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文档简介

1、液液- -液分配色谱与化学键合固定相色谱液分配色谱与化学键合固定相色谱固定相极性固定相极性流动相极性流动相极性正相分配色谱正相分配色谱（正相柱）（正相柱）组分极性越大，保留组分极性越大，保留时间越长；使用极性时间越长；使用极性化合物的分离。化合物的分离。反相分配色谱反相分配色谱（反相柱）（反相柱）固定相极性固定相极性BC 利用硅胶表面存在的硅羟基，通过化学反应将利用硅胶表面存在的硅羟基，通过化学反应将有机分子键合到硅胶表面。有机分子键合到硅胶表面。A. 硅氧碳键型：硅氧碳键型： SiOCB. 硅氧硅碳键型：硅氧硅碳键型：SiOSi C C. 硅碳键型：硅碳键型： SiCD. 硅氮键型：硅氮键型

2、： SiN化学键合固定相化学键合固定相 特点：特点：非常稳定，在使用中不易流失。可将各非常稳定，在使用中不易流失。可将各种极性的官能团键合到载体表面，适用于种类繁多种极性的官能团键合到载体表面，适用于种类繁多样品的分离。样品的分离。ODS(C18)键合相键合相硅胶硅胶十八烷基十八烷基氯硅烷氯硅烷双重分离机制：双重分离机制：( (键合基团的覆盖率决定分离机理键合基团的覆盖率决定分离机理) )高覆盖率：分配为主；高覆盖率：分配为主；低覆盖率：吸附为主。低覆盖率：吸附为主。 硅胶为基质键合的C18填料2. 键合固定相类型键合固定相类型类类型型反相柱反相柱正相柱正相柱氨丙基氨丙基氰乙基、醚和醇等氰乙基

3、、醚和醇等极性基团极性基团不同碳原子数的不同碳原子数的烷烃（烷烃（C8和和C18）、）、苯基等疏水基团苯基等疏水基团 C8硅胶键合辛烷基 C18硅胶键合十八烷基 C8和C18都是反相色谱柱的一种，适用于分析弱极性的物质， C8适合分析弱极性物质里极性稍强的一类物质，C18适合分析弱极性物质里极性更弱的物质。例：以例：以ODS键合色谱柱、甲醇键合色谱柱、甲醇- -水为流动相分离以水为流动相分离以下两种苯甲酸，试判断出峰次序。下两种苯甲酸，试判断出峰次序。COOHOHOHCOOHOHOHHO没食子酸没食子酸3,4-二羟基苯甲酸二羟基苯甲酸因此，保留时间：因此，保留时间：COOHOHOHCOOHOHOHHO没食子酸没食子酸3,4-二羟基苯甲酸二羟基苯甲酸固定相固定相: 非极性非极性; 流动相流动相: 极性

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