金银花叶茶制作工艺及功能性成分含量研究

1、金银花叶制作绿茶工艺及主要功能性成分含量研究摘要：金银花叶片有着与金银花同样的功效，以封丘金银花叶片为原料，按绿茶制作工艺，探讨金银花叶制作绿茶方法；温度作为影响绿茶品质的重要因素，设计不同温度条件下制作的金银花绿茶，用紫外-可见分光光度法和高效液相色谱法分别测定金银花叶及绿茶的总黄酮和绿原酸含量，结果表明：金银花叶制作绿茶后总黄酮和绿原酸含量相当可观；结合金银花叶绿茶的感官评价，建立金银花叶绿茶制作工艺及理论数据；综合开发利用金银花，提高其经济价值。关键词：金银花叶绿茶工艺绿原酸黄酮金银花（学名：Lonicerajaponica）为忍冬科植物，具有清热解毒1-2、抗菌消炎之功效，是最常用的中

2、药之一。金银花和叶都含绿原酸、黄酮类等有效成分，具有较为广泛的抗菌消炎作用，金银花叶中绿原酸含量稍低于花的含量，但叶中的总黄酮含量高于花的含量，表明金银花叶片跟花有着同样的功效3。文献报道，金银花叶粗提取物的抑菌效果与花粗提取物相同或高于花4。近年来，金银花价格低迷，金银花产量低，不易采摘，费时费力，且无法机械化生产，农民种金银花积极性下降，甚至有些农民开始毁掉自己亲手种的金银花。因此综合开发利用金银花，提高其经济价值，增加农民收入成为当务之急。经过多次去金银花基地考察，发现金银花叶产量大，资源非常丰富，金银花每年需要3-4整形修剪，产生了大量的废弃叶片；通过制茶工艺，制作出金银花叶为原料的绿

3、茶，测其制茶后的功能性成分含量，结合外观，颜色，口感等感官评价，找到最佳金银花叶片制茶工艺，提高叶片利用率，增加农民经济收入，提高种植金银花的积极性。提高其经济价值，获得社会效益。材料与方法1.1 材料与处理2015年9月20日在新乡市封丘县陈固镇金银花种植基地，采集第三次整形修剪后的金银花叶片。鲜叶采集后应及时摊放，厚度5cm左右,每隔2小时翻1次,摊放时间7小时左右，至叶质变软，叶色由绿变暗绿，鲜叶减重率为10溢右时为宜。摊放后，叶质萎软，韧性加大，杀青过程中茶汁不易外溢，又有利于鲜叶中原始香气成分裂解,产生更多的芳香物质，从而提高成茶品质2。1.2 仪器与试剂茶叶滚筒杀青机（浙江上洋机械

4、有限公司）；茶叶揉捻机6CR-35（雷锋茶叶机械厂）；雷锋牌茶叶烘干机（雷锋茶叶机械厂）；紫外可见分光光度计TU-1810;北京普析通用有限公司；安捷伦公司高效液相色谱仪agilent1200;高速万能粉碎机FE-100，北京永光明医疗仪器厂；电子天平FA-2004,上海越平科学仪器有限公司。芦丁标准品（中国药品生物制品检定所）；绿原酸标准品（中国药品生物制品检定所）；亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，无水乙醇都是分析纯；自制高纯水。1.3 金银花叶绿茶制作工艺1.3.1 杀青：通过高温破坏和钝化鲜叶中的氧化酶活性，抑制鲜叶中的一系列酶的氧化，蒸发鲜叶部分水分，使叶片变柔软，保持颜色翠绿，又便于揉捻

5、成型。滚筒杀青机预热三分钟；分别把杀青机调至260C、300C、340c经行杀青，根据叶片变化、颜色确定最佳杀青时间。1.3.2 回潮：杀青后的叶片放入整理箱加盖回潮80min,使杀青后的叶片水分重新均匀分布。使茶叶质软、好成形、折而不碎，保证美观的条索。达到手握成团无脆声，稍有弹性，叶质较柔软，折梗不断。1.3.3 揉捻：利用机械力使杀青叶在揉桶内受到推、压、扭、和摩擦等多种力的相互作用形成紧结的条索。揉捻还使叶片细胞组织破碎，促使部分多酚类物质氧化，减少炒青金银花叶茶的苦涩味，增加浓醇味。将叶片加入揉捻机，揉捻5min加叶片，叶片加满后，揉捻20min加压，揉捻50min。成条率90%U上

6、。1.3.4 摊凉：茶叶揉捻后均匀摊开，促使叶内水分分布均匀，为烘干打下基础。1.3.5 烘干：干燥是绿白最后一道工序，也是决定品质的最后一关，干燥采用烘干机烘干。目的（1）利用高温停止酶促氧化作用;（2）蒸发水分，紧缩茶条，使茶叶充分干燥，防止非酶促氧化，利于品质的相对固定，便于贮藏;（3）散失青臭气，进一步提高和发展茶香。分别用3个温度经行烘干，看品质口感及成分80c烘干-50min7摊凉包装110c烘干-40min7摊凉包装140c烘干-30min7摊凉包装摊叶厚度1cm-2cm,烘干时间不超过60min。叶含水量控制在4%-6%,茶叶折梗即断，手捻茶条成粉末，茶香明显即可。1.4 利用

7、绿原酸、总黄酮含量和感官评价三个指标评价茶叶1.4.1 总黄酮含量测定1.4.1.1 金银花叶溶液的制备：室温阴干的金银花叶片与80C、110C、140c条件下烘干的金银花叶绿茶，分别编号样品1,样品2,样品3,样品4;粉粹成细粉，各精密称定1.00g,分别置25ml塞锥形瓶中，加入60%L醇7液25mL浸712小时,超声处理(60C,功率250W,频率35kHz)1h,放冷，滤过定容到100ml容量瓶中，摇匀，作为金银花供试品溶液。1.4.1.2 紫外-可见分光光度法测定金银花及其叶中总黄酮的含量1.4.1.3对照品溶液的制备：精密称取芦丁对照品0.020g,加无水乙醇置水浴上微热使其溶解，

8、放冷，加无水乙醇至100ml容量瓶中，摇匀配制成0.20mg/ml的对照品溶液备用。1.4.1.4标准曲线的制备：精密量取对照品溶液2.00,4.00,6.00,8.00,10.00mL分别置50mL量瓶中，各加高纯水10.0mL;力口5%亚硝酸钠溶液2.00mL,混匀，放置6min;力口10%肖酸铝溶液2.00mL,摇匀，放置6min;加4图氧化钠试液20mL;再加水至刻度，摇匀，放置15min。空白对照直接加蒸储水10ml,其余试剂同上至刻度。在510nm的波长处测定吸光度，以测定的吸光度(A)为纵坐标，浓度(C)为横坐标，绘制标准曲线，得出回归方程为Y=0.0119x-0.001,R2=

9、0.9999。-0y=0.011x-0.00R2=0.99951015202530354045浓度.5/oO,321OooO吸光度图1黄酮标准曲线和线性关系1.4.2高效液相色谱法测定绿原酸含量1.4.2.1 色谱条件与系统适用性确定：采用乙睛-0.5%乙酸溶液-水（2：1:7）为流动相；检测波长为327nm;色谱柱：美国Agilent公司的ZORBAXSB-C18流速0.8ml/min,进样量10ul;柱温20C。1.4.2.2 对照品溶液的制备：精密称取绿原酸标准品0.005g,加70%甲醇定容于50ml棕色量瓶中，制成每1mL含100Hg的对照品储备液（10C以下保存）。1.4.2.3

10、绘制标准曲线及测定：取绿原酸对照品溶液（100wgmL）0、0.40、0.80、1.20、1.60、2.00、2.40mL,置10mL棕色量瓶中，力口70狮醇适量，按上述色谱条件经0.22u有机滤膜分别注入进样瓶进样10wL,测定峰面积。以峰面积为纵坐标，绿原酸量（wg）为横坐标,2绘制标准曲线。得出回归万程Y=30593x-38.049,R=0.9971。分别吸取1、2、3、4供试品溶液各2mL,经0.22u有机滤膜分别注入进样瓶测定。图2绿原酸标准曲线和线性关系2结果与分析2.1样品总黄酮含量结果样品重量（g）A含量（）样品1（干叶）1g0.4620.39%样品2(80C)1g0.3930

11、.33%样品3(110C)1g0.3620.30%样品4(140C)1g0.2210.19%表1样品总黄酮含量2.2样品绿原酸含量结果样品质量保留时间（min）峰面积含量（衿样品11g6.460693.5211.44%样品21g6.455686.4501.42%样品31g6.473609.9751.27%样品41g6.478586.2381.22%表2样品绿原酸含量2.3感官评价:汤色滋味样品1绿，无条形绿苦味较强显青气味重样品2色泽绿润，条形紧凑绿散发轻微花香徽苦回甘样品3色泽绿润，条形紧凑绿香气弱，略显青气滋味淡薄，白苦味样品4黄绿，条形紧凑黄绿有焦糊气味滋味淡薄不同工艺绿茶感官品质的比较

12、riAU34图3绿原酸标品的HPLCffl谱V62.4结果表明：260c杀青一叶片变深褐色，失绿，水分含量高，叶片柔软；温度低。300c杀青一,叶片浅褐色，稍有绿色，柔软，手握无脆声，水分含量高；温度稍低。340c杀青一,叶片鲜绿转为翠绿，以鲜叶失去光泽，梗折不断，叶片稍卷，叶缘干燥；温度合适。80c烘干泡茶水清汤绿叶，口感稍苦，散发金银花香气。110c烘干泡茶水清汤绿叶，口感苦涩，有青草气重。140c烘干泡茶叶片呈现褐色，茶汤褐色，口感微苦，微青草气兼有焦糊气。保留时间：绿原酸标品(6.472min)样品1(6.460min)样品2(6.455min)样品3(6.473min)样品4(6.4

13、78min),绿原酸标准品与4个样品保留(出峰)时间一致，确定是绿原酸；根据总黄酮和绿原酸的含量，可以看出金银花叶制茶后，总黄酮和绿原酸略微减少，可能是在采摘叶片后，储运过程中的降解，制茶工艺未促进总黄酮和绿原酸的降解；在80c条件下烘干总黄酮和绿原酸含量较高，效果较好。3讨论与结论按照：采摘鲜叶一杀青一回潮一揉捻一摊凉一烘干，制做金银花叶绿茶。340c杀青效果最好，杀青后叶片翠绿，保证了绿茶颜色；回潮80分钟手握成团无脆声，稍有弹性，叶质较柔软，折梗不断；以110c条件下烘干泡茶清汤绿叶，口感较好、散发金银花香气是最佳效果；总黄酮和绿原酸含量在80c条件下烘干呈现最大值，并且含量相当可观。综

14、合因素，在340c杀青，80c下烘干，金银花叶绿茶黄酮和绿原酸含量最高，颜色，口感最佳。制作出来的金银花叶绿茶条形紧凑，颜色翠绿；冲泡出来的茶水清汤绿叶，香气浓郁，汤色嫩绿清澈，叶底嫩匀肥厚明亮，有金银花香味；亦有清热解毒、抗菌消炎功效。本实验将绿茶制作工艺与金银花叶片结合起来，找到了最佳制茶工艺，收集每年3-4次整形修剪后的叶片，制成金银花叶绿茶，提高的金银花的附加值和叶片利用率，增加农民经济收入，提高种植金银花的积极性，获得社会效益。参考文献：1ShangXF,PanH,LiMX,etal.LonicerajaponicaThunb.:Ethnopharmacology,phytochemistryandpharmacologyofanim-portanttraditionalChinesemedicineJ.JournalofEthnopharmacology,2