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文档简介
1、.专业专注第七章细胞骨架与细胞的运动1.1. 名词解释:细胞骨架、微管组织中心(MTOCMTOC)、Y-微管蛋白环形 复合体(丫-TuRC-TuRC)、中心体、踏车运动、驱动蛋白、动力蛋白。细胞骨架:真核细胞质中的蛋白质纤维网架体系,由 3 3 种不同的 蛋白纤维结构组成 微管、微丝、中间丝。微管组织中心:微管的聚合从特异性核心形成位点开始,主要是中心体、纤毛的基体。帮助微管装配的成核。苹微管蛋白环形复合体:可形成 10101313 个Y微管蛋白分子的环 形结构(螺旋花排列),组成一个开放的环状模板,与围观具有相 同直径。可刺激微管核心形成,包裹微管负端,阻止微管蛋白渗 入。还能影响微管从中心
2、粒上释放。中心体:是动物细胞中决定微管形成的一种细胞器 ,包括中心 粒和中心粒旁物质。两个桶状、垂直排列的中心粒,包埋在中心粒 旁物质中。在细胞间期,中心体位于细胞核附近,在有丝分裂期,位于纺锤体的两极。踏车运动:微管的聚合与解聚持续进行,经常是一端聚合,为 正端;另一端解聚,是负端,这种微管装配方式,称踏车运动”。细胞内各细胞器和所有的物质转运都与微管密切相关;微管的物质运输由微管动力蛋白(或马达蛋白)完成,共有几十种,可分为三大家族:驱动蛋白 kinkin esinesin ,动力蛋白 dyndyn einein 和肌球蛋白 myosimyosin n家族(肌球蛋白以肌动蛋白纤维为运行轨道
3、)驱动蛋白与动力蛋白的两个球状头部是与微管专一结合,具有ATPATP 酶活性,水解 ATPATP 供能完成与微管结合、解离、再结合的动 作。专业专注驱动蛋白:由两条重链和两条轻链组成。一对与微管结合的球 状头部一一 ATPATP 水解酶, 水解 ATPATP 产生能量进行运动; 将货物由负 端运输向正端。动力蛋白:目前已知的最大的、最快的分子运输蛋白。由两条 重链和几种中等链、轻链组成,头部具有 ATPATP 水解酶活性。沿着微 管的正端向负端移动。为物质运输,也为纤毛运动提供动力。在分 裂间期,参与细胞器的定位和转运。2.2.三种骨架蛋白的分布如何?微丝:主要分布在细胞质膜的内侧。微管:主要
4、分布在核周围,并呈放射状向胞质四周扩散。中间纤维:分布在整个细胞中。3.3.微管由哪三种微管蛋白组成?各有什么结构功能特点?a管蛋白,B管蛋白,丫管蛋白。a-a-微管蛋白和3 3- -微管蛋白各有一个 GTPGTP 结合位点。a- -微管蛋白的 GTPGTP 不进行水解也不进行交换;3微管蛋白的 GTPGTP 可水解呈 GDPGDP,而此 GDPGDP 也可换成 GTP,GTP,这一变换对微管的动态性 有重要作用。潸蛋白定位于微管组织中心,对微管的形成、数量、位置、极 性、细胞分裂有重要作用。4.4. 哪一种微管蛋白有 GTPGTP 酶活性?伕微管蛋白。5.5.微管结合蛋白有几种?分布和功能如
5、何?微管结合蛋白(MAPMAP ) : MAPIMAPI、MAP2MAP2、MAP4MAP4 禾 口 tautau。分布:MAP1-2MAP1-2 和 tautau 只存在于脑组织;MAP4MAP4 在哺乳动物非神经 元、神经专业专注元细胞中,在进化上具有保守性。TauTau 只存在于轴突; MAP2MAP2 分布于神经元胞体和树突中。功能:(1 1)使微管相互交联成束,使微管同其他细胞结构交联, 如质膜、微丝和中间丝等;(2 2)与微管成核点的作用,促进微管的 聚合;(3 3)与微管壁的结合,提高微管的稳定性。6.6.为什么说微管具有动态不稳定性?增长的微管末端有微管蛋白-GTP-GTP 帽
6、, 在微管组装期间或组装后 GTPGTP 被水解成 GDPGDP,从而使 GDP-GDP-微管蛋白成为微管的主要部分。微 管蛋白-GTP-GTP 帽及短小的微管原纤维从微管末端脱落则使微管解聚。7.7.微管的装配分为哪三个时期?(1 1 )成核期:a- -闵二聚体,首尾相接和侧面相连,当片状带加 宽到1313 根原纤维,合拢成一段微管;是微管聚合的开始,速度较慢限速过程。(2 2)聚合期:高浓度游离的微管蛋白聚合速度大于解聚速度 ,新 的二聚体不断加到微管正端,微管延长,直至游离微管蛋白浓度降 低。(3 3)稳定期:胞质中游离微管蛋白达到临界浓度,微管的聚合与 解聚速度相等8.8.微管的体外装
7、配需要哪些条件?微管蛋白异二聚体达到一定的临界浓度(约为 1mg/ml1mg/ml ),加入MgMg2+、GTPGTP 和 EDTAEDTA( CaCa2+的螯合剂,去除 C0C0 的抑制聚合作 用)、适当的 pHpH(pH6.9pH6.9)和温度(3737C C)的缓冲液。9.9.微管的体内装配是怎样的?专业专注在细胞内微管形成时,丫-TuRC-TuRC 存在于微管组织中心,成为a- -関 二聚体结合上去的核心,微管从此生长、延长。由于YTURC 像帽子 一样戴在微管的负端而使微管负端稳定。丫-TuRC-TuRC 组织微管形成的能 力受细胞周期的调节。间期此能力被关闭,G G2期到 M M
8、期,受细胞周 期调节激酶作用,磷酸化YTURC 成分,开放微管组织能力。10.10. 温度、压力、紫杉醇、秋水仙素、长春花碱对微管的稳定性如何 影响的?紫杉醇:只结合到聚合的微管上,维持了微管的稳定。秋水仙素:结合并稳定游离的微管蛋白,抑制微管的聚合。长春新碱:能结合微管蛋白异二聚体,抑制它们的结合作用。温度:低温中微管解聚。温度升高时,微管聚合。11.11.微管的功能有哪些?(1) 微管构成细胞内的网状支架,支持和维持细胞形态。微管本 身不能收缩,有一点的强度,抗压力、抗弯曲,为细胞提供机械支 持力。微管对细胞突起部分,如纤毛、鞭毛、轴突形成和维持起重 要作用。(2) 微管参与中心粒、纤毛和
9、鞭毛的形成。中心粒是 9 9 组三联体微管围成的圆筒状结构。纤毛、鞭毛是细胞表面的特化结构,在来 源和结构上基本相同。两者主干部分都是 9 9 组二联管构成,中央是 两条微管一一中央微管。(3 3)微管参与细胞内物质运输。细胞内各细胞器和所有的物质转 运都与微管密切相关;微管的物质运输由微管动力蛋白完成。(4 4)微管维持细胞内细胞器的定位和分布。微管及其相关马达蛋 白在膜性细胞器的定位上起着重要作用。专业专注(5 5)微管参与染色体的运动,调节细胞分裂。微管是有丝分裂器 的主要成分,有丝分裂前期微管聚合,核膜崩解时侵入核区,结合 动粒;姊妹染色单体的动粒分别与来自两极的微管结合 ,被拉到细
10、胞两极。(6 6)微管参与细胞内信号传导。已证明微管参与 hedgehoghedgehog、 JNKJNK、WntWnt、ERKERK PAKPAK 蛋白激酶信号转导通路。信号分子直接或通 过马达蛋白、支架蛋白等与微管作用,调节包括微管的稳定/ /不稳 定、微管方向性、微管组织中心位置、细胞极化等。12.12.哪些结构是 9 9 组三联管、9 9 组二联管结构?每个中心粒由 9 9 组三联管组成。纤毛、鞭毛的主干部分都是 9 9 组二联管构成。13.13.微管马达蛋白主要有哪两个家族?有何共同特点?驱动蛋白、动力蛋白。两者都有两个球状头部,是与微管专一结合,具有 ATPATP 酶活性, 水解A
11、TPATP 供能完成与微管结合、解离、再结合的动作。14.14.驱动蛋白与动力蛋白在微管上的运动方向如何?驱动蛋白:由负端运输向正端。动力蛋白:由正端向负端移动。15.15.微丝又称什么?占肌肉细胞与非肌肉细胞各多少百分比?肌动蛋白丝。占肌肉细胞总蛋白的 1010%,非肌肉细胞的 1 15 5%。16.16.肌动蛋白丝直径多少?是由什么组成的什么样的结构?约 8nm8nm ;由肌动蛋白单体组成双股螺旋纤维。专业专注17.17.肌动蛋白的保守性如何?在不同真核生物间相似性如何?很保守;不同种类的生物间有 9090%的相似性。18.18.什么是微丝的正端、负端?它们又名什么?正端:相对生长快的一端
12、;又称秃端。负端:相对生长慢的一端;又称指向端。19.19.微丝结合蛋白共约多少种?书上介绍了哪些种?各有什么作用?100100 多种。单体隔离蛋白:没有单体隔离蛋白,肌动蛋白都将组装成纤维, 这些蛋白的活性和浓度,决定了肌动蛋白趋向聚合还是解聚。交联蛋白:改变细胞内肌动蛋白纤维的三维结构。末端阻断蛋白:与肌动蛋白纤维的一端或两端结合,调节或维持 肌动蛋白纤维的长度。结合肌动蛋白末端,相当于加上了帽子,抑 制微丝生长,导致胞内出现较多短的微丝。纤维切割蛋白:与肌动蛋白纤维结合并切断它;由于能控制肌动蛋白丝的长度,可大大降低细胞中的黏度。切割产生的新末端可作 为生长点, 促进肌动蛋白装配。 切割
13、蛋白也可作为帽子封住肌动蛋 白纤维的末端。肌动蛋白纤维解聚蛋白:存在于肌动蛋白丝骨架快速变化的部位,结合肌动蛋白丝,并引起肌动蛋白丝的快速解聚。膜结合蛋白:是非肌细胞质膜下方产生收缩的机器 。在剧烈活动 时,由收缩蛋白作用于质膜产生的力引起质膜向内或向外移动。这种运动是由肌动蛋白纤维直接或间接与质膜相结合后所形成的 。20.20. 何种交联蛋白能使微丝成有弹性网络?杆状交联蛋白21.21. 微丝组装的三个阶段是什么?成核期(延迟期):成核作用发生在质膜下,由 ARP2/3ARP2/3 复合物催 化,是微丝组装的限速过程。聚合期(生长期):微丝两端的组装速度有差异,快速增长的一 端是正端,缓慢增
14、长的一端是负端,正端添加单体的速率是负端的 1010 倍以上。平衡期:肌动蛋白聚合微丝的速度与其解离微丝的速度达到平 衡,微丝长度不变,仍进行着聚合、解聚活动。22.22. 为什么说微丝有踏车行为?在微丝装配时,当肌动蛋白分子添加到肌动蛋白丝上的速率正好 等于肌动蛋白分子从肌动蛋白丝上解离的速率时,微丝净长度没改变,这种过程称踏车行为”。.专业专注专业专注23.23. 微丝装配的成核发生在哪里?质膜24.24. 哪些离子、药物因素能影响微丝的组装?MgMg2+存在,微丝聚合;CaCa2+存在,微丝解聚。细胞松弛素 B B:从霉菌中提取,与微丝正端结合,抑制微丝的聚 合。鬼笔环肽:从有毒蘑菇中提
15、取,结合聚合型微丝,稳定微丝抑制 解聚。25.25. 微丝的功能有哪些?(1 1) 微丝构成细胞的支架并维持细胞的形态:微丝在细胞内构成 网络或成束才能发挥作用。 而应力纤维是在细胞膜下方由微丝束构 成的纤维状结构, 常与细胞的长轴平行, 往往一端与细胞膜连接,另一端插入胞质,或与中间丝结合,应力纤维赋予细胞韧性和强 度。(2 2)微丝参与细胞运动:许多动物细胞位置移动时采用变形运 动;这些细胞含有丰富的微丝,通过肌动蛋白和微丝结合蛋白的相 互作用,进行变形运动。(3 3)微丝参与细胞分裂:有丝分裂的核分裂完成后,两个即将形 成的子细胞间,在赤道面膜下,肌动蛋白微丝与肌球蛋白 IIII 组装成
16、 瞬时性收缩束 收缩环,收缩产生动力,将质膜向内拉,完成一 分为二后解体。(4 4)微丝参与肌肉收缩:许多微丝结合蛋白都是在肌细胞中发现;肌细胞由数百个肌原纤维组成;每根肌原纤维由细肌丝和粗肌 丝重叠而形成;肌肉收缩的基本单位是肌小节,由肌原纤维组成。(5 5)微丝参与细胞内物质运输: 微丝也介导一些靠近细胞膜的远 端专业专注物质运输,肌球蛋白 I I 从微丝负端向正端运输货物;肌球蛋白 I I 尾 部同质膜结合,利用其头部,可将微丝从一个部位运向另一个部 位。(6 6)微丝参与细胞内信号传递: 细胞膜表面的受体在收到外界信 号作用时, 可触发膜下肌动蛋白结构变化, 启动细胞内激酶变化的 信号
17、传导。26.26. 参与有丝分裂胞质收缩环形成的是哪种肌球蛋白?肌球蛋白 IIII27.27. 组成肌肉粗肌丝的是哪种肌球蛋白?肌球蛋白 IIII28.28. 微丝马达蛋白是哪种肌球蛋白?运动方向如何?肌球蛋白-1-1 ;沿微丝的负端向正端移动。29.29. 中间纤维的直径?结构?类型?直径:1010nmnm ;结构:中间纤维是丝状蛋白多聚体,是一种坚韧持久的蛋白质纤 维。中间纤维单体(亚基)是蛋白质纤维分子,具有共同的结构 域:一个a- -螺旋的中间去,两侧是球形的 N N 端和 C C 端。所有的亚基 中间螺旋结构域都保守,中间杆状区分为 4 4 个螺旋区,之间被 3 3 个间 隔区隔开,
18、间隔区也是保守的。亚基装配时靠a- -螺旋区配对形成二聚体。N N 端与 C C 端高度可变,不同亚基在 N N、C C 端大小和氨基酸组成 差别很大。中间纤维亚基的大小主要取决于 C C 端的变化。类型:(I I)酸性角蛋白:主要分布在表皮细胞;(IIII)中性/ /碱性角蛋白:主要分布在表皮;(IIIIII) 非上皮细胞的中间纤维蛋白:A A、波形蛋白(成纤维细 胞、白细专业专注胞及其他细胞);B B、结蛋白(肌细胞);C C、外周蛋白(外周神经元;D D、胶质原纤维酸性蛋白(神经胶质细胞)。(IVIV) 神经丝蛋白 (NF-LNF-L、NF-MNF-M、NF-HNF-H):主要分布神经
19、元;(V V)核纤层蛋白(核纤层蛋白 A A、核纤层蛋白 B B、核纤层蛋白C C)(VIVI)巢蛋白:主要分布中央精神系统的干细胞。3030中间纤维的特点(1 1)没有极性,少有游离四聚体,四聚体多组装为中间纤维;(2 2)其装配与稳定、蛋白浓度无关;(3 3)其装配不需要 ATPATP、GTPGTP 或结合蛋白的辅助。3131中间纤维是如何装配的?2 2 个亚基的 a a 螺旋杆状区同向以卷曲螺旋形式相互缠绕 ,形成约 48n48nm m长的绳状二聚体;2 2 个二聚体反向平行交错相连,形成四聚体 亚单位;四聚体侧向组装,形成含 8 8 个平行排列原纤维的结构,以 简单结合反应加到伸长中的
20、中间纤维上 ,结合反应沿中间纤维长轴排列,按螺旋形式包裹在一起32.32. 中间纤维的功能?(1 1 )中间纤维在细胞内形成一个完整的网状骨架系统 :IFIF 与质膜 和细胞外基质相连,内与核纤层相连,整个纤维网架围绕细胞核,穿过胞质终止于质膜;中间纤维有一定可塑性,对维持细胞整体结 构、功能完成有重要作用。(2) 中间纤维为细胞提供机械强度支持。专业专注(3) 中间纤维参与细胞连接:一些器官和皮肤的表皮细胞是通过 桥粒和半桥粒连接在一起,中间纤维参与黏着连接的桥粒、半桥 粒,在细胞中形成一个网络,既能保持细胞形态,又能提供支持 力。(4) 中间纤维参与细胞内信息传递及物质运输:中间纤维外连质 膜、细胞外基质,内穿核骨架,形成跨膜的信息通道;中间纤维在 体外与单链DNADNA 有咼度亲和性,在细胞内明显聚集在核周围,可能 与 DNADNA 复制、转录有关。(5) 中间纤维维持细胞核稳定:细胞核膜下有一层有核纤层蛋白 组成的网络,对于维持细胞和形态有重要作用,核纤层是中间纤维 的
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