优化方案2017版高考生物大一轮复习第十二单元生物技术实践第43讲微生物的培养与应用讲义

1、第 43 讲微生物的培养与应用I弋J.,11. I 1.微生物的分离和培养2.培养基对微生物的选择作用进行发酵来生产特定的产物研析教材T夯基固本_学生用书P295)基础梳理3.利用微生物课本隘故知识融逋一、微生物的实验室培养A拉圭苴I培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。(2)营养构成：一般都含有水、碳源源和无机盐。此外还要满足微生物生长对pH特殊营养物质以及氧气的要求。(3)种类：按照物理性质可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。2.无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。(2)关键：防止外来杂菌的入侵。方法煮沸

2、消毒法 冲主巴氏消毒法 消毒化学药剂消毒法紫外线消毒法灼烧灭菌灭菌干热灭菌.高压蒸汽灭菌3大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 计算T称量亍溶化T灭菌二倒平板。(2)纯化大肠杆菌1关键的步骤是接种。2纯化培养方法：平板划线法和稀释涂布平板法。纯化培养原理：在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落,即可获得较纯的菌种。3二、 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数1分离原理：土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们能合成脲酶，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。以尿素为唯一氮源的培养基能促进分解尿素的细菌的生长和繁殖，并抑制或阻止其他微生物的生长，从而将目的菌分离。2统

3、计菌落数目：统计样品中的活菌一般用稀释涂布平板法。3实验流程：土壤取样T制备培养基T微生物的培养与观察T细菌的计数。三、 分解纤维素的微生物的分离1.纤维素酶（1）组成：纤维素酶是一种复合酶，它包括Cl酶、CX酶和葡萄糖苷酶。作用纤堆索沁運细 5 独理臓糠2.菌种筛选方法：刚果红染色法。原理纤维素分解菌即：使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。3筛选流程土壤取样：富含纤维素的环境选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的数量梯度稀释涂布平板：将样品涂布于含CR的鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落：产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈微观清障1.

4、 （2016北京海淀区期末）培养基中一般都含有水、 碳源、氮源和无机盐四种成分。（V）2将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上分离分解尿素的细菌，是否无菌操作影响 较小。（V）3.培养基分装到培养皿后进行火菌。（X）4从有机废水中分离微生物用于废水处理时，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培 养。（X）5外植体消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒齐I对细胞的伤害。（V）6.（2015高考四川卷T3D）用稀释涂布平板法培养计数，应选择有30300菌落数的 平板。（V）7. （2016山东青岛市期末）筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中，尿素是唯一的氮源。(V)刚果红纤维素T红色复合物纤维素

5、酶- 红色消失、出现透明圈。4&分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使得培养基的酸碱度降低。(X)9土壤中纤维素分解菌的筛选流程中的“选择培养”是必不可少的。(X)10.在富含纤维素的培养基中加入刚果红染色剂，若出现周围存在透明圈的菌落，则说明筛选到了分解纤维素的微生物。(V)重难透析*命题破译考点一培养基及微生物的纯化培养技术学生用书P296要点讲解,1.培养基的种类(1)按物理状态分类培养基种类特点用途液体培养基不加凝固剂工业生产固体培养基加凝固剂微生物分离、鉴定， 活菌计数，菌种保藏半固体培养基(如琼脂)观察微生物的运动、分类、鉴定(2)按功能分类种类制备方法原理用途

6、举例选择依据某些微生物 对某些物质的特从众多微生物中加入青霉素分离培养培养基中加入某 些化学物质分离所需的微生得到酵母菌和霉基殊需求或抗性而 设计物菌鉴别 培养 基培养基中加入某 种指示剂或化学 药品产生特定的颜色 或其他变化鉴别不同种类的 微生物用伊红一美蓝培 养基鉴别大肠杆菌2.培养基的配制原则(1)目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。(2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。(3) pH要适宜：细菌为6.57.5，放线菌为7.58.5，真菌为5.06.0，培养不同微 生物所需pH不同。3.消毒与灭菌条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化学方

7、法仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐咼温的液 体5物化学药剂消毒 法用酒精擦拭双 手，用氯气消毒 水源火菌强烈的理化因素杀死物体内外所 有的微生物，包括 芽孢和孢子灼烧灭 菌法接种工具干热灭 菌法玻璃器皿、金属 工具咼压蒸汽火菌 法培养基及容器4.大肠杆菌的纯化( 1 )原 理 ： 在 培 养 基 上 将 细 菌 稀 释 或 分 散 成 单 个 细 胞 ， 使 其 长 成 单 个 的 菌 落 ， 这 个 菌 落就是纯化的细菌菌落。(2)纯化微生物的接种方法比较项目平板划线法稀释涂布平板法关键操作接种环在固体平板培养基表面连续 划线一系列的梯度稀释；涂布平

8、板法操作注意事项每次划线前后均需灼烧接种环稀释度要足够咼，为确保实验成功可 以增加稀释度菌体获取在具有显者的菌洛特征的菌洛中挑取菌体从适宜稀释度的平板上的菌落中挑取菌体优点可以根据菌落的特点获得某种微生物的单细胞菌落既可以获得单细胞菌落，又能对微生 物计数缺点不能对微生物计数操作复杂，需要涂布多个平板思维拓展1.认清不同生物需要的营养物质不同(1)微生物需要的营养成分有水、无机盐、碳源、氮源，有些微生物还需要特殊营养物 质，如生长因子。(2)在人和动物中，营养物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类。(3)在植物中，营养物质包括矿质元素、水、二氧化碳三类。2平板划线操作的注意事项(1

9、)操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要对接种环进行火焰灼烧灭菌，划线 操作结束时，仍需灼烧接种环，每次灼烧目的如下表：-第一次操作每次划线之间划线结束目的杀死接种环上原有的微生物杀死上次划线后接种 环上残留的菌种，使 下次划线的菌种直接 来源于上次划线的末端，使每次划线菌种 数目减少杀死接种环上残存的 菌种，避免细菌污染 环境和感染操作者(2)灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。(4)划线时最后一区不要与第一区相连。6划线用力大小要适当，防

10、止用力过大将培养基划破。题组突(2016山东烟台市统考)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭 菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过_ 灭菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是(3)_示意图A和B中，表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分 进行振荡培养。结果发

11、现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中 _ 的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高_的利用率。(5)该小组从(3)B培养基中获得甲、乙、丙三种微生物，并分别用I、川三种培养 基来培养。甲、乙、丙都能在川中正常生长繁殖，甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不 能；乙能在n中正常生长繁殖，甲、丙都不能。培养基的成分如下：成分In出粉状硫10 g+KHPQ4 g+FeSQ0.5 g+蔗糖10 g+一+(NH4)2SQ0.4 g一+H2Q 100 mL+MgSQ9.25 g+CaCl20.5 g+贝y甲是_ 微生物，乙是_微生物，丙是_微生物。解析：(1)

12、为了检测培养基平板灭菌是否合格，可在涂布接种前，随机取灭菌后的空白 平板先行培养一段时间。(2)接种环、接种针等金属用具可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层 灼烧，以达到迅速彻底灭菌的目的。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，其目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(3)比较A和B可以看出：A培养基中细菌的分布呈线性，是用平板划线法接种培养后得到的结果；B培养基中细菌均匀分布，是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)振荡培养可以提高培养液中溶解氧的含量，还可以使菌体与培养液充分接触，提高了营养物质的利用率，因此振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。(5)从表格中可

13、看出，1培养基中无氮源，n中无碳源，川7中为完全培养基。由此可知能在I中生存的甲只能是固氮微生物，能在n中生存的乙是自养微生物，丙只在川中存活，为异养微生物。答案：(1)检测培养基平板灭菌是否合格(2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3) B (4)溶解氧营养物质(5)固氮自养异养考点二微生物的计数方法学生用书P298要点讲解r1两种计数方法的比较囂间接计数法(稀释涂布平板法)直接计数法(显微计数法)原理当样品的稀释度足够高时，培养基 表面生长的一个菌落，来源于样品 稀释液中的一个活菌，通过统计平 板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌利用特定细菌计数板或血细胞计数 板，在显

14、微镜下计算一定容积的样 品中微生物的数量公式每克样品中的菌落数=(C+V)XMC:某稀释度下平板上生长的平均菌 落数；V:涂布平板时所用的稀释液 的体积(mL);M稀释倍数每毫升原液所含细菌数： 每小格平 均细菌数X400 x104x稀释倍数缺点当两个或多个菌体连在一起时，平 板上观察到的只是一个菌落不能区分细胞死活结果比实际值偏小比头际值偏大2.设置对照和重复比较项目对照重复目的排除非测试因素对实验结果的影响排除偶然因素对实验结果的影响 实例空白对照：确定培养基制作是否合格同一稀释度涂布至少3个平板错混辨折“选择菌落数在30300的平板”的两个提醒用稀释涂布平板法计数微生物时，要求选择菌落数

15、在30300的平板进行计数。解题时易出现以下误解：(1)只得到1个菌落数在30300的平板是错误的。错误的原因是不符合实验的重复原 则，易受到偶然因素的影响。(2)得到3个或3个以上菌落数在30300的平板，也不一定正确，这可能有两种情况：1不同平板间差异较大，如得到3个平板，菌落数分别为230、34、240,虽然菌落数均在“30300”，这也是不正确的，因为“34”与“230”“240”差异太大，应重新实验 找出原因。2不同平板之间差异不大，是符合要求的，用其平均值作为估算的最终结果。可见，并不是只要得到3个“菌落数在30300的平板”即可，而应该是涂布的同一稀 释度的平板均符合“菌落数在3

16、0300的平板”且无较大差异， 说明实验操作合格，才能按8题组突破牛奶是微生物生长的良好培养基。 牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中，混合均匀，如此再重复2次。请回答下列有关问题：巴氏消毒的方法是(2)取最终的牛奶稀释液0.1 mL滴在培养基上进行涂布,(3)图中所示方法为稀释培养法，理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为35个、33个、34个，则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为 _ 个，运用这种方法统

17、计的结果往往较实际值 _(填“偏大”或“偏小”)，原因是 _。(4)从生牛奶取样培养得到的菌落中，混有各种杂菌，从中检测大肠杆菌的方法是在培养基中加入 _ ，菌落具有 _特征的可以认定为大肠杆菌。答案：(1)7075C煮30分钟(或80C煮15分钟)牛奶的营养成分不被破坏(2)B(3)3.4X106偏小个别菌落可能是由2个或多个细菌形成的伊红一美蓝(金属光泽的紫)黑色考点三 微生物的筛选与鉴别学生用书P299要点讲解1.微生物的鉴别方法(1)菌落特征鉴别法：根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的形状、大小、隆 起程度和颜色等特征进行鉴别。(2)指示剂鉴别法：如以尿素为唯一氮源的培养基中加入

18、酚红指示剂，培养某种微生物 后，培养基变红说明该种微生物照计算公式进行计算。,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是 _应选择的涂布工具是下图中的(:D9能够分解尿素。(3)染色鉴别法：如利用刚果红染色法，根据培养基中出现以纤维素分解菌为中心的透明圈来筛选分解纤维素的微生物。2.筛选微生物的三种方法(1)单菌落挑取法：利用平板划线法或稀释涂布平板法接种到固体平板培养基表面，直 接根据微生物菌落的特征利用单菌落挑取的方法获得目的微生物。(2)选择培养法：利用选择培养基对微生物进行选择培养，直接获得目的微生物。(3)鉴定培养法：利用鉴别培养基使目的微生物菌落呈现特有的特征，然后筛选目的微 生物。3

19、.筛选微生物的两个实例比较囂土壤中分解尿素 的细菌的分离分解纤维素的微生物的分离方法利用以尿素为唯一氮源的选择培养 基进行选择培养利用富含纤维素的选择培养基进行 选择培养原理只有分解尿素的细菌能够合成脲 酶，才能在以尿素为唯一氮源的培 养基上牛长因为培养基中含有丰富的纤维素，因此能够分解纤维素的微生物具有 更多的生存机会而大量繁殖鉴别在培养基中加入酚红指示剂，指示 剂变红说明菌洛中的菌体为分解尿 素的细菌刚果红染色法，周围出现透明圈的 菌落为分解纤维素的微生物的菌落题组突破(2016陕西长安一中等五校一模)研究者初步筛选到能合成纤维素酶的菌株MC-1,回答以下问题：(1)为了获得能合成纤维素酶

20、的单菌落，可采用 _ 法将初筛菌液接种在以纤维素为唯一碳源的固体培养基上，这种培养基属于 _培养基。(2)下列关于制备固体培养基的叙述，错误的是 _ 。A.制备固体培养基时可以加入琼脂B.操作的顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C.待培养基冷却至50C左右时进行倒平板D.待平板冷却凝固约510 min后将平板倒过来放置(3)实验过程中如何防止其他微生物的污染？下表的培养液pH均为4.8，若对MC-1中纤维素酶的活力进行测定，则不能选择表中的_ 培养液。(多选)培养液ABCD纤维素25 g/L一25 g/L25 g/L纤维素酶一一1ug/L一NaNO一3 g/L一3 g/L牛肉膏一一3 g/L

21、一10KzHPQ1 g/L1 g/L1 g/L1 g/LKCl0.5 g/L0.5 g/L0.5 g/L0.5 g/LMgSQ1 g/L1 g/L1 g/L1 g/L7fOFeSQ0.01 g/L0.01 g/L0.01 g/L0.01 g/L（5）分离获得了具有较高纤维素酶活性的菌株MC-1,为了在此基础上获得纤维素酶活性更高的菌株，最可行的做法是（6）某同学在培养过程中发现培养基上感染了几种细菌。若在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_指示剂培养几种菌后，指示剂变红就可以鉴定其中含有能够分解尿素的细菌；若在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入 _ 染料，培养后，培养基中出现透明圈，就可以鉴定其中含

22、有纤维素分解菌。答案：（1）涂布平板 选择（2）B （3）培养基灭菌、接种过程中进行无菌操作（4）A、B C （5）人工诱变（紫外线照射等）处理菌株，再进行筛选（6）酚红 刚果红- 稱题细做固本提能_,学生用书P300）1.（2015高考全国卷I）已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂 肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：（1）_显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用 _（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 _

23、为碳源的固体培养基进行培养。（3）_若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用 _ 直接计数；若要测定其活菌数量，可选用 _法进行计数。为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35C、40C、45C温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg,则上述三个温度中，_ C条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 _C设 计后续实验。解析：（1）油脂可被苏丹川染液染成橘黄色，被苏丹W染液染成红色，因此油脂通常用 苏丹川或苏丹W染色。 不易挥发的物质大多采用萃取法进行提取，水蒸气蒸馏法一般用来提取易挥发的物质。（2）能产生脂肪酶的微生物

24、B能利用脂肪（油脂）作为碳源，所以在制备选择微生物B的培养基时，应将油脂作为唯一的碳源。（3）用显微镜直接对微生物进行计数，需要用血细胞计数板。如果对活菌进行计数，则要用稀释涂布平板法涂布平板，培养后统计菌落数目，然后计算出活菌数量。（4）降解等量的油脂，需要的酶量越多，说明此温度下的酶的活力越小。所以三种温度中45C下酶的活力最小。从三种温度下的实验结果可知，40C下酶的活力最大，所以要想测定该酶的最适温度，应围绕该温度设计不同温度梯度，进行后11续实验。答案：（1）苏丹川（或苏丹W）萃取法（2）油脂（3）血细胞计数板稀释涂布平板（4）45 402.（2015高考江苏卷，31,8分）人工瘤胃

25、模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵 处理秸秆，提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果，研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产 菌株，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题：12（1）在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是 _（填序号）。酒精灯培养皿显微镜无菌水在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是O（3）向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是_（4）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（见下图）。图中降解圈大小与纤维素酶

26、的_ 有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是（填图中序号（5）研究人 员 用筛 选 到的 纤 维素 酶 高产 菌 株测 得 发酵 液 中酶 活 性的 结 果见下图，推 测 菌株J1和J4，在不同温度和pH条件下进行发酵,_ 更适合用于人工瘤胃发酵，理由是51525354555657550403020105040302010J三Ed-,严垫龙诞磔誥丸13解析：（1）在样品稀释和涂布平板过程中，需要在酒精灯火焰附近进行操作，培养皿用于盛放培养基并培养细菌，无菌水做稀释的溶剂，此处唯一用不到的是显微镜。（2）在涂布14平板时，要取少量菌悬液滴加到培养基表面，因为如果滴加菌悬液过多，菌悬液就会堆积在培养

27、基表面影响分离效果。（3）在向试管内分装含琼脂的培养基时，如果试管口粘附有培养 基，就很容易使棉塞受到污染，因此，需要用无菌的酒精棉球将试管口擦拭干净。（4）因为刚果红可以与纤维素形成红色复合物，且不与纤维素降解产物反应。所以在刚果红培养基平板上，菌落周围有透明降解圈是纤维素被降解的结果，降解圈大小由纤维素酶的活性和量决定。图中菌落周围的降解圈最大，因此其降解纤维素的能力最强。（5）考虑到人工瘤胃的发酵过程会使发酵液酸性增加，温度升高，在这个前提下观察在不同温度和pH条件下测得的发酵液中酶活性的结果图，从图中可以看出，在高温和低pH条件下都是J4菌株中的纤维素酶的活性较高，因而该菌株更适合用于

28、人工瘤胃发酵。答案：（1）（2）培养基表面的菌悬液会出现积液， 导致菌体堆积，影响分离效果（3）避免培养基污染棉塞（4）量与活性 （5）J4发酵过程会产热和产酸，J4菌株在较高 温度和酸性环境下酶的活性更高3. （2014高考四川卷，10,11分）有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环 境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。.m（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是（2）_与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和 _ ,这些植物激素一般需要事

29、先单独配制成 _ 保存备用。（3）_纯化菌株时，通常使用的划线工具是 。 划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌， 第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有O（4）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。 该实验的假设是_ ?该 实 验 设 计 是 否 合 理？ 为 什 么？解析：（1）微生物生长繁殖需要的主要营养物质包括碳源、氮源、水和无机盐四类。根 据题意可知，土壤中某些微生物有降解苯磺隆的能力，该实验的目的是探索其降解机制，因四类，该实验图甲选择培养划登纯叱图乙测定苯磺隆降解率15此，需要

30、分离出有降解苯磺隆能力的土壤中的某些微生物，故选择培养时为了排除其他碳源的干扰，培养基中唯一碳源只能是苯磺隆。（2）与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基需要添加生长素和细胞分裂素，用于调节植物细胞再分化；这些植物激素一般需要事先单独配制成母液保存备用。（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是无菌接种环。划线的平板 培养后，发现第一划线区域的划线上不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，而其他划线上有菌落。造成此现象的原因可能有两个：一是接种环灼烧后未冷却，菌种接触到高温的接种环而死亡；二是划第二划线区域第一条线时未从第一区域末端开始。（4）根据图乙所示实验中的上清液加入蛋白酶溶

31、液推测，实验目的是探究目的菌株是否能分泌降解苯磺隆的蛋白质，实验设计不合理之处是缺少不加蛋白酶溶液、其他条件同图乙的空白对照。1.（2016广西四市第一次联考）如图是某细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。 回答问题：（1）_在（填图中编号）区域出现了单个菌落，产生每个菌落的最初细菌数目是_ 个。据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是 _（用编号表示）。（2）下表是某微生物培养基的成分。编号成分含量编号成分含量粉状硫10 gd(NH4)2SQ0.4 gK?HPO4 gMgSO9.25 gFeSO0.5 gCaCb0.5 gHbO100 mL1若培养从土壤中分离出来的自生固氮菌，该培养

32、基应添加 _ ，去除_2若要鉴别纤维素分解菌，可用_ 法，若要鉴别尿素分解菌， 可在培养液中加入解析：（1）从图中可知，号区域出现了单个菌落；1个菌落由1个细菌繁殖形成；根据菌落数量可判断，划线的顺序依次是TT。 定大气中的2,因而培养基中应添加碳源去掉氮源。 要鉴别尿素分解菌，可在培养液中加入酚红指示剂。答案：（1）1TT（2）碳源2.（2016武汉调研）如表所示为培养某种微生物的培养基配方，请回答有关问题:KHPQNaHPOMgSO葡萄糖尿素蒸馏水答案:（1）氮源和无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖母液（3）接种环接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始 泌降解苯磺隆的蛋白质

33、不合理，缺少空白对照课后曲达标检测爭生用书单號威冊（2）细胞分裂素（4）目的菌株能分（2）自生固氮菌是异养生物，它可固鉴别纤维素分解菌可用刚果红染色法,氮源刚果红染色酚红指示剂167H2O1.4 g2.1 g0.2 g10.0 g1.0 g定容至1 000 mL(1)该培养基只允许分解尿素的细菌生长，这种培养基称为 _培养基。该培养基会抑制其他种类微生物生长，其原因是该培养基 _。(2)若要通过统计培养基中菌落数来估计样品中的细菌数，上述培养基中还需要添加的成分是_，接种时应米用 _ 法，该方法接种培养后的菌落，不可能是下图中的_ 。(3)从土壤中分离出分解尿素的细菌后，要对其做进一步的鉴定，

34、可在上述培养基中加入_ 指示剂，培养该菌后，如果指示剂变 _，可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。(4)某同学用0.1 mL稀释液在稀释倍数为106的平板中测得菌落数的平均值为163,则每mL样品中的细菌数是_。答案：(1)选择以尿素为唯一的氮源(2)琼脂稀释涂布平板D (3)酚红 红(4)1.63X1093.(2016河北邯郸一模)某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。请分析回答下列问题：(1)培养基中加入化合物A的目的是 _ ，这种培养基属于 _ 培

35、养基。(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的 _ 。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是 _ 。(3)在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是 _ 。(4)转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是_ ，操作时采用的灭菌方法是 _。(5)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是(6)某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用104、105、106稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿，从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是 _，此对照实验的目的是 _ 。解析：(1)该实验的目的是筛选“

36、目的菌”，故培养基中添加的化合物A起选择作用。(2)微生物正常生长需要碳源、氮源、无机盐等，由培养基中添加的物质种类知：化合物A应该给微生物生长提供碳源、氮源。培养过程需振荡，说明目的菌是需氧型微生物。(6)统计污水池中的“目的菌”时应设置空白对照，以用于检验培养基是否灭菌严格。CD选更鹽ST掘蒔堆养若-FX-后.测定 污祀样腊评殖中化合物人的含业虫芟多次世至我鮒冃的歯17答案：(1)筛选目的菌 选择(2)化合物A异养需氧型(3)防止外来杂菌污染(4)接种环灼烧（5）防止造成环境污染（6）不接种的空白培养基检验培养基灭菌是否合格4.（2016山东潍坊一模）地球上植物产生的纤维素中有40%-60%被土壤中的某些微生物利用，从土壤中分离并研究这些微生物有利于人们更有效地利用植物秸秆中的纤维素。请回答：（1）_分离纤维素分解菌，宜从的土壤中取样。纤维素分解菌之所以能够利用纤维素，是因为其细胞内