黄曲霉M1检测方案2

1、黄曲霉毒素M1检测方案方案一、免疫亲和层析净化高效液相色谱法（GB 5413.37-2010第二法）一、原理：亲和柱内含有的黄曲霉毒素M1特异性单克隆抗体交联在固体支持物上，当试样通过亲和柱时，抗体选择性的与黄曲霉毒素M1(抗原)键合，形成抗体抗原复合体。用水洗柱除去柱内杂质，然后用洗脱剂洗脱吸附在柱上的黄曲霉毒素M1，收集洗脱液。用带有荧光检测器的高效液相色谱仪测定洗脱液中黄曲霉毒素M1含量。二、所需仪器 1、高效液相色谱仪（配荧光检测器具有365 nm激发波长、435 nm发射波长，在适当的色谱条件下能够测定0.02 ng的黄曲霉毒素M1(相当于5倍噪音)） 2、离心机（转容50ml角转子

2、，转速10000r/min） 3、氮吹仪 4、固相萃取装置（带真空系统） 5、水浴锅（温控30±2，50±2；温范2560） 6、天平：感量为0.01 g 7、PH计：精度0.01 8、旋转蒸发仪（奶油样品制备） 9、紫外分光光度计（标液浓度的校正，波长范围为200nm400nm）三、试剂及耗材1、黄曲霉毒素M1免疫亲和柱2、黄曲霉毒素M1标准品3、反相色谱柱 C18 4.6*250 加有反相色谱材料的保护柱5、移液管：1ml, 2ml, 50ml6、烧 杯：50ml, 250ml7、分液漏斗：250ml（干酪和奶油样品制备）8、容量瓶：100ml9、一次性注射器：10ml

3、, 50ml10、针式过滤器（水系）0.22um，1311、乙腈(CH3CN)：色谱醇12、甲醇：分析醇13、三氯甲烷：分析醇14、石油醚：分析醇15、带刻度的磨口锥形玻璃试管：5 mL、10 mL、20 mL16、离心管：50ml四、操作方法依据GB 5413.37-2010第二法五、供应产品明细品名规格报价品牌备注高效液相色谱仪荧光检测器黄曲霉毒素M1免疫亲和柱25支/盒5130.00德国R-Biopharm可供选择25支/盒3900.00agela离心机天平方案二、酶联免疫吸附法（可定性、定量检测牛乳及其他乳制品等样本中的黄曲霉毒素M1）一、原理标准溶液和样品试液加入各自板孔，游离的黄曲

4、霉毒素M1与微孔中包被的黄曲霉毒素M1抗体结合，没有结合的物质在洗涤中被清除。再加入黄曲霉毒素M1酶标记物，将没有结合的抗体位点全部覆盖，结合的酶标记物通过显色液显示出来。最后加入终止液，用酶标仪在450nm测定吸光度值，吸光度值与样品中的黄曲霉毒素M1含量成反比。二、所需仪器和耗材1、微孔板酶标仪450nm/630nm 2、冷冻离心机（转容10ml角转子和50ml角转子，转速不低与3500转/ min） 3、天平：感量为0.01 g 4、微量移液器：单道20ml200ml、200ml1000ml、多道250ml 5、振荡器 6、刻度移液管：25ml 7、洗耳球8、三角瓶：100ml9、聚苯乙

5、烯离心管：10ml/50ml10、去离子水三、操作方法详情见黄曲霉毒素M1酶联免疫试剂盒说明书四、供应产品明细品名规格报价品牌备注微孔板酶标仪35000.00德国R-Biopharm黄曲霉毒素M1酶联免疫试剂盒96孔4950.00德国R-Biopharm可供选择96孔3000.00博纳艾杰尔48孔1800.00博纳艾杰尔微量移液器20ml200ml1650.00美国 Thermo微量移液器吸头20ml200ml 1000支/包40.00国产Thermo配套价格：150.00,可选择微量移液器吸头盒20ml200ml15.00国产微量移液器200ml1000ml600.00美国 Thermo微量

6、移液器吸头200ml1000ml500支/包40.00国产Thermo配套价格：150.00,可选择微量移液器吸头盒200ml1000ml15.00国产微量移液器多道250ml2600.00美国 Thermo8道微量移液器吸头多道250ml 1000支/包40.00国产微量移液器吸头盒多道250ml15.00国产方案三、双流向酶联免疫法（GB 5413.37-2010第四法）一、原理利用酶联免疫竞争原理，样品中残留的黄曲霉毒素M1与定量特异性酶标抗体反应，多余的游离酶标抗体则与酶标板内的包被抗原结合，通过流动洗涤，加入酶显色底物显色后，与标准点比较定性。二、所需仪器和耗材1、黄曲霉毒素M1双流向酶联免疫试剂盒，2 7 保存2、酶联免疫检测加热器，40±5四、操作方法依