医院消毒灭菌的效果监测07-06-13

1、l 一、前言一、前言：l 1.医院消毒是预防医院内感染的医院消毒是预防医院内感染的重要措施之一重要措施之一l 2. 消毒效果的监测是评价消毒效果的监测是评价l 3.消毒设备运转是否正常消毒设备运转是否正常l 4.消毒药剂是否有效消毒药剂是否有效l 5.消毒方法是否合理消毒方法是否合理l 6.消毒效果是否达标的唯一手段消毒效果是否达标的唯一手段l 监测人员需经过专业培训，监测人员需经过专业培训，掌握一定的消毒知识；掌握一定的消毒知识；l 熟悉消毒设备和药剂性能熟悉消毒设备和药剂性能;l 具备熟练的检验技能具备熟练的检验技能;l 选择合理的采样时间选择合理的采样时间(消毒后、消毒后、使用前使用前)

2、;l 遵循严格的无菌操作。遵循严格的无菌操作。l（一（一）压力蒸汽灭菌效果监测方法压力蒸汽灭菌效果监测方法l 1 1、化学监测法、化学监测法: :l 化学指示卡化学指示卡(管管)监测方法监测方法l 既能指示蒸汽温度，又能指示温度持既能指示蒸汽温度，又能指示温度持续时间续时间l 化学指示管化学指示管(卡卡)放入放入大包和难以消毒大包和难以消毒部位部位的的物品包中央物品包中央l （旧版消毒技术规范是放入每一待灭（旧版消毒技术规范是放入每一待灭菌的物品包中央）菌的物品包中央）l 化学指示胶带监测法：化学指示胶带监测法：l 将化学指示胶带粘贴于每将化学指示胶带粘贴于每一待灭菌物品包外一待灭菌物品包外l

3、 对预真空和脉动真空压力蒸汽灭对预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌，每日进行一次菌，每日进行一次B-D试验。试验。l 设计原理设计原理l a. 使实验包成为灭菌器内残留空气使实验包成为灭菌器内残留空气的聚焦点，它相对较大的面积和可透气的聚焦点，它相对较大的面积和可透气布料易吸附、布料易吸附、“捕捉捕捉”残留空气。残留空气。l b.真空测试图上的化学试剂对残留真空测试图上的化学试剂对残留空气具有敏感性。空气具有敏感性。l 将测试图置于实验包中间位将测试图置于实验包中间位置；置；l 然后，将实验包放于灭菌器然后，将实验包放于灭菌器室内排气口处，关闭柜门；室内排气口处，关闭柜门；l 进行进行1345分钟灭

4、菌处理分钟灭菌处理完毕，打开柜门，观察测试结果。完毕，打开柜门，观察测试结果。l 实验包由实验包由4650cm8090cm纯棉纯棉布巾组成，布巾先横折为三层，再纵折布巾组成，布巾先横折为三层，再纵折成六层。将折好的布巾一条摞一条至成六层。将折好的布巾一条摞一条至25cm高度。摞放时，各层布巾按折叠侧高度。摞放时，各层布巾按折叠侧左右交替摆好，以使两侧厚度相等。布左右交替摆好，以使两侧厚度相等。布巾摆好后，将真空测试图夹放于中央布巾摆好后，将真空测试图夹放于中央布巾之间，然后用布包巾包好，外面用化巾之间，然后用布包巾包好，外面用化学指示胶带固定好，成为一个实验包。学指示胶带固定好，成为一个实验包

5、。整个实验包的大小高约整个实验包的大小高约25cm，宽约宽约23cm，长约长约27cm，重约重约5kg。l 实验规定在实验规定在134蒸汽条件下，蒸汽条件下，使用使用3.5分钟观察结果，最长不超分钟观察结果，最长不超4分钟。分钟。l 测试图必须夹放于布包的中测试图必须夹放于布包的中央层位置。央层位置。l 实验包放在灭菌器底层，靠实验包放在灭菌器底层，靠近柜门与排气口处。近柜门与排气口处。l 实验在每天第一次灭菌前空实验在每天第一次灭菌前空锅进行。锅进行。l结果判断结果判断合格：合格：测试图变黑且均匀，即中央部测试图变黑且均匀，即中央部分和边缘部分颜色一致，表示灭菌分和边缘部分颜色一致，表示灭菌

6、器抽真空系统良好。器抽真空系统良好。不合格：不合格：测试图变色不均匀，通常中测试图变色不均匀，通常中央比边缘部分颜色浅，表示空气排央比边缘部分颜色浅，表示空气排除不彻底，须检查、修理后使用除不彻底，须检查、修理后使用. 指示菌株：指示菌株：指示菌株为耐热的嗜指示菌株为耐热的嗜热脂肪杆菌芽孢热脂肪杆菌芽孢( (ATCC 7953ATCC 7953或或SSIK 31SSIK 31株株) )，菌片含菌量为，菌片含菌量为5.5.O Ol0l05 5cfu/cfu/片片5.5.O Ol0l06 6cfucfu片，在片，在121121O.5O.5条条件下，件下，D D值（杀灭值（杀灭90%90%微生物所需

7、时间）微生物所需时间）为为1.31.3min1.9minmin1.9min，杀灭时间杀灭时间( (KTKT值值 ) ) 1 91 9 m i nm i n ， 存 活 时 间存 活 时 间 ( ( S TS T 值值 ) ) 为为3.93.9minmin。 培养基：培养基：试验用培养基为溴甲酚试验用培养基为溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基。紫葡萄糖蛋白胨水培养基。l 将两个嗜热脂肪杆菌芽孢菌片分别将两个嗜热脂肪杆菌芽孢菌片分别装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中装入灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。心部位。l 在下排气压力蒸汽灭菌柜室内，排在下排气压力蒸汽灭菌柜室内，排气口上方放置一个标准试验包

8、气口上方放置一个标准试验包( (由由3 3件平件平纹长袖手术衣，纹长袖手术衣，4 4块小手术巾，块小手术巾，2 2块中手块中手术巾，术巾，1 1块大毛巾，块大毛巾，3030块块lOcmlOcmlOcmlOcm 8 8层纱布敷料包裹成层纱布敷料包裹成(25(25cmcm30cm30cm30cm30cm大小大小) )。 预真空和脉动真空压力蒸汽灭预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器灭菌柜室内，排气门上方放置菌器灭菌柜室内，排气门上方放置一个标准测试包一个标准测试包(由由16条全棉手术巾条全棉手术巾4lcm66cm，将每条手术巾的长边将每条手术巾的长边先折成先折成3层，短边折成层，短边折成2层然后叠放，层

9、然后叠放，作成作成23cm23cml5cm大小的测试大小的测试包包) 。l 手提压力蒸汽灭菌器用通手提压力蒸汽灭菌器用通气贮物盒气贮物盒(22cml3cm6cm)代代替标准试验包，盒内盛满中试管，替标准试验包，盒内盛满中试管，指示菌片放于中心部位的两只灭指示菌片放于中心部位的两只灭菌试管内菌试管内(试管口用灭菌牛皮纸试管口用灭菌牛皮纸包封包封)，将贮物盒平放于手提压，将贮物盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。力蒸汽灭菌器底部。l 经一个灭菌周期后，在无菌经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出标准试验包或通气条件下，取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片，投入溴甲贮物盒中的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖

10、蛋白胨水培养基中，酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经经565611培养培养7 7d(d(自含式生物自含式生物指示物按说明书执行指示物按说明书执行) )，观察培养，观察培养基颜色变化。检测时设阴性对照基颜色变化。检测时设阴性对照和阳性对照。和阳性对照。快速检测快速检测(24小时出结果小时出结果)l 每个指示菌片接种的溴甲酚紫每个指示菌片接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基都不变色，判定为蛋白胨水培养基都不变色，判定为灭菌合格：指示菌片之一接种的溴灭菌合格：指示菌片之一接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基，由紫色变甲酚紫蛋白胨水培养基，由紫色变为黄色时，则灭菌过程不合格。为黄色时，则灭菌过程不合格。l 注意事项：注意

11、事项：监测所用菌片须经监测所用菌片须经卫生部认可，并在有效期内使用，卫生部认可，并在有效期内使用，生物指示物监测应生物指示物监测应1 1月月1 1次。次。l 1 1、化学检测法、化学检测法l 检测方法：检测方法：将既能指示温度又将既能指示温度又能指示温度持续时间的化学指示剂能指示温度持续时间的化学指示剂3 3个个5 5个分别放入待灭菌的物品中，并个分别放入待灭菌的物品中，并置于灭菌器最难达到灭菌的部位。经一置于灭菌器最难达到灭菌的部位。经一个灭菌周期后，取出化学指示剂，据其个灭菌周期后，取出化学指示剂，据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。件。 l 检测时

12、，所放置的指示管检测时，所放置的指示管的颜色及性状均变至规定的条件，的颜色及性状均变至规定的条件，则判为达到灭菌条件；若其中之则判为达到灭菌条件；若其中之一未达到规定的条件，则判为未一未达到规定的条件，则判为未达到灭菌条件。达到灭菌条件。 l 检测方法：检测方法：检测时，将多点温度检测时，将多点温度检测仪的多个探头分别放于灭菌器各层检测仪的多个探头分别放于灭菌器各层内、中、外各点。关好柜门，将导线引内、中、外各点。关好柜门，将导线引出，由记录仪中观察温度上升与持续时出，由记录仪中观察温度上升与持续时间。间。l 结果判定：结果判定：若所示温度若所示温度(曲线曲线)达达到顶置温度，则灭菌温度合格。

13、到顶置温度，则灭菌温度合格。 生物检测法生物检测法l 指示菌株：指示菌株：枯草杆菌黑色变种芽枯草杆菌黑色变种芽孢孢 ( ( A T C C 9 3 7 2 )A T C C 9 3 7 2 ) ， 菌 片 含 菌 量 为菌 片 含 菌 量 为5.05.010105 5cfucfu/ /片片5.05.010106 6cfucfu/ /片。其抗片。其抗力要求同上。力要求同上。l 检测方法：检测方法：将枯草杆菌芽孢菌片将枯草杆菌芽孢菌片分别装入灭菌中试管内分别装入灭菌中试管内(1(1片片/ /管管) )。灭菌。灭菌器与每层门把手对角线内，外角处放置器与每层门把手对角线内，外角处放置2 2个含菌片的试

14、管，试管帽置于试管旁，个含菌片的试管，试管帽置于试管旁，关好柜门，经一个灭菌周期后，待温度关好柜门，经一个灭菌周期后，待温度降至降至8080时，加盖试管帽后取出试管。时，加盖试管帽后取出试管。 l在无菌条件下在无菌条件下 ，加入普通营养肉汤培养基，加入普通营养肉汤培养基(5(5mlml管管) )，以，以363611培养培养4848h h，观察初步观察初步结果，无菌生长管继续培养至第七日。结果，无菌生长管继续培养至第七日。l 结果判定结果判定: :若每个指示菌片接种的肉汤若每个指示菌片接种的肉汤管均澄清，判为灭菌合格，若指示菌片之一管均澄清，判为灭菌合格，若指示菌片之一接种的肉汤管混浊，判为不合

15、格。接种的肉汤管混浊，判为不合格。l对难以判定的肉汤管，取对难以判定的肉汤管，取o o1ml1ml接种于营养接种于营养琼脂甲板，用灭菌琼脂甲板，用灭菌L L棒涂匀，放棒涂匀，放363611培培养养4848h h，观察菌落形态，并做涂片染色镜检，观察菌落形态，并做涂片染色镜检，判断是否有指示菌生长，若有指示菌生长，判断是否有指示菌生长，若有指示菌生长，判为灭菌不合格；若无指示菌生长，判为灭判为灭菌不合格；若无指示菌生长，判为灭菌合格。菌合格。 l 灭菌效果监测灭菌效果监测l 每次每次灭菌均应进行程序监测灭菌均应进行程序监测l 每个每个灭菌物品的外包装应粘贴包外灭菌物品的外包装应粘贴包外化学指示胶

16、带，作为灭菌过程的标志；化学指示胶带，作为灭菌过程的标志；包内放置化学指示卡，作为灭菌效果的包内放置化学指示卡，作为灭菌效果的参考。参考。l 每月每月应做生物监测，移植物必须等应做生物监测，移植物必须等生物监测结果为阴性时方可使用。生物监测结果为阴性时方可使用。 l 一般每月用生物指示物监测一次。生物一般每月用生物指示物监测一次。生物指示物用枯草杆菌黑色变种芽孢指示物用枯草杆菌黑色变种芽孢( (ATCC9372)ATCC9372)，抗 力 要 求 为 ： 菌 量 在抗 力 要 求 为 ： 菌 量 在 5 5 1 01 05 5c f uc f u 片片5510106 6cfucfu片，在环氧乙

17、烷剂量为片，在环氧乙烷剂量为600600mgmgL L30mg/L30mg/L，作用温度为作用温度为545422，相对湿，相对湿度为度为60601010条件下，其杀灭条件下，其杀灭9090该微生该微生物的物的D D值为值为2.62.6minmin5.8min5.8min，存活时间应存活时间应7.87.8minmin，死亡时间应死亡时间应5858minmin。l 菌量为菌量为5 510103 3cfucfu片片5510104 4cfucfu片。通片。通常做常采用以下数量的生物指示物较为适宜：常做常采用以下数量的生物指示物较为适宜：l 灭菌器柜室可用体积小于灭菌器柜室可用体积小于5m3时，至少时，

18、至少放置放置10个菌片；个菌片；l 灭菌器柜室可用体积为灭菌器柜室可用体积为5m3至至10m3时，时，每增加每增加1m3，增加增加1个菌片；个菌片；l 灭菌器柜室可用体积大于灭菌器柜室可用体积大于10m3时，每增时，每增加加2m3，增加增加1个菌片。个菌片。l生物指示物应放在那些在性能鉴定时发现是最生物指示物应放在那些在性能鉴定时发现是最难灭菌的部位，并均匀分布于整个灭菌物品中。难灭菌的部位，并均匀分布于整个灭菌物品中。 每次灭菌都应进行灭菌过程监测。每次灭菌都应进行灭菌过程监测。l 检测所用化学和微生物指示物必检测所用化学和微生物指示物必须经卫生部批准，并在有效期内使用。须经卫生部批准，并在

19、有效期内使用。l 紫外线灯管辐照度值的测定紫外线灯管辐照度值的测定l 1 1、紫外线辐照计测定法：、紫外线辐照计测定法：l 开灯开灯5min后，将测定波长为后，将测定波长为253.7nm的紫外线辐照计探头置于的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下，待仪表稳定后，被检紫外线灯下，待仪表稳定后，读数。读数。 l 开启紫外线灯开启紫外线灯5min后，将指示后，将指示卡置紫外灯下垂直距离卡置紫外灯下垂直距离lm处，有图处，有图案一面朝上，照射案一面朝上，照射lmin(紫外线照射紫外线照射后，图案正中光敏色块由乳白色变后，图案正中光敏色块由乳白色变成不同程度的淡紫色成不同程度的淡紫色)，观察指示卡，观察指

20、示卡色块的颜色，将其与标准色块比较，色块的颜色，将其与标准色块比较，读出照射强度。读出照射强度。l 普通普通30w直管型紫外线灯，新灯辐直管型紫外线灯，新灯辐照强度照强度90W/cm2为合格；使用中紫为合格；使用中紫外线灯辐照强度外线灯辐照强度70W/cm2为合格；为合格；30W高强度紫外线新灯的辐照强度高强度紫外线新灯的辐照强度180W/cm2为合格。为合格。l注意：测定时电压注意：测定时电压220V5V，温度温度2025，相对湿度，相对湿度60%，紫外线，紫外线辐照计必须检定。指示卡应获得卫生许辐照计必须检定。指示卡应获得卫生许可批件。可批件。l 无菌检验是检查无菌物品是否无菌无菌检验是检

21、查无菌物品是否无菌的一种方法。的一种方法。l 注意：注意：l 1、无菌检验应在洁净度为无菌检验应在洁净度为100级单级单向流空气区域内进行，应严格遵守无菌向流空气区域内进行，应严格遵守无菌操作，避免微生物污染；对单向流空气操作，避免微生物污染；对单向流空气区域及工作台面，必须进行洁净度验证。区域及工作台面，必须进行洁净度验证。l 2、采样时间在灭菌后，保存有效采样时间在灭菌后，保存有效期内。期内。l 洗脱液与培养基无菌性试洗脱液与培养基无菌性试验：无菌试验前验：无菌试验前3d，于需于需-厌养厌养培养基与霉菌培养基内各接种培养基与霉菌培养基内各接种lml洗脱液，分别置洗脱液，分别置3035与与2

22、025培养培养72h，应无菌生应无菌生长。长。l 取缝合针、针头、刀片取缝合针、针头、刀片等小件医疗器械等小件医疗器械5件直接浸入件直接浸入6管需管需厌氧培养管厌氧培养管(其中一管其中一管作阳性对照作阳性对照)与与4管霉菌培养管。管霉菌培养管。培养基用量为培养基用量为15ml/管。管。l 取取5付注射器，在付注射器，在5ml洗脱液中反复洗脱液中反复抽吸抽吸5次，洗下管内细菌，混和后接种需次，洗下管内细菌，混和后接种需-厌养菌培养管厌养菌培养管(共共6管，其中管，其中1管作阳性对管作阳性对照照)与霉菌培养管与霉菌培养管(共共4管管)。接种量：。接种量：lml注射器为注射器为0.5ml，2ml注射

23、器为注射器为lml，5ml10ml注射器为注射器为2ml，20ml50ml注射注射器为器为5ml。l 培养基用量：培养基用量：接种量为接种量为2ml以下为以下为15ml/管，接种量管，接种量5ml为为40ml/管。管。l 手术钳、镊子等大件医疗器械手术钳、镊子等大件医疗器械取取2件用沾有无菌洗脱液的棉拭子件用沾有无菌洗脱液的棉拭子反反复复涂抹采样，将棉拭子投入涂抹采样，将棉拭子投入5ml无无菌洗脱液中，将采样液混匀，接种菌洗脱液中，将采样液混匀，接种于需于需厌氧培养管厌氧培养管(共共6管，其中管，其中1管管作阳性对照作阳性对照)与霉菌培养基与霉菌培养基(共共4管管)。接种量为接种量为1ml/管

24、，培养基用量为管，培养基用量为15ml/管。管。l 将需将需厌氧培养管以及阳性与阴性厌氧培养管以及阳性与阴性对照管均于对照管均于3035培养培养5d，霉菌培霉菌培养管与阴性对照管于养管与阴性对照管于2025培养培养7d，培养期间逐日检查是否有菌生长。培养期间逐日检查是否有菌生长。l 如加入供试品后培养基出现混浊或如加入供试品后培养基出现混浊或沉淀，经培养后不能从外观判断时，可沉淀，经培养后不能从外观判断时，可取培养液转种入另一支相同的培养基中取培养液转种入另一支相同的培养基中或斜面培养基上，培养或斜面培养基上，培养48h72h后观察。后观察。 （1）送检时间不得超过送检时间不得超过6h，若若样

25、品保存于样品保存于04，则不得超过，则不得超过24h。 （2）被采样本表面积被采样本表面积30m2，设设4角及中央角及中央5点，点，4角的布点部位距墙壁角的布点部位距墙壁lm处。处。 l 2、采样方法：、采样方法：将普通营养琼脂平将普通营养琼脂平板（直径为板（直径为9cm）放在室内各采样点处，放在室内各采样点处，采样高度为距地面采样高度为距地面1.5m采样时将平板盖采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露打开，扣放于平板旁，暴露5min，盖好盖好立即送检。立即送检。l 细菌总数细菌总数(cfu/m3)=50000N/(AT)l 式中式中A为平板面积为平板面积(cm2);T为平板为平板暴露时间暴露

26、时间(min)；N为平均菌落数为平均菌落数(cfu)。 l I类区域：类区域：细菌总数细菌总数10cfu/m3(或或0.2cfu/平板平板)，未检出金黄色葡萄球菌、，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格；溶血性链球菌为消毒合格；l 类区域：类区域：细菌总数细菌总数200cfu/m3(或或4cfu平板平板)，未检出金黄色葡萄球菌、，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格：溶血性链球菌为消毒合格：l 类区域：类区域：细菌总数细菌总数500cfu/m3(或或l0cfu平板平板)，未检出金黄色葡萄球菌、，未检出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌为消毒合格。溶血性链球菌为消毒合格。l1、在消毒处

27、理后、操作前进在消毒处理后、操作前进行采样。行采样。l2、采样前，关好门、窗，在采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止无人走动的情况下，静止10min进行采样。进行采样。 l有效氯含量测定有效氯含量测定 , ,可以用试纸法测定。可以用试纸法测定。l 使用方法：使用方法：l 1、消毒剂溶液有效成分浓度在测消毒剂溶液有效成分浓度在测定范围内时，取试纸浸于消毒液中，即定范围内时，取试纸浸于消毒液中，即刻取出，半分钟内在自然光下与标准色刻取出，半分钟内在自然光下与标准色块比较，读值。块比较，读值。l 2、消毒液浓度高于试纸测定范围消毒液浓度高于试纸测定范围时，可先稀释消毒剂，再测定。时，可先稀释

28、消毒剂，再测定。l注意：试纸浸湿后时间超过注意：试纸浸湿后时间超过1分钟，颜分钟，颜色逐渐消退，结果不准确。色逐渐消退，结果不准确。戊二醛浓度测定戊二醛浓度测定l 试纸法：试纸法：1、从小瓶中取出一条；从小瓶中取出一条；2 2、将指示色块完全浸没于戊二醛溶液，将指示色块完全浸没于戊二醛溶液，一秒内取出；一秒内取出；3 3、沾下瓶盖上的纸垫，去除多余的液体；沾下瓶盖上的纸垫，去除多余的液体；4 4、横置于瓶盖上，注意不要将色块面朝横置于瓶盖上，注意不要将色块面朝下以免受到污染；下以免受到污染；5 5、等候等候5858分钟判读结果。分钟判读结果。l 1 1、涂抹法：、涂抹法：用无菌吸管吸取消毒用无

29、菌吸管吸取消毒液液1.0ml，加入加入9.0ml含有相应中和剂的含有相应中和剂的采样管内混匀，用无菌吸管吸取上述溶采样管内混匀，用无菌吸管吸取上述溶液液0.2ml，滴于干燥普通琼脂平板，每滴于干燥普通琼脂平板，每份样品同时做份样品同时做2个平行样，一平板置个平行样，一平板置20培养培养7d，观察霉菌生长情况，另一观察霉菌生长情况，另一个平板置个平板置35温箱培养温箱培养72h记数菌落数，记数菌落数，同时按十五的原则检测致病菌。同时按十五的原则检测致病菌。l 消毒液染菌量消毒液染菌量(cfu/ml)=每个平板上的每个平板上的菌落数菌落数50 2 2、倾注法、倾注法l 用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸

30、管吸取消毒液1.Oml，加入加入到到9.0ml含相应中和剂的无菌生理盐水采含相应中和剂的无菌生理盐水采样管中混匀，分别取样管中混匀，分别取0.5ml放入放入2只灭菌平只灭菌平皿内，加入已熔化的皿内，加入已熔化的4548的营养琼的营养琼脂脂15ml18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝边倾注边摇匀，待琼脂凝固，一平板置固，一平板置20培养培养7d，观察霉菌生长观察霉菌生长情况；另一个平板置情况；另一个平板置361培养培养72h，计数菌落数，同时按十五的原则检测致病计数菌落数，同时按十五的原则检测致病菌。菌。l 消毒液染菌量消毒液染菌量(cfu/ml)=每个平板上的每个平板上的菌落数菌落数20l 消毒液

31、染菌量消毒液染菌量100cfu/ml，并未检出致病菌为合格。并未检出致病菌为合格。l 采样后采样后1h内检测。内检测。 l 采样时间：采样时间：在消毒后、使用在消毒后、使用前进行采样。前进行采样。l 采样方法：采样方法：将将2.0cm2.5cm无菌滤纸片于无菌洗脱液中浸湿均无菌滤纸片于无菌洗脱液中浸湿均匀，贴在食具表面，经匀，贴在食具表面，经5min取下，取下，每每10张滤纸合为一份样本张滤纸合为一份样本(相当于相当于50cm2采样面积采样面积)，投入含，投入含50m1生理生理盐水的盐水的lOOml三角烧瓶中，于三角烧瓶中，于4h内内送检。送检。 l 纺 织 品 ： 细 菌 总 数纺 织 品

32、： 细 菌 总 数5cfu/cm2，大肠菌群末检出。大肠菌群末检出。l 餐具若用化学消毒剂消毒，餐具若用化学消毒剂消毒，采样液中应加入相应中和剂。采样液中应加入相应中和剂。 l 采样时间：采样时间：在消毒后、使用前进在消毒后、使用前进行采样。行采样。l 采样方法：采样方法：便器、尿壶等容器可便器、尿壶等容器可用沾有含相应中和剂的无菌生理盐水的用沾有含相应中和剂的无菌生理盐水的棉拭子，反复涂擦容器的内表面及内口棉拭子，反复涂擦容器的内表面及内口处，剪占手接触部位后，将棉拭子投入处，剪占手接触部位后，将棉拭子投入5ml无菌生理盐水试管中，立即送检。无菌生理盐水试管中，立即送检。l 拖把、抹布等物品可用无菌的方法剪拖把、抹布等物品可用无菌的方法剪取取lcm3cm，直接投入直接投入5ml含相应中和含相应中和剂的无菌生理盐水中，立即送检。剂的无菌生理盐水中，立即送检。 l未检出致病菌为消毒合格。未检出致病菌