柱层析法的原理和方法_第1页
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文档简介

1、柱层析法的原理和方法 一、原理 柱层析是化合物在液相和固相之间的分配，属于固-液吸附层析。 利用固定相对液体相中的各组分吸附能力不同，从而以不同速度向下迁移，形成若干色带，分别收集。二、操作1.装柱 干法1. 管上端放一漏斗2.将硅胶装入3.轻敲管壁使之填装均匀湿法1.将溶剂装入管内，2.将吸附剂和溶剂调成浆状，倒入管中，3.使溶剂流出，吸附剂下沉吸附剂 种类：氧化铝、硅胶，氧化镁、碳酸钙和活性炭等。氧化铝有酸、碱、中性。适用于不同类型化合物的分离。硅胶没有酸碱性之分，可适用于各类有机物的分离。吸附剂的选择a.与被吸附物及展开剂均无化学作用（首要）b.吸附能力的大小（颗粒大小）c.吸附剂的活性

2、（含水量）d.分子极性干法干法湿法湿法适用范围任何化合物溶于小极性溶剂的化合物操作1.将溶剂旋干2.加少量溶剂溶解（样品溶解性好）3.加入硅胶吸附至硅胶 不附着在瓶壁上4.旋干样品溶液用滴管均匀加入优点保证样品层很平整样品紧实，不易产生裂缝缺点硅胶和样品间易产生气泡适用范围窄上样2.3.淋洗 洗脱剂的选择：根据点板的比移值（简称Rf值）。原点到溶剂前沿的距离距离原点到所需要点的中心值 fR洗脱剂极性比较：己烷、石油醚环己烷四氯化碳三氟乙烯二硫化碳甲苯苯二氯甲烷三氯甲烷乙醚乙酸乙酯丙酮丙醇乙醇甲醇水吡啶乙酸4.分类分类分类加压加压常压常压减压减压优点增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间分离效果最好减少硅胶的使用量，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发缺点降低分离效果，减少产品的塔板数分离时间过长，效率过差有些比较易分解的东西可能得不到而且还必须同时使用水泵抽气5.收集 根据样品中各组分的吸附能力判断流出的各组分 若为有色物质，观看色带，若

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