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文档简介

1、精品文档E花环实验一.实验原理人外周血 T 淋巴细胞表面具有绵羊红细胞（SRBC）受体，能够与 SRBC 结合形成 花环样细胞团（即 E 花环）。已证实 E 受体是人类 T 细胞所特有的表面标志。当 T 细胞与 SRBC 混合后， SRBC 便粘附于 T 细胞表面，呈现花环状。通过花环形 成检查 T细胞的方法， 称为 E 花环形成试验。 根据 花环形成的多少， 可测知 T 细胞的数目，从而间接了解机体细胞免疫功能状态， 判断疾病的预后， 考核药物 疗效等。由于 T细胞的异质性，其对 SRBC 的亲和力亦不同，因而 T 细胞可形 成不同类型的 E 花环，其中在 4C放置 1 h 以上，所形成的花

2、环数代表 T 细胞总 数，称为总花环（Et 花环），而淋巴细胞与 SRBC 混合后不经 4 C 作用立即反应形 成的花环称为活性花环（Ea 花环）。二.实验结果（用图示法表示）精品文档三讨论有的细胞能形成玫瑰花环的原因：人 T 细胞膜上具有 CD2 分子，能 够与SRBC 上的 LFA-3 结合，从而形成以人 T 细胞为中心，SRBC 环绕四周， 形状如玫瑰花环的细胞集团，即 E 玫瑰花环。此外，NK 细胞膜上也有 CD2 分 子，也能形成玫瑰花环，但是 NK 细胞的量非常少，形成玫瑰花环的数量也少。有的细胞不能形成玫瑰花环的原因：a.人血液中含有单核巨噬细胞，其表面 没有CD2 分子，不能与

3、 SRBC 表面的 LFA-3 结合，因此不能形成玫瑰花环。b. 实验中所用血液不够新鲜，也可能导致不能够形成玫瑰花环。c.时间不够长，精品文档导致 T 细胞表面的 CD2 分子不能够与 SRBC 上的 LFA-3 充分结合，因此只有一 部分SRBC 与人 T 细胞结合，其余 SRBC 没能够与人 T 细胞结合形成玫瑰花环2.SRBC 与淋巴细胞混合后离心速度不能过高， 在 Et 花环试验中，置 4C应至少1h 以上或过夜。3. 绵羊红细胞以保存 1 周内最好，超过 2 周则与淋巴细胞结合力下降，超过 56 周则不能再用。实验室的绵羊红细胞保存的时间太长，导致其与淋巴细胞的结 合能力下降，所以有的细胞可以形成 E 花环，而有的细胞不可以形成 E 花环。4. Et 花环试验 SRBC 与淋巴细胞混合比例以 100 : 1200 : 1 为宜，Ea 花环试 验中以 10 : 120 : 1 为宜；淋巴细胞离体后不能超过 6h，否则会影响花环形 成率。5温度对实验结果影响较大，故实验温度条件应保持一致，从4C取出后

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