细菌数：100100个个/g/g（mlml、10cm10cm3 3）；霉）；霉菌数和酵母菌数：菌数和酵母菌数： 100100个个/g /g （mlml、10cm10cm3

5、3） ；金葡菌、铜；金葡菌、铜绿假单胞菌不得检出；绿假单胞菌不得检出； 灭菌制剂灭菌制剂:系指采用某一物理、化学系指采用某一物理、化学方法杀灭或除去所有活的微生物繁方法杀灭或除去所有活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。殖体和芽孢的一类药物制剂。无菌制剂：无菌制剂：系指采用某一无菌操作系指采用某一无菌操作方法或技术制备的不含任何的微生方法或技术制备的不含任何的微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。一、灭菌制剂与无菌制剂一、灭菌制剂与无菌制剂（一）物理灭菌技术（一）物理灭菌技术1 1、干热灭菌法、干热灭菌法 系指在干燥环境中进行系指在干燥环境中进行 灭菌的方法。灭菌的方

6、法。 火焰灭菌法火焰灭菌法 干热空气灭菌法干热空气灭菌法 2 2、湿热灭菌法、湿热灭菌法 系指用饱和蒸气、沸水系指用饱和蒸气、沸水 或流通蒸气进行灭菌的方法或流通蒸气进行灭菌的方法。 二、灭菌与无菌技术二、灭菌与无菌技术 (1)(1)微生物的种类、发育阶段和数量微生物的种类、发育阶段和数量 (2)(2)介质的性质介质的性质 (3)(3)药物的性质药物的性质 (4)(4)蒸气的性质蒸气的性质 湿饱和蒸气湿饱和蒸气 饱和蒸气饱和蒸气 过热蒸气过热蒸气 影响湿热灭菌的因素影响湿热灭菌的因素（1 1）热压灭菌法）热压灭菌法 采用高压饱和水蒸气进行灭菌采用高压饱和水蒸气进行灭菌湿热灭菌中最可靠的方法湿热

7、灭菌中最可靠的方法适用于耐高温和耐高压蒸气的所有药物制剂、玻适用于耐高温和耐高压蒸气的所有药物制剂、玻璃容器、金属容器、瓷器、橡胶塞、滤膜过滤器等璃容器、金属容器、瓷器、橡胶塞、滤膜过滤器等大体积注射剂灭菌时首选大体积注射剂灭菌时首选灭菌条件：灭菌条件：115（67kPa）、）、30min；121 （97kPa）、）、20min；126 （139kPa）、）、15min常用设备：热压灭菌柜常用设备：热压灭菌柜（2 2）流通蒸气灭菌法）流通蒸气灭菌法 q在不密闭的容器内，常压下用在不密闭的容器内，常压下用100 蒸气蒸气加热加热30-60minq不能保证杀死所有的芽胞不能保证杀死所有的芽胞q适用

8、于必须加热灭菌但不耐高温的药物适用于必须加热灭菌但不耐高温的药物q1-2ml及不耐高热的注射剂基本上都采用及不耐高热的注射剂基本上都采用（3 3）煮沸灭菌法）煮沸灭菌法 q将灭菌物放入沸水中煮沸将灭菌物放入沸水中煮沸30-60minq不能保证杀死所有的芽胞不能保证杀死所有的芽胞q常用于注射器、注射针等器皿的消毒常用于注射器、注射针等器皿的消毒q可加入适当抑菌剂，提高灭菌效果可加入适当抑菌剂，提高灭菌效果水的沸点如果达不到水的沸点如果达不到100100度，？度，？（4 4）低温间歇灭菌法）低温间歇灭菌法60-80 1h20-25 24h60-80 60-80 1h1h20-25 24hq适合于不

9、耐高温、热敏感物料和制剂的灭菌适合于不耐高温、热敏感物料和制剂的灭菌q灭菌效果不可靠灭菌效果不可靠q可加入适量抑菌剂提高灭菌效果可加入适量抑菌剂提高灭菌效果 3 3、过滤灭菌法、过滤灭菌法q使药液通过无菌的滤器除去活的或死的微生物使药液通过无菌的滤器除去活的或死的微生物而得到不含微生物的滤液而得到不含微生物的滤液q适合于对热不稳定的药液、气体、水等物品的适合于对热不稳定的药液、气体、水等物品的灭菌灭菌q加压减压过滤均可加压减压过滤均可q室温下易挥发、易氧化的药物宜用加压滤过法室温下易挥发、易氧化的药物宜用加压滤过法q应配合无菌操作技术进行应配合无菌操作技术进行q先进行预过滤，再进行过滤灭菌先进

10、行预过滤，再进行过滤灭菌q滤器孔径必须小于芽胞体积滤器孔径必须小于芽胞体积4 4、射线灭菌法、射线灭菌法（1 1）辐射灭菌法）辐射灭菌法（2 2）微波灭菌法）微波灭菌法（3 3）紫外线灭菌法）紫外线灭菌法（1 1）辐射灭菌法）辐射灭菌法采用放射性同位素（采用放射性同位素（60Co或或137Cs）放射）放射的的射线杀灭微生物和芽胞的方法射线杀灭微生物和芽胞的方法适用于热敏物料和制剂的灭菌适用于热敏物料和制剂的灭菌穿透力强、灭菌力高穿透力强、灭菌力高辐射灭菌剂量一般为辐射灭菌剂量一般为2.5104Gy可用辐射法灭菌的药品和材料可用辐射法灭菌的药品和材料抗生素类（如氨苄青霉素等）抗生素类（如氨苄青霉

11、素等）激素类（如雌二醇等）激素类（如雌二醇等）巴比妥类（如苯巴比妥等）巴比妥类（如苯巴比妥等）菌苗抗毒素（如白喉抗毒素等）菌苗抗毒素（如白喉抗毒素等）其它（如生理盐水、维生素其它（如生理盐水、维生素C注射液等）注射液等）不宜用辐射法灭菌的药品和材料不宜用辐射法灭菌的药品和材料生物碱类（如盐酸吗啡注射液等）生物碱类（如盐酸吗啡注射液等）生物制品（如胰岛素注射液等）生物制品（如胰岛素注射液等）强心苷类（如洋地黄毒苷注射液等）强心苷类（如洋地黄毒苷注射液等）维生素类（如维生素维生素类（如维生素B6注射液等）注射液等）酶类（如玻璃质酸酶等）酶类（如玻璃质酸酶等）其它（如其它（如5%葡萄糖注射液等）葡萄

12、糖注射液等）（2 2）微波灭菌法）微波灭菌法采用微波（采用微波（300MHz-300kMHz）照射产）照射产生的热能杀灭微生物和芽胞的方法生的热能杀灭微生物和芽胞的方法适用于液体和固体物料的灭菌，且对固适用于液体和固体物料的灭菌，且对固体物料有干燥作用体物料有干燥作用穿透力强、灭菌力高穿透力强、灭菌力高（3 3）紫外线灭菌法）紫外线灭菌法采用紫外线照射杀灭微生物和芽胞的方采用紫外线照射杀灭微生物和芽胞的方法法仅用于空气及表面的灭菌仅用于空气及表面的灭菌波长波长200-300nm，最强为，最强为254nm使用紫外线灭菌的注意事项使用紫外线灭菌的注意事项紫外线能促使易氧化的药物或油脂等氧化变紫外线

13、能促使易氧化的药物或油脂等氧化变质，故这类药物不宜用紫外线灭菌质，故这类药物不宜用紫外线灭菌安瓿中药物不能用此法灭菌安瓿中药物不能用此法灭菌一般在操作前开启一般在操作前开启1小时左右，再进行操作小时左右，再进行操作各种紫外线灯都规定了有效使用时限，一般各种紫外线灯都规定了有效使用时限，一般为为3000小时小时（二）化学灭菌法（二）化学灭菌法1 1、气体灭菌法、气体灭菌法2 2、药液灭菌法、药液灭菌法v采用气态杀菌剂（环氧乙烷、甲醛、丙二醇、采用气态杀菌剂（环氧乙烷、甲醛、丙二醇、甘油和过氧乙酸蒸气）进行灭菌的方法，以环甘油和过氧乙酸蒸气）进行灭菌的方法，以环氧乙烷最为常用氧乙烷最为常用v可用于

14、环境消毒以及不耐加热灭菌的医用器可用于环境消毒以及不耐加热灭菌的医用器具等的消毒具等的消毒v用于灭菌的气体应具备用于灭菌的气体应具备：（：（1）在室温时能形）在室温时能形成气体或蒸气；（成气体或蒸气；（2）穿透力强，并容易自被灭）穿透力强，并容易自被灭菌物上移去；（菌物上移去；（3）灭菌作用快，毒性低，在低）灭菌作用快，毒性低，在低浓度时就具有杀菌作用；（浓度时就具有杀菌作用；（4）没有腐蚀性、爆）没有腐蚀性、爆炸性及刺激性；（炸性及刺激性；（5）价廉易得）价廉易得气体灭菌法气体灭菌法v采用杀菌剂溶液进行灭菌的方法采用杀菌剂溶液进行灭菌的方法v可用于皮肤、无菌器具和设备等的消毒可用于皮肤、无菌

15、器具和设备等的消毒v常用的有：常用的有：75%乙醇、乙醇、1%聚维酮碘溶聚维酮碘溶液、液、0.1-0.2%新洁尔灭溶液、新洁尔灭溶液、2%左右的左右的酚或甲酚皂溶液酚或甲酚皂溶液药液灭菌法药液灭菌法1 1、无菌操作室的灭菌、无菌操作室的灭菌（1 1）甲醛溶液加热熏蒸法）甲醛溶液加热熏蒸法（2 2）紫外线灭菌）紫外线灭菌（3 3）液体灭菌）液体灭菌2 2、无菌操作、无菌操作（1 1）无菌操作室）无菌操作室（2 2）层流洁净工作台）层流洁净工作台（3 3）无菌操作柜）无菌操作柜 （三）无菌操作法（三）无菌操作法（四）灭菌参数（四）灭菌参数D值：在一定温度下，将微生物杀灭值：在一定温度下，将微生物杀

16、灭90%或或使之降低一个对数单位所需时间即为使之降低一个对数单位所需时间即为D值。值。描述微生物的耐热性描述微生物的耐热性Z值：降低一个值：降低一个lgD值所需升高的温度，即值所需升高的温度，即灭菌时间减少为原来的灭菌时间减少为原来的1/10所需要升高的温所需要升高的温度数度数定量描述微生物对温度变化的敏感性，定量描述微生物对温度变化的敏感性，Z值值越大，敏感性越弱越大，敏感性越弱F F：在一定温度（：在一定温度（T T）下给定的）下给定的Z Z值所产生的灭菌值所产生的灭菌效果与在参比温度（效果与在参比温度（T T0 0）下给定的）下给定的Z Z值所产生的灭值所产生的灭菌效果相同时所相当的时间

17、菌效果相同时所相当的时间干热灭菌干热灭菌物理物理F F0 0：在一定灭菌温度（在一定灭菌温度（T T）、）、Z Z值为值为1010摄氏度摄氏度所产生的灭菌效果与所产生的灭菌效果与121121摄氏度、摄氏度、Z Z值为值为1010摄氏度摄氏度所产生的灭菌效果相同时所相当的时间所产生的灭菌效果相同时所相当的时间生物生物F F0 0：以相当于以相当于121121摄氏度热压灭菌时，杀死容摄氏度热压灭菌时，杀死容器中所有微生物所需要的时间器中所有微生物所需要的时间热压灭菌热压灭菌影响影响F值与值与F0值的因素值的因素温度温度容器大小、形状及热穿透性容器大小、形状及热穿透性灭菌产品溶液性质、填充量灭菌产品

18、溶液性质、填充量灭菌器中灭菌物品的数量与分布灭菌器中灭菌物品的数量与分布灭菌产品微生物的污染数量灭菌产品微生物的污染数量计算计算F0值时，应考虑增加安全因素，通常增加值时，应考虑增加安全因素，通常增加50%三、空气净化技术三、空气净化技术生产区域生产区域一般生产区一般生产区控制区控制区洁净区洁净区洁净度不同的房间应保持大于洁净度不同的房间应保持大于5Pa的静压差的静压差洁净室与室外大气压应保持大于洁净室与室外大气压应保持大于10Pa的静压差的静压差洁净室温度为洁净室温度为18-26摄氏度，相对湿度摄氏度，相对湿度40%-60%各种注射剂及工序对洁净度的要求各种注射剂及工序对洁净度的要求1001

19、00级：级：大体积注射剂的灌封大体积注射剂的灌封灌封前不需除菌滤过灌封前不需除菌滤过的药液配制；注射剂的灌封、分装和压塞；的药液配制；注射剂的灌封、分装和压塞；直接接触药品的包装材料的最终处理后的直接接触药品的包装材料的最终处理后的暴露环境暴露环境各种注射剂及工序对洁净度的要求各种注射剂及工序对洁净度的要求1000010000级：级：注射剂的稀配、滤过；注射剂的稀配、滤过；小体积注射剂的灌封；直接接触药品的包小体积注射剂的灌封；直接接触药品的包装材料的最终处理装材料的最终处理灌封前需除菌滤过的灌封前需除菌滤过的药液配制药液配制各种注射剂及工序对洁净度的要求各种注射剂及工序对洁净度的要求1000

20、00100000级：级：注射剂的浓配或采用密注射剂的浓配或采用密闭系统的稀配闭系统的稀配轧盖工序、直接接触轧盖工序、直接接触药品的包装材料最后一次精洗的最低要求药品的包装材料最后一次精洗的最低要求工业净化：除尘埃粒子工业净化：除尘埃粒子生物净化：除尘埃粒子生物净化：除尘埃粒子 除去微生物除去微生物三、空气净化技术三、空气净化技术洁净室空气净化标准洁净室空气净化标准含尘浓度含尘浓度净化方法净化方法 1、一般净化、一般净化 2、中等净化、中等净化 3、超净净化、超净净化v1 1、过滤方式、过滤方式 表面过滤表面过滤 深层过滤深层过滤空气净化技术空气净化技术2 2、空气过滤机理及影响因素、空气过滤机

21、理及影响因素v过滤机理：过滤机理： 拦截作用拦截作用 吸附作用吸附作用 v影响因素：影响因素： 粒径粒径 过滤风速过滤风速 介质性质介质性质 附尘附尘3 3、空气过滤器及特性、空气过滤器及特性v空气过滤器空气过滤器（1 1）板式空气过滤器）板式空气过滤器（2 2）契式和袋式空气过滤器）契式和袋式空气过滤器（3 3）折叠式空气过滤器）折叠式空气过滤器第二节第二节 注射剂注射剂 1、注射剂的概念与分类注射剂的概念与分类 概念概念 ：将药物制成供注入体内的灭菌：将药物制成供注入体内的灭菌或无菌溶液、乳浊液、混悬液及临用前或无菌溶液、乳浊液、混悬液及临用前配成液体的无菌粉末。配成液体的无菌粉末。 一、

22、概一、概 述述（一）注射剂的概念、分类和给药途径（一）注射剂的概念、分类和给药途径 按分散系统分：按分散系统分： 溶液型：水针、油性注射剂溶液型：水针、油性注射剂 混悬型：醋酸可的松注射液混悬型：醋酸可的松注射液 乳浊型：静脉营养乳剂乳浊型：静脉营养乳剂 固体粉末型：青霉素粉针剂固体粉末型：青霉素粉针剂分类分类溶剂结晶法溶剂结晶法喷雾干燥法喷雾干燥法冷冻干燥法冷冻干燥法给药途径给药途径 皮内注射：皮内注射：剂量剂量0.2ml0.2ml以下，常用于过以下，常用于过 敏性试验或疾病诊断。敏性试验或疾病诊断。 皮下注射：皮下注射：无刺激性水溶液为主，剂量无刺激性水溶液为主，剂量 12ml12ml。

23、肌内注射：肌内注射：剂量剂量15ml15ml，刺激性太大的，刺激性太大的 药物不宜使用。药物不宜使用。 静脉注射：静脉注射：分静脉推注和静脉滴注分静脉推注和静脉滴注2种方种方法，前者用量为法，前者用量为5-50ml，后者可达数千，后者可达数千ml，不得添加抑菌剂。，不得添加抑菌剂。 脊椎腔注射：脊椎腔注射：注射剂的渗透压和注射剂的渗透压和pHpH应与应与脊椎液相等，只能使用水溶液，不能加脊椎液相等，只能使用水溶液，不能加任何附加剂，必须等渗且等张，任何附加剂，必须等渗且等张，PHPH为为5-85-8，一次剂量不超过一次剂量不超过10ml.10ml. 动脉内注射：动脉内注射： 其他途径：其他途径

24、：穴位注射、滑膜腔内注射、穴位注射、滑膜腔内注射、 关节内注射、鞘内注射。关节内注射、鞘内注射。 药效迅速、作用可靠药效迅速、作用可靠 适用于不宜口服的药物：适用于不宜口服的药物： 适用于不宜口服的病人：适用于不宜口服的病人： 产生局部定位、靶向或长效作用产生局部定位、靶向或长效作用 使用不方便、注射疼痛使用不方便、注射疼痛 制备过程复杂、质量要求高、成本高制备过程复杂、质量要求高、成本高（二）注射剂的特点（二）注射剂的特点 无菌：不得含有活的微生物和芽孢无菌：不得含有活的微生物和芽孢 无热原：无热原： 澄明度：澄明度： pHpH值：值：4949 渗透压：等渗，可稍高渗，不可低渗渗透压：等渗，

25、可稍高渗，不可低渗 安全性：无毒无刺激性安全性：无毒无刺激性 稳定性：稳定性： 降压物质：降压物质： 含量、色泽、装量等含量、色泽、装量等（三）注射剂的质量要求（三）注射剂的质量要求二、注射剂处方组分二、注射剂处方组分注射用原料注射用原料注射用溶剂注射用溶剂附加剂附加剂原水原水纯化水纯化水 注射剂用水注射剂用水灭菌注射用水灭菌注射用水注射用水注射用水原水：原水：为自来水或深井水为自来水或深井水纯化水：纯化水：原水经过蒸馏法、离子交换法、反渗透法原水经过蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其它方法制得的供药用的水。可用于或其它方法制得的供药用的水。可用于配制普通制配制普通制剂，也可用于非无菌原料药的精

26、制、注射剂容器、剂，也可用于非无菌原料药的精制、注射剂容器、塞子等的初洗塞子等的初洗注射用水：注射用水：纯化水蒸馏而得。用于纯化水蒸馏而得。用于注射剂配液、注注射剂配液、注射剂容器的最后一道洗瓶、无菌原料药的精制射剂容器的最后一道洗瓶、无菌原料药的精制灭菌注射用水：灭菌注射用水：注射用水封装后再经灭菌制成。主注射用水封装后再经灭菌制成。主要用于要用于溶解注射用灭菌粉针剂或稀释注射溶液剂溶解注射用灭菌粉针剂或稀释注射溶液剂制药用水的类别制药用水的类别纯化水：纯化水：检查酸碱度、氯化物、硫酸盐、钙检查酸碱度、氯化物、硫酸盐、钙盐、硝酸盐等。盐、硝酸盐等。注射用水：注射用水：除符合纯化水有关规定外，

27、除符合纯化水有关规定外，PH为为5-7，氨浓度不大于，氨浓度不大于0.2ppm，细菌内毒素，细菌内毒素小于小于0.25EU/ml。灭菌注射用水：灭菌注射用水：符合注射用水和注射剂项下符合注射用水和注射剂项下有关规定有关规定制药用水的质量要求制药用水的质量要求配料：配料：不超过不超过12小时；小时；洗涤：洗涤：不超过不超过24小时；小时；生物制品生产：生物制品生产：不超过不超过6小时；小时；贮存：贮存：80摄氏度以上保温、摄氏度以上保温、65摄氏度以上保摄氏度以上保温循环或温循环或4摄氏度以下存放。摄氏度以下存放。注射用水的贮存注射用水的贮存 一般为精制的植物油，常用的油有麻油、茶油、一般为精制

28、的植物油，常用的油有麻油、茶油、大豆油等。只能供大豆油等。只能供肌肉注射肌肉注射。要求：要求：注射用油注射用油乙醇乙醇甘油甘油丙二醇丙二醇PEGPEGDMADMA等等其它注射用溶剂其它注射用溶剂 不影响药物疗效，避免对检验产生干扰，使用浓不影响药物疗效，避免对检验产生干扰，使用浓度不得引起毒性或过度的刺激；度不得引起毒性或过度的刺激；常用的抗氧剂有常用的抗氧剂有，一般浓度为，一般浓度为；常用抑菌剂为常用抑菌剂为等；等；静脉输液与脑池内、硬膜外、椎管内用的注射液静脉输液与脑池内、硬膜外、椎管内用的注射液不得加不得加；除另有规定外，一次注射量除另有规定外，一次注射量的注射液，的注射液，不得加不得加。注射剂的附加剂（中国药典）注射剂的附加剂（中国药典）( (一一) )增加主药化学稳定性增加主药化学稳定性 1. 1.抗氧剂抗氧剂2.2.金属络合剂金属络合剂3.3.惰性气体惰性气体注射剂的附加剂注射剂的附加剂主要是指主要是指哪些药物哪些药物q含酚羟基药物含酚羟基药物(肾上腺素、水杨酸钠肾上腺素、水杨酸钠)q芳胺类药物（磺胺类钠盐、盐酸普鲁卡因胺）芳胺类药物（磺胺类钠盐、盐酸普鲁卡因胺）q吡唑酮类药物（安乃近、氨基比林等）吡唑酮类药物（安乃近、氨基比林等）（二）增加注射剂物理稳定性（二）增加注射剂物理稳定性 1. 1.润湿剂或乳化剂润湿剂或乳化剂2.2.助悬剂助悬剂注射剂的附加剂注射