Kibra和aPKC在中枢神经系统发育中的表达与意义论文

1、 . 分 类 号 学号200248（师资班）学校代码 10487 密级硕士学位论文Kibra和aPKC在中枢神经系统发育中的表达与意义学位申请人：周金安学 科 专 业：病理学指 导 教 师：段亚琦 副教授答 辩 日 期：2013年5月50 / 55A Thesis Submitted in Partial Fulfillment of the Requirements for the Degree of Master of MedicineExpression and significance of Kibra andaPKC in centralnervous systemduring em

2、brynic developmentCandidate: Zhou Jinan Tutor: Prof. Duan YaqiMajor: PathologyTongjiMedicalCollege ofHuazhongUniversity of Science and TechnologyWuhan, Hubei 430030, P.R.ChinaMay, 2013独创性声明本人重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作与取得的研究成果的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明确

3、方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。学位论文作者签名：日期： 年 月 日学位论文使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 ，在_年解密后适用本授权书。本论文属于不。（请在以上方框打“” ）学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日目录一、摘要1中文摘要12 英文摘要4二、正文1 前言62 材料与方法8

4、3 结果3.1 HE染色结果113.2Kibra结果123.3 aPKC结果194讨论265结论276 参考文献28三、综 述1 综述312 结语413参考文献42四、致48Kibra和aPKC在中枢神经系统发育中的表达与意义华中科技大学同济医学院硕士研究生 周金安导师 段亚琦中文摘要概述Kibra是一个含有WW结构域，表达于肾脏和脑组织的蛋白质。通过基因组单核苷酸多态性筛选证实，Kibra参与了人类记忆认知功能。大量研究表明，Kibra表达在记忆相关的脑组织区域；在记忆提取的过程中，Kibra等位基因会发生明显改变；Kibra与CLSTN2表达在记忆相关区域颞叶部位参与情节记忆的形成，与阿尔

5、默海茨病病因有关。但是Kibra在脑组织中的表达部位以与在胚胎发育过程中Kibra表达部位和表达水平的变化与记忆形成的关系尚不明确。PKC（蛋白激酶C）作为一个氨酸-丝氨酸家族蛋白，参与了机体很多的生理性和病理性过程。如：脑组织的发育、突触的可塑性、癫痫病、脑缺血以与神经细胞的死亡。aPKC(非典型蛋白激酶C)为蛋白激酶C家族中的一个类型，可以分为三个亚型，PKC、PKC/、PKM。这些亚型在突触可塑性和神经变性疾病中发挥了重要的作用。它们介导胞外信号调节的激酶级联反应，P70S6激酶信号级联反应，参与肿瘤的发生，细胞极性的形成以与记忆的长时程增强。大脑记忆的主要功能区域在海马，其次为颞叶和小

6、脑，因为Kibra和PKC在胚胎发育脑组织中的具体表达部位与其意义还未阐明，如果能证实它们表达于大脑这些与记忆相关的区域，能为记忆形成的机理研究打下一定基础。同时,最近研究发现，Kibra与PKC关系密切，可能是PKC磷酸化的底物。本研究以大鼠不同发育时期的脑组织（不同胚胎期、新生、成年）为研究对象,通过HE染色了解脑组织的基本结构和细胞形态；阴道抽液法确定受孕日期；免疫组织化学方法检测Kibra和aPKC在不同时期脑组织中的表达，从而探讨二者在突触可塑性和记忆形成的联系。结果显示：1、Kibra在大脑皮层、海马、小脑的细胞核中表达；在10d、12d表达阴性，14d表达弱阳性，16d、18d、

7、新生、成年大鼠阳性表达逐渐增强。2、aPKC在大脑皮层、海马、小脑细胞的细胞连接处表达，且在各个时期脑组织均为阳性表达。目的1、掌握了解大鼠脑组织的形态结构和组织特点。2、研究Kibra和aPKC在不同时期的大鼠脑组织中的表达。3、初步探讨Kibra和aPKC在大脑记忆形成中的相关性。方法1、将雌雄成年鼠合笼，阴道抽液确定怀孕日期（检查到精子记为怀孕0.5天）。2、收集不同时期（胚胎第10d， 12d， 14d， 16d，18d， 20d）胚胎鼠、新生鼠与成年鼠各两只，共16只，分别标记、取脑组织。3、固定标本并切片（做冰冻切片和石蜡切片二种），HE染色、同一时期的大鼠脑组织分别用ABC三步法

8、免疫组织化学法进行Kibra和aPKC染色。结果1、Kibra在大脑皮层、海马、小脑的细胞质中表达；在胚胎10d、12d表达阴性；胚胎第14d在大脑皮层表达弱阳性，胚胎第18d在大脑皮层表达阳性，海马区表达弱阳性；新生鼠在大脑皮层、海马、小脑的浦肯野细胞中表达阳性。随着胚胎的发育，表达逐渐增强。2、aPKC自胚胎第10d在大脑皮层、海马、小脑细胞的细胞连接处表达阳性且均在各个脑组织时期表达阳性，随着胚胎发育，表达有逐渐增强的趋势。结论1、Kibra较aPKC晚表达于脑组织中，Kibra在脑组织中的表达随胚胎发育逐渐增强，表达区域逐渐扩大。2、aPKC在自胚胎早期即表达于脑组织，说明是脑组织发育

9、不可缺少的成分。3、Kibra和aPKC自新生后均在脑组织海马、大脑皮层和小脑中表达，提示了二者可能存在潜在的相互作用和联系，参与了记忆的形成。关键词：记忆形成；脑组织；Kibra；aPKC; 免疫组化；HE染色Expression and significance of Kibra andaPKC in centralnervous systemduring embrynic developmentCandidate : Zhou JinanSupervisor: Prof.Duan YaqiTongjiMedicalCollege,HuazhongUniversity of Science

10、 and TechnologyABSTRACTSummarizeThe Kibra gene encodes a cytoplasmatic protein, a member of the signal transduction protein family, expressed mainly in the brain. Recent studies have implicated the involvement of a genetic variation in the KIBRA gene (T allele) in human memory in normal subjects and

11、 in the risk of developing Alzheimer's disease (AD). PROTEIN KINASE C (PKC) is an integral part in the cell signaling machinery. Biochemical and molecular cloning analysis has revealed that, like most other signaling proteins, the enzyme comprises a large family with multiple isoforms exhibiting

12、 individual characteristics and distinct patterns of tissue distribution. The biological significance of this heterogeneity has not been fully clarified, but the function of each PKC isoform for cellular regulation is being investigated extensively. Presently, the possibility may not be ruled out th

13、at some isoforms represent simply a redundancy, but plausible evidence suggests that the members of this enzyme family are activated in specific intracellular compartments in different ways, depending on various membrane lipid metabolites, and play distinct roles for the control of major cellular fu

14、nctions.Objective The aim of our study was to investigate the morphological structure and features of organization in brain tissues. The expression of Kibra and aPAC in brain tissues were detected as well. MethodsThe female and male rats were mated and dates of pregnant were confirmed by vaginal flu

15、id. The brain tissues of fetuses rats (10 d, 12 d, 14 d, 16 d, 18 d, 20 d), neonatal rats and adult rats at different stages were collected. Routinely processed 4% formamint-fixed, frozen sections and paraffin-embedded blocks were archived. Kibra and aPKC were staining by HE and ABC immunohistochemi

16、cal methods.ResultsKibra was expressed in the nuclei of cerebral cortex, hippocampus and epencephalon. The expression levels of Kibra were negative on day 10, 12, weakly positive on day 14. The expression level was gradually increased in neonatal rats and adult rats. The expression of aPKC was posit

17、ive in the adherens junctions of cerebral cortex, sea horse and epencephalon at different period of brain tissues. Conclusion1、In brain tissues, the expression of Kibra is later than aPKC.The expression level and area of Kibra increases with the embryonic development.2、aPKC is an indispensable compo

18、nent of brain development because it expresses in brain tissue in early embryon.3. Colocalization of Kibra and aPKC in the cerebral coretex, hippocampus and cerebellummay implicate their roles in memory formation.Key words:engraphia; Kibra; aPKC; immunohistochemistry; HE stainingKibra和aPKC在中枢神经系统发育中

19、的表达与意义前言人类记忆的形成在神经生物界至今是一个谜。一些研究者对记忆的获得、维持和再现的机制仍在寻求答案。记忆的形成是一个高度复杂的过程，需要各种蛋白质分子的相互作用参与。其中，情节记忆是人类对过去特定的时间特定经验信息的一个储存1。情节记忆50%是由遗传获得2，但是个体情节记忆的遗传差异的机制尚不清楚。动物实验研究表明，个体间的记忆遗传差异归功于记忆形成过程中记忆相关信号分子3。在这些相互作用的分子中，Kibra是一个近期研究比较热门的分子，通过运用单核苷酸多态性的基因组相关研究表明，Kibra与人类情节记忆有关。最近的研究结果也一再显示了Kibra在记忆形成过程中的重要性4, 5。Ki

20、bra是一个含有WW-结构域的蛋白分子，表达于肾脏和脑组织中6。在海马与颞叶这些与记忆高度相关的区域高度表达7, 8。Kibra被证实涉与到情节记忆形成的过程中，如信号转导，突触可塑性，长时程增强与突触传递6, 7, 9。Kibra还通过与多种分子相互作用参与到多种生理功能中，如：信号传导、细胞极性的分化、细胞的迁移、囊泡递质的运输、转录的调节10等。在乳腺癌MCF7细胞中Kibra还与DLC1共同激活雌激素受体11，对乳腺癌的治疗、预后有一定的指导意义。PKC是丝氨酸氨酸蛋白激酶家族的一个成员，通过磷酸化反应来调节许多的细胞功能12。根据其结构和功能将PKC分为12种亚型。aPKC由于缺少C

21、a离子和二酰甘油结合区，故激活机制不同于其他PKC。aPKC可分为三种亚型：PKC、PKC/、PKM。三者的结构如综述图1所示。aPKC包含调节区和催化区二个结构域，PKC、PKC/在催化区有高度相关性，研究发现，这二种亚型在基因敲除小鼠不同表型中发挥的作用是不同的。敲除PKC/的小鼠由于胚胎早期细胞极性的缺陷在胚胎期死亡，而敲除PKC的小鼠却可以存活。说明，在胚胎发育中PKC/对细胞极性的建立至关重要，而PKC不参与这个过程13。在各种细胞中，PKC参与MAPK级联反应；活性突变的PKC活化MAPK激酶MEK1和ERK114-17；野生型PKC的过度表达激活ERK1和ERK2，增加EIK1的

22、转录活性；参与受体信号复合物到NFB转录因子的活化18, 19和P 70S6激酶信号与级联反应20, 21等。PKC/在一些恶性肿瘤如非小细胞肺癌和卵巢癌中异常表达，持续过度表达可导致细胞极性、粘附作用丧失，与肿瘤的转移、发展、预后有一定的关系22, 23。而PKM只含有催化区，是一个截短型的aPKC分子24，一旦产生，就始终处于激活状态。研究表明，PKM在长期记忆的维持和海马长时程增强中发挥了重要作用，是一个必不可少的分子25。本实验旨在研究Kibra和aPKC在不同鼠脑组织发育过程中的表达部位，通过初步探讨二者的表达，为进一步研究二者间的相互作用提供定位依据。一些实验研究表明：Kibra和

23、aPKC通过与不同分子的相互作用共同参与信号通道中，发挥一样的功能。Kibra作为aPKC磷酸化的底物这是至今唯一明确的关于二者直接相互作用的研究发现。如果Kibra被PKC磷酸化后参与记忆的形成，那么通过对Kibra与PKC在胚胎发育过程中定位的研究，可以部分揭开两者神秘关系的面纱。材料和方法一材料（一） 动物成年健康250g左右SD大鼠24只：购于华中科技大学同济医学院动物实验中心（二） 试剂 1. Kibra与aPKC抗体购于美国Santa cruz公司，最终稀释浓度： Kibra为1：200，aPKC为1:1000。2. 4%多聚甲醛：称取40g多聚甲醛,加热至60左右的蒸馏水约400

24、ml，搅拌,加入少量的1M NaOH溶液，搅拌至完全溶解（一直保持60的温度）；加入0.2M的PBS500ml，冷却后过滤，蒸馏水定容至1000ml。PH值调至7.2-7.4，放入4冰箱预冷，现配现用。 3. 0.2M PBS：(1) Na2HPO4·12H2O 5.67g 溶于200ml蒸馏水 (2) NaH2PO4·2H2O 1.56g 溶于50ml蒸馏水， 取（1）168ml和（2）32ml混匀即可。 4. 免疫组化用PBS：Na2HPO4·12H2O 14.4999g 、NaH2PO4·2H2O 1.482g、 Nacl 45g溶于5L蒸馏水中，

25、调PH至7.4。5. 30%蔗糖：（1）称取14.2 Na2HPO4·12H2O14.2g 溶于100ml蒸馏水中，（2）称取NaH2PO4·2H2O 12g溶于100ml中，分别取（1）72.9ml和（2）27.1ml混合，加入30g蔗糖溶解其中，现配现用。 6. OCT包埋剂：购于美国SAKURA 产品。7. ABC试剂：购于中杉金桥免疫组化专用ABC试剂盒。8. 95%乙醇：950ml无水乙醇，50ml双蒸水。9. 90%乙醇：900ml无水乙醇，100ml双蒸水。10. 80%乙醇：800ml无水乙醇，200ml双蒸水。11. 抗原修复液：0.01mol/L柠檬酸盐

26、缓冲液（CB，pH6.0，1000ml），柠檬酸三钠 3g，柠檬酸 0.4g，混匀。12. 3%H2O2：30%H2O2，PBS按体积1:10比例混合13. DAB：购于美国R&D Systems公司。14. 1%盐酸酒精：75%的酒精100ml +1ml浓盐酸（三）主要仪器HPIAS1000型图像分析系统。二方法（一）获取胎鼠脑组织(1)获取胎鼠：第一天下午17:30以2:1的比例雌雄合笼，于次日9点前进行阴道抽液并涂片，镜下观察精子，记录阴道涂片有精子的雌鼠进行标记并记录为妊娠0.5天。(2)待胎鼠孕育到所需天数后麻醉孕鼠剖腹取出胎鼠，麻醉，断头。冰上分离其脑组织。(3)获取新生鼠

27、与成年大鼠的脑组织：取新生鼠与250g成年大鼠，麻醉，剪开胸腔，暴露心脏。从心尖处将灌流针插入左心室，剪开右心耳。先灌以少量生理盐水，再用4%多聚甲醛灌流。待新生鼠四肢抽搐，僵硬，变白后，断头取脑，冰上分离脑组织。(4)脑组织的处理与后固定：以上脑组织分离后分别投入4%多聚甲醛过夜，后转入30%的蔗糖中。待沉底后，OCT包埋，液氮速冻一分钟，放置-70冰箱保存。所有标本收集齐后，进行脑组织切片。(5)脑组织切片：将标本进行石蜡包埋，从平行大脑中线面进行矢状切片，片厚5m，每5取一。烤片过夜，待染色。（二）HE染色步骤（1）脱蜡：二甲苯脱蜡10mins×2。（2）水化：100%酒精，9

28、5%酒精，75%酒精依次放置5mins。（3）自来水冲洗后过双蒸水，1min。（4）木素染色5min后，充分自来水冲洗1min；将玻片表面木素冲净然后过盐酸酒精分化10s。（5）流水冲洗，观察染色是否充分。（6）伊红染色20秒，然后用无水酒精、脱水，2min/次。（7）吹干，中性树胶封片。（三）免疫组化采用S-P法染色步骤(1)石蜡切片脱蜡至水：二甲苯10mins，二甲苯10mins，二甲苯5mins，95%酒精5mins，80%酒精5mins，75%酒精5mins，蒸馏水2mins。（2）高压锅抗原修复：加入枸橼酸钠修复液，冒气时开始计时1分30秒。（3）3%过氧化氢室温孵育10mins，以

29、消除源性过氧化物酶的活性。（4）自来水冲洗1min。（5）PBS 5mins×3。（6）加A液3730mins，消除背景非特异性染色。（7）甩掉切片上的A液，滴加用血清稀释好的一抗，4过夜。（8）自来水洗1mins。（9）PBS 5mins×3。（10）加B液，3720mins。（11）自来水洗1mins。（12）PBS 5mins×3。（13）加C液，3720mins。（14）自来水洗1mins。（15）PBS 5mins×3。（16）滴加二抗，3730mins。（17）自来水洗1mins。（18）木素复染，透明，封片。（四）结果的阅读和分析本实验结果

30、由一名经验丰富的技师指导染色，经过二名同济医院副高以上专家阅片，采用HPIAS1000型图像分析系统获取图片，结果真实可靠。结果一、HE染色：脑组织的正常形态结构。图1-1 成年鼠脑组织HE染色（20×）图1-2 成年鼠脑组织HE染色(海马400×)图1-3 成年鼠脑组织HE染色(小脑400×)二、Kibra结果Kibra自胚胎第14天在大脑皮层表达弱阳性；胚胎第18天在大脑皮层表达阳性，海马区表达弱阳性；新生鼠在大脑皮层、海马、小脑的浦肯野细胞中表达阳性。1、在大鼠胚胎发育的第10d，其脑组织为神经管，Kibra染色结果为阴性（见图2-1）。图2-1 10d胎鼠

31、脑组织免疫组化结果示Kibra的表达（20×）；2、在大鼠胚胎发育的第12d，脑组织Kibra染色结果为阴性（见图2-2）。图2-2 12d胎鼠脑组织免疫组化结果示Kibra的表达（20×）； 3、在大鼠胚胎发育的第14d，大脑皮层Kibra染色结果为阳性（见图2-3箭头所指处）。4、在大鼠胚胎发育的第16d，大脑皮层Kibra染色结果为阳性，着色较第14d稍深（见图2-4箭头所指处）。5、在大鼠胚胎发育的第18d，大脑皮层Kibra染色结果为阳性，海马区Kibra染色结果为阳性（见图2-5箭头所指处）。6、新生鼠免疫组化结果示Kibra在大脑皮层、海马、小脑中的表达均为阳

32、性（见图2-6、图2-11，图2-6箭头所指处从左到右分别为小脑、海马、大脑皮层；图2-11示新生鼠小脑）。7、成年鼠免疫组化结果示Kibra在大脑皮层、海马、小脑中的表达均为阳性，并且着色较前都有明显加深（见图2-7、2-8、2-9、2-10）。图2-3 14d胎鼠脑组织免疫组化结果示Kibra的表达（20×）；图2-4 16d胎鼠脑组织免疫组化结果示Kibra的表达（20×）；图2-5 18d胎鼠脑组织免疫组化结果示Kibra的表达（20×）；（左侧箭头示大脑皮层，右侧箭头示海马区）图2-6 新生鼠免疫组化结果示Kibra在大脑皮层、海马、小脑中的表达（20&

33、#215;）；图2-7 成年鼠免疫组化结果示Kibra在大脑皮层、海马中的表达（20×）；A图2-8 图2-7中A部分示Kibra在大脑皮层表达阳性（100×）B图2-9 图2-7中B部分示Kibra在海马与齿状回表达阳性（100×）C字形为CA区，W形为齿状回区C图2-10 图2-7中C部分示Kibra在海马区表达阳性（400×）D图2-11 图2-7中D部分Kibra在小脑浦肯野表达阳性（100×）三、aPKC结果：1、aPKC在细胞与细胞连接处出现棕黄色颗粒为阳性表达。aPKC在大脑皮层，海马，小脑中表达阳性。2、aPKC在在10d、12

34、d、14d、16d、18d、20d、新生、成年表达均阳性（见图3-1、图3-2、图3-3、图3-4、图3-5、图3-6、图3-7、图3-8、图3-9、图3-10、图3-11、图3-12），强度随生长发育的过程有逐渐增强的趋势。图3-1 10d胎鼠脑组织免疫组化结果示aPKC的表达（20×）；图3-2 12d胎鼠脑组织免疫组化结果示aPKC的表达（20×）；图3-3 14d胎鼠脑组织免疫组化结果示aPKC的表达（20×）；图3-4 15d胎鼠脑组织免疫组化结果示aPKC的表达（20×）；图3-5 16d胎鼠脑组织免疫组化结果示aPKC的表达（20×

35、;）；图3-6 18d胎鼠脑组织免疫组化结果示aPKC的表达（20×）；图3-7 20d胎鼠脑组织免疫组化结果示aPKC的表达（20×）；图3-8 新生鼠（左）和成年鼠（右）脑组织免疫组化结果示aPKC的表达（20×）；图3-9 图3-8中E部分免疫组化结果示aPKC在海马的表达（100×）；图3-10 图3-8中F部分免疫组化结果示海马区aPKC的表达（400×）；图3-11 图3-8中G部分免疫组化结果示aPKC的表达（400×）（注：周边一圈棕染细胞为浦肯野细胞）图3-12 图3-8中H部分免疫组化结果示aPKC在大脑皮质的表达

36、（100×）；讨论记忆的形成是一个比较复杂的过程，大脑记忆主要部位已经被证实为海马区，其次为大脑皮层和小脑，这些部位蛋白的表达与记忆必定存在一定联系。Kibra在人类肾脏和脑组织中高度表达。它第一个被证实与记忆行为有着直接联系的支架蛋白。与记忆相关基因筛选表明，Kibra基因第九个含子上的单核苷酸多态性与情节记忆有关26。Kibra蛋白质表达在细胞质，含有二个与富含脯氨酸靶分子结合的WW结构域，一个感应Ca离子的类似C2区27与位于羧基端富含谷氨酸的区域28。本实验显示kibra在细胞质表达，特别是核周表达丰富，它在细胞质的定位说明kibra不参与RNA剪切与转录等一系列细胞核蛋白的

37、功能中。免疫组化结果表明kibra在记忆相关区域海马CA1，CA2，CA3，齿状回，大脑皮层，小脑，下丘脑高度表达，参与了记忆的形成。为一些神经代紊乱疾病和阿尔默海茨病提供了病因依据。aPKC分为三种亚型PKC、PKC/、PKM，大量研究表明PKM参与了长时程增强和长时程抑制过程29，毋庸置疑的是这三者均为记忆认知形成过程中的重要分子30。PKC/在胚胎细胞极性形成过程中发挥了重要作用，胚胎发育时PKC/表达缺陷可导致胚胎的死亡31。PKC参与多个信号级联反应，如炎症、免疫反应、细胞凋亡、细胞极性的建立中32。本试验中，aPKC在海马，大脑皮质，小脑这些部位表达显著，在一定程度上与胚胎神经发育

38、、记忆形成有关。aPKC在Dishevelled分子作用下促进轴突的分化，在神经发育中有着关键的作用33。在亚细胞水平，aPKC在细胞联合部位表达阳性，显示aPKC在细胞极性建立中的重要性。但是aPKC在各种功能中形成复合物后下游调控的目的分子和调控这些分子后产生的详细机制和功能，以与细胞极性维持和建立的分子机制、在记忆形成过程的具体机制有待进一步研究和探讨。有研究报导，Kibra和aPKC通过与不同分子的相互作用共同参与信号通道中，发挥一样的功能。Kibra作为aPKC磷酸化的底物这是至今唯一明确的关于二者直接相互作用的研究发现。本研究中，在小鼠胚胎发育到14天后，Kibra在大脑皮层开始表

39、达，而后随着胚胎的发育逐渐表达增强，区域逐步扩展到海马、小脑。自Kibra完全表达后，其和aPKC在脑组织中表达的部位均为大脑皮层、海马、小脑这三个与记忆明确相关的区域。Kibra在14d后开始表达至成年表达逐渐增强，可能说明脑组织发育到一定阶段，通过Kibra的出现，在一系列分子机制下激活aPKC，处于激活状态的aPKC作用于Kibra，使14d后的脑组织Kibra的表达呈现出逐渐增强的阳性表达。aPKC自胚胎发育的第10天即广泛表达于脑组织中，说明其是脑组织生长发育和记忆形成中不可缺少的分子。由此，经过我们初步探讨这二者在脑组织中的表达部位，为进一步研究它们的相互作用机制提供了一个出发点。

40、结论1、Kibra较aPKC晚表达于脑组织中，Kibra在脑组织中的表达随胚胎发育逐渐增强，表达区域逐渐扩大。2、aPKC在自胚胎早期即表达于脑组织，说明是脑组织发育不可缺少的成分。3、Kibra和aPKC自新生后均在脑组织海马、大脑皮层和小脑中表达，提示了二者可能存在潜在的相互作用和联系，参与了记忆的形成。参考文献1. Tulving, E., Episodic memory: from mind to brain. Annu Rev Psychol, 2002. 53: p. 1-25.2. Bouchard, T.J. and M. McGue, Genetic and environm

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