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文档简介
1、1、细胞生物学:应用现代物理学、化学和生物学的方法与技术,以细胞作为研究对象,从显微、超微与分子水平不同层次上,研究细胞的结构、功能及其相互关系,以动态的观点探索细胞的基本生命活动规律的科学。2、形态研究:显微结构、超微结构、分子结构三水平有机结合。细胞各部分的代谢规律、结构与功能的相关性(例:人的血红细胞)、整体与动态的思想模式。3、显微结构:在0.2um分辨率的光镜下能够观察到的物质结构。例:细胞大小和形态、细胞核、核仁、染色体、高尔基体(高二集体复合体)。(记属于显微结构的例子)4、超微结构:普通光学显微镜分辨率(0.2um)下无法观察到,只有在电镜下才能观察到的精细结构。例:核糖体、溶
2、酶体(点)、染色体纤维、细胞骨架、(线)内质网、质膜、核膜(面)。(记属于超微结构的例子)5、人的血红细胞:无细胞核、圆饼状、细胞骨架强大、穿梭于人的毛细血管壁。6、药学细胞生物学:药学细胞生物学是研究与药学相关的细胞生物学理论和应用新模式的一门交叉学科,它采用先到细胞生物学的理论、技术和方法,应用于新药开发、药物质量监督以及药品临床应用等的一门基础与应用的学科。7、细胞的基本共性:细胞膜、核糖体、核酸、一分为二的分列方式(1)所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质构成的生物膜,即细胞膜。(2)所有的细月fi都含有2种核酸,即DNAWRNA乍为遗传信息复制与转录的载体。(3)所有细胞的增
3、值都是以一分为二的方式进行分裂。(以上如果是简答题全答,如果是填空题(1)(2)(3)不答。)8、细胞体积守恒定律:动物器官的大小主要取决于细胞数量,与细胞数量成正比,而与细胞的大小无关。9、原核细胞的基本特点:(1)遗传信息小:遗传信息载体仅由一个环状DNA勾成。(2)细胞内没有分化为以膜为基础的、只有专门结构与功能的膜性细胞器和细胞核膜。10、真核细胞的基本结构体系:(1)以脂质及蛋白质成分为基础的生物膜结构系统。(质膜、内膜系统)。(2)以核酸与蛋白质复合体形成的遗传信息储存和表达系统(染色质、核仁、核糖体)。(3)有特异蛋白质分子装配构成的细胞骨架系统(细胞质骨架、细胞核骨架、细胞膜骨
4、架)11、原核细胞与真核细胞基本特征的比较特征原核细胞真核细胞染色体一个环状DNAfe色体,DNA或很少与蛋白质结合2个以上染色体,线状DNAW蛋白质结合DNA*少多核仁无有核外DNA细菌后裸露的质粒线粒体DNA叶绿体DNA核膜无有质膜有(多功能)有内膜系统无有核糖体70S80S细胞壁氨基糖、壁酸动物无壁,植物为纤维素、果胶细胞骨架无有细胞分裂无丝分裂有丝分裂、减数分裂12、药物作用靶标:药物靶标是指细胞内与药物相互作用,并赋予药物效应的特定分子或结合位点,包括基因位点、受体、酶、离子通道、核酸、糖等生物大分子与复合物。13、药物作用靶标特点:(1)能以适当的化学特性和亲和力结合小分子结合物。
5、(2)与疾病相关,并且通过调节生理活性能有效地改善疾病症状,98%;蛋白质,其中一半以上为G蛋白偶联受体。14、1665年,英国RobertHook第一次描述了植物细胞(死细胞)的构造。15、细胞形态显微观察技术根据光源的差异分类:(1)光学显微镜(光源为可见光)。(2)电子显微镜(光源为电子束)16、分辨率:指相邻两点间最小距离的分辨能力。这个最小距离又称分辨距离,分辨距离越小,分辨率越高。公式:D0.6N?sin217、影响分辨率的因素:(1)介质折射率N:空气-1.0,水-1.33,香柏油-1.52(2)光源波长入:分辨率与所用波长成反比18、光镜的分辨范围:AAmmAAmm光镜最大分辨
6、率:0.2um(入=450nmN=1.5,a=140°)19、荧光显微镜原理:用蓝紫光为光源,激发标本内的荧光物质发出荧光,在光镜水平观察荧光的颜色、形状和位置,以探测特殊分子的技术。20、荧光显微镜应用:(特异性蛋白等)生物大分子的定性与定位(如梅毒螺旋体的检测)21、暗视野显微镜的应用:观察活细胞内的细胞核、线粒体、液体介质中的细菌和霉菌等022、相差显微镜的应用:观察活细胞,甚至研究细胞核、线粒体等细胞器的标志。23、微分子干涉显微镜DIC;图像具有立体感。一一应用:研究活细胞中的颗粒和细胞器的运动。DIC显微镜适合于现为操作。(目前基因注入,核移植,转基因在DIC下进行。)2
7、4、电子生物样品的特殊要求:要求样品很薄;要更好地保持样品的精细结构。25、电子生物样品的制样流程:固定一脱水一包埋一切片一染色一观察26、电子生物样品制样技术中的超薄切片技术:切片厚度4050nm样品要有刚性和韧性。27、电子生物样品制样技术中的负染色技术的应用:某些电子束可直接穿透的结构,如线粒体基粒、核糖体、蛋白质及其组成的纤维、病毒等。28、透射电子显微镜人眼光镜电镜分辨率0.2mm0.2um0.2nm启效放大倍数10310629、透射电子显微镜的实际分辨率:为5nm因受生物样品制样技术的限制,是超薄切片厚度的1/10。30、透射电镜与光镜的比较分辨本领光源透镜真空成像原理光镜200n
8、m可见光(400700)紫外光(约200)玻璃透镜/、要求利用样品对光的吸收形成明暗反差和颜色变化透射电镜0.2nm电子束(0.010.9)电磁透镜要求利用样品对电子的散射和透射形成明暗反差31、扫描电子显微镜的应用:观察生物表面的微小结构。如核孔复合体32、扫描隧道显微镜STMffi途:在原子水平上揭示样本表面的。纳米生物学研究领域中的重要工具。33、免疫细胞生物学:根据免疫细胞学原理,利用抗体同特定抗原专一性结合,而对细胞内的抗原分子进行形态定位的一种技术。(找抗原)34、免疫荧光技术:用于观察特异蛋白抗原在细胞内的分布。35、放射自显微技术(一团小黑点)主要步骤:标记物掺入细胞细胞内同位
9、素所在位置的显示(放射自显影)36、放射自显微技术(一团小黑点)应用:研究生物体细胞内分子水平的动态过程。37、原位杂交技术应用:细胞内特异核酸(DNAtRNA序列的定位。38、细胞组分的分级分离常用方法:差速离心:(应用)初级分离、分离密度不同的细胞组分。密度梯度离心(带状分离法):(应用)精细细胞或生物大分子的分离。(通常两种方法综合使用)。39、细胞组分的显微分析中Feulgamreaction(摩尔根反应):可显示DNA勺分布和含量。40、流式细胞术:是一种应用流式细胞仪对悬浮于液体中的细胞或其它生物颗粒逐个进行快速定量分析与分选的技术。41、细胞培养:在无菌条件下,从活体内取出组织或
10、细胞,在体外模拟体内的生理环境,使细胞继续存活和生长繁殖的技术。42、动物细胞培养的分类:根据细胞来源:原代细胞、原代培养细胞、传代培养细胞。根据细胞传代状态:细胞株、细胞系。根据细胞培养方式:贴壁型细胞、悬浮型细胞。43、原代细胞:从机体取出后立即进行培养的细胞。44、原代培养细胞:培养的第一代和传代十代内的细胞。45、原代培养细胞的特点:细胞活跃移动,可分裂,相互依存性强,与体内细胞形状相似,是进行体外药物实验的良好对象。46、传代培养细胞:适宜体外条件下继续传代培养的细胞。47、传代培养细胞的特点:是原代培养细胞继续扩大培养的细胞,在培养条件下良好的情况下,增值旺盛,保持二倍体核型。当传
11、到40-50代后,细胞增殖缓慢或停止,只有突变细胞才能继续传代。48、细胞株:从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群,能够繁殖50代左右,在培养过程中其特征始终保持。49、细胞株的特点:可顺利传4050代,保持二倍体数,有接触抑制。50、细胞系:从月中瘤组织培养建立的细胞群或培养过程中发生突变或转化的细胞,在培养条件下可无线繁殖。51、细胞系的特点:染色体数目明显改变,失去接触抑制的特点,可无限传代培养。52、贴壁型细胞:必须贴附在支持物上才能生长繁殖的细胞。53、贴壁型细胞的特点:贴壁后的细胞形成单层细胞层,形态呈多种类型。如上皮型细胞、Hela细胞、CHCffl胞、成纤维细胞
12、等。大多数细胞为贴壁型细胞。54、悬浮型细胞:在培养液中悬浮生长的细胞。55、悬浮型细胞的特点:不贴附于支持物,悬浮生长,胞体常呈饱满的圆球状。如血液细胞、淋巴细胞、一些癌细胞(月中瘤细胞)等。56、细胞融合:用自然或人工诱导的方法使两个或两个以上的细胞融合为一个双核或多核细胞的过程。57、生物膜:细胞内摸与细胞膜的统称。58、细胞膜:又称质膜,是指包围在细胞最外层、由蛋白质和脂质组成的生物膜。59、生物膜的化学组成:膜质一占细胞50%是生物膜基本组成成分;膜蛋白;膜糖类。60、生物膜的应用:脂质体。61、脂质体的定义:根据磷脂分子可在水相中形成稳定的脂双层膜的趋势而制备的人工膜。62、脂质体
13、的应用:研究膜质的膜蛋白生物学性质的实验材料。脂质体中裹入DNAM用于基因转移。在临床治疗中,脂质体作为药物或酶等载体。63、生物膜的基本特征(流动性和不对称性):(一)、细胞膜的流动性:细胞进行生命活动的必要条件。一(1)膜质的流动性:基本运动方式一侧向运动;形式一自旋运动、尾部摆动、翻转运动、侧向运动。(2)膜蛋白的流动性:证明实验:荧光抗体免疫标记技术(细胞融合);冰冻蚀刻电镜照片。运动特点:自发热运动,以旋转运动和侧向移动为主,速度慢,往往局限于某一特定区域。主要影响因素:受膜下细胞骨架的限制;与脂分子的相互作用。(二)影响细胞膜流动性的因素:胆固醇起重要的双向调节作用。磷脂脂肪酸链越
14、短,流动性越强,不饱和程度越高,使尾部难以排列整齐,流动性越强。温度在膜脂的想变温度以上,维持膜脂的流动性。膜蛋白与膜脂的相互作用。卵磷脂和鞘磷脂比值的影响。(三)细胞膜的不对称性:(定义)细胞膜内外两层在分布和功能上有很大差异。膜脂的不对称性:同一种膜脂分子在膜的脂双层中呈不均匀分布。膜蛋白的不对称性:指每种膜蛋白分子在细胞膜上都具有明确方向性,是生物膜完成在时间与空间上有序的各种复杂生理功能的保证。膜糖类的不对称性:糖脂和糖蛋白的糖残基均分布在质膜的外表面。64、细胞膜的基本功能:细胞屏障与渗透作用;参与转运过程;细胞识别;细胞连接;组织和定位;细胞表面特化结构等(鞭毛、伪足)65、协同运
15、输定义:是一种物质以被动运输的方式产生的势能推动另一种物质进行主动运输的过程。66、小分子物质和离子协同运输的原理:一类由Ns+Ka+泵(或H*泵)与载体蛋白协同作用,靠间接消除ATP完成的主动运输方式。物质跨膜运输所需要的直接动力来自膜两侧离子电化学浓度梯度,而维持离子梯度通过NSKa泵(或H一泵)消除ATP实现。67、受体介导的胞吞作用:指大多数动物细胞通过网格蛋白有被小泡从膜外液高效地摄取特定大分子的方式。68、受体介导的胞吞作用的生理学意义:它是细胞的一种选择性浓缩机制,与非特异性胞吞作用相比,可使特定大分子的内化率增加1000多倍。69、细胞连接:多细胞有机体中相邻细胞之间通过细胞质
16、膜相互联系,协同作用的重要组织方式。70、细胞连接的三种方式:封闭连接;锚定连接;通讯连接。71、内膜系统:真核细胞特有的,在结构、功能和发生上相互关联的模型细胞器或膜性结构。72、内膜系统包括:核膜、内质网、高尔基体、溶酶体、分泌泡、液泡、过氧化酶体(无线粒体)73、内质网:由封闭的膜系统及其围成的腔形成的互相沟通的网状结构,是胞内除核酸外一系列重要生物大分子的合成基地。74、葡萄糖一6一磷酸酶是内质网(ER的标志酶。75、细胞色素P450是同工酶系。在滑面内质网(SER膜上最为丰富,在肝中具有解毒作用。76、ER的种类:髓面内质网(rER):颗粒内质网,多呈扁囊状,排列教整齐,与核糖体共同
17、形成复合机能结构;滑面内质网(SER:无颗粒内质网,分支管状,形成较为复杂的立体网状结构。77、SERffirER是一个连续的整体结构。78、微粒体:在细胞匀浆和超速离心过程中,由破碎的内质网形成的近球形囊泡结构,含内质网膜和核糖体两种基本成分。79、ER的功能:(一)rER的功能:蛋白质的合成、修饰、加工。一一1、蛋白质的合成:核糖体的附着和游离由mRN秋定。2、蛋白糖基化和加工:蛋白糖基化:指单糖或寡糖与蛋白共价结合形成糖蛋白的过程。方式:N一连接的糖蛋白(主要发生在rER中)。3、新生肽链折叠和组装。4、蛋白质的分选与运输。(二)sER的功能:1、解毒作用。2、脂质的合成。3、糖原的代谢
18、:在肝细胞中分解糖原变成G4、肌肉收缩80、生物大分子的合成基地一一ER(与众不同的特点)81、分子伴侣(BiP):是一类相互之间没有联系的蛋白。其功能是帮助含多肽结构的其他物质在体内进行正确的非共价键的组装,但它们自身并不是组装结构发挥正常生物功能的组成部分。82、rER合成蛋白质的主要种类:分泌蛋白一一酶、抗体、肽类激素和细胞外基质等;膜蛋白ERGGly的膜以及质膜等的膜内在蛋白;间隔区域化蛋白如溶酶体中的酸性水解酶、分泌到胞外的水解酶类等;需要复杂修饰与加工的蛋白质。83、信号肽假说中几个重要的功能组件:信号肽一一决定因子;辅助因子一一信号识别颗粒(SRP;信号识别颗粒受体(SRPR;跨
19、膜通道:易位子。84、信号肽:位于蛋白质N端,一般由1530个氨基酸残基组成的一段肽链,由mRNAt信号序列翻译出来。85、信号肽的作用:指导蛋白到ER膜上合成。86、SRP一种细长形的RNA®白,由6条多肽链和一个小的RNA子组成。即可与新生肽信号序列、核糖体结合,又可与SRF5体结合(停泊蛋白),是一种媒介分子。87、SRPRrER膜上的跨膜蛋白。其作用:将SR-信号肽一新生肽链一核糖体一结合到ER膜上。88、易位子:转位因子。其作用:使新生的肽链通过ER膜进入到ER腔中。89、高尔基复合体(GG具有方向性:顺面:凸面,形成面,未成熟面(靠近细胞核的面);反面:凹面,成熟面,分泌
20、面(面向细胞膜的面)。90、GG的精细结构功能:顺面膜囊:(顺面高尔基网)具有蛋白质分选站的作用,接受来自ER新合成的物质并将其分类,大部分转入中间膜囊,小部分蛋白质再运回ER中间膜囊:多数糖基修饰、糖脂的形成,与高尔基体有关的多糖合成。反面膜囊:(反面高尔基网)由小泡和分枝的小管组成,主要参与蛋白质的分类、包装、输出。周围囊泡:顺面囊泡一一ER与GG间的物质运输;GG周围囊泡:膜囊间的物质运输;反面较大囊泡:分泌泡与分泌颗粒。91、GC是一种极性细胞器(与众不同的特点)。92、从顺面到反面,GC在组成和功能上的差别:位置和方面:在细胞中位置比较恒定,顺面朝向细胞核,反面朝向细胞膜。组成:膜厚
21、度一一顺面向反面过度,膜逐渐加厚;化学组成一一每层膜囊各不相同。功能:物质从GC一侧进入,另一侧输出,对来自ER蛋白进行有序的加工、分类。93、GC的功能:细胞内大分子加工、分选和运输的一个主要交通枢纽一一蛋白质的分选和运输。蛋白质的修饰与加工。参与细胞的分泌活动(膜泡运输)参与溶酶体的形成。参与膜的转化和更新。94、溶酶体(Ly):由单层膜包绕,内含多种酸性水解酶类的囊泡状细胞器,其主要功能是进行细胞内的消化作用。95、溶酶体的结构特征:1、异质性:(1)形态一一大小不一。当溶酶体未与底物结合时,常呈圆形或卵圆形,体积较小;当溶酶体与底物结合时,其形态多样,体积较大。(2)水解酶的种类:一种
22、溶酶体不含所有的水解酶。不同类型的细胞、酶的种类和比例不同。(3)生理功能:初级溶酶体:提供水解酶。次级溶酶体:进行底物消化。残余体:外排或滞留消化残渣。96、溶酶体的分类:根据生理功能不同:初级溶酶体、次级溶酶体、残余体。根据底物来源不同对次级溶酶体:异噬溶酶体、自噬溶酶体。97、溶酶体酶的特点:已发现60多种酸性水解酶,可水解各类底物。最适PH为5左右,酶发挥活性的PH为36。酸性磷酸酶是溶酶体的标志酶。98、溶酶体膜的特点:嵌有质子泵,形成和维持酸性内环境。膜蛋白高度糖基化,防止自身膜蛋白降解。具有多种载体蛋白,用于水解产物向外转运。99、溶酶体的功能:清洁作用;防御作用;消化营养作用:
23、异噬和自噬;自溶作用;参与激素合成与分泌的调节作用;受精作用。100、溶酶体的发生:rER合成溶酶体酶,出芽运输小泡:携带溶酶体酶在GC顺面膜囊磷酸化:形成带有M6PW殊标记的溶酶体酶特殊的运输小泡在TGN,出芽酸性解耦联小泡/通过M6P受体与溶酶体酶的M6P结合;酶与受体分离初级溶酶体含受体的小泡101、线粒体(Mt):一种由双层封闭膜包围、含多种酶类的半自主性细胞器、真核细胞内生物氧化和能量转换的主要场所,通过氧化磷酸化合成ATP为细胞生命活动提供能量。102、Mt的内膜:膜厚68nm通透性很低,仅允许不带电荷、0.15KDa的分子通过,H、ATP丙酮酸不鞫自由通过,必须在特殊载体帮助跨膜
24、运输。103、Mt的内膜含有与能量转换相关的蛋白(执行氧化反应的电子传递链:ATP合成酶、线粒体内膜转运蛋白。)104、Mt的膜间隙:含许多可溶性酶、底物和辅助因子。105、Mt的基粒(ATP合成酶):内膜和崎上许多规律排列的带柄球状小体。具包括:头部(Fi):5种亚基组成,B亚基具有催化ATP合成的活性。柄部。基部(Fo):含H离子通道。106、Mt的化学组成中脂类:脂类和蛋白质比值一一内膜:0.3:1;外膜:1:1107、Mt主要酶分布与定位:基质:三竣酸循环系,脂肪酸氧化酶系,蛋白质及核酸合成酶系。内膜:呼吸链酶系,ATP合成酶系。108、Mt的功能:氧化偶联磷酸化产生ATR真核细胞内生
25、物氧化和能量转换的主要场所。(1)真核细胞中的氧化作用:糖酵解一三竣酸循环一氧化磷酸化一ATR(2)氧化磷酸化的结构基础:电子传递链:4种复合物,组成2种呼吸链。ATP合成酶:磷酸化的分子基础。氧化磷酸化的关系:本质一一电子转移;氧化一一(电子传递,耗能)基部;磷酸化:(ADP+PAATP,储能)头部。三者同时进行,密切偶联,两个结构体系完成。(3)氧化磷酸化的偶联机制一一化学渗透假说:ATP)合成过程一一线粒体内膜中的呼吸链可看成质子泵,在电子经呼吸链传给氧的过程中,把基质中的H+泵到膜间隙。由于内膜对H不能自由通过,造成H浓度的跨膜梯度,推动H+通过ATP合成酶装置进入基质,每进入2个H可
26、以驱动合成一个ATP分子109、(看完108后,记住)电化学梯度中蕴藏的能量储存到ATP高能磷酸键。110、Mt的半自主性:半自主性细胞器:线粒体的自我繁殖及一系列功能活动受核基因组和其自身基因组两套遗传系统的控制。mtDNAS蛋白质:两套遗传系统的关系一一细胞核的功能更重要,提供绝大部分遗传信息,具有关键的控制功能。111、DNA勺特点:双链环形DNA裸露,复制仅受核控制。所含信息少,37个基因。112、细胞核:真核细胞内最大、最重要的细胞器,是细胞遗传与代谢的调控信息中心。113、间期细胞核的基本组成:核被膜;染色质;核仁;核基质。114、核孔复合体最主要的功能:核质交换的双向性亲水通道。
27、115、核被膜的主要功能:构成核、质之间的天然选择性屏障,即区域化。控制核质之间的物质交换与信息交流。合成生物大分子。116、常染色质:指间期核内染色质纤维折叠压缩程度低,处于伸展状态,常位于核中央,用碱性染料染色时着色浅的那些染色质。其上有能够转录的基因。117、异染色质:指间期细胞核中,染色质纤维折叠压缩程度高,处于聚缩状态组蛋白、,碱性染料染色时着色较深,常位于核膜边缘,很少转录的染色质。118、染色质:问期细胞核内由DNAH蛋白、非组蛋白及少量RNA组成的线性复合结构,是间期细胞遗传物质存在的形式。119、染色体:细胞在有丝分裂或减数分裂过程中,由染色质聚缩成的棒状结构。120、染色质
28、和染色体的关系:细胞周期不同功能阶段可以相互转变的形态结构。具有基本相同的化学组成、包装程度不同。121、基因组:一个生物贮存在单倍染色体组中的总遗传信息,称为该生物的基因组。122、染色质蛋白的功能:负责DN的子遗传信息的组织、复制和转录。123、组蛋白的特征:真核生物染色体的基本结构蛋白,属碱性蛋白质,可与酸性DNAIE特异性紧密结合,无种属及组织特异性,在进化上十分保守,共5种。124、核小体组成:200bp左右DNA©螺旋,一个组蛋白八聚体,一分子H,未经处理的染色质自然结构为30nm的纤丝,经盐处理后解聚的染色体为10nm的用珠结构。125、核小体结构要点:146bp的DN吩子超螺旋盘
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