突变和多态的分析学习教案

1、会计学1突变突变(tbin)和多态的分析和多态的分析第一页，共16页。基因异常 方 法 探针、引物或限制酶基因缺失 Southern杂交 缺失基因的探针 PCR分析(fnx) 引物包括缺失或在缺失部位内点突变 RFLP分析(fnx) 突变导致其切点消失的限制酶 ASO杂交 正常和异常的ASO探针 PCR分析(fnx) 引物包括突变部位 （RFLP,SSCP) 基因已知但异常不明 基因内或旁侧序列 基因内或旁侧序列探针或引物 多态性（RFLP,AMP-FLP) 连锁分析(fnx)基因未知 与疾病连锁的多态性， 与疾病连锁的多态位点探 如AMP-FLP连锁分析(fnx) 针或引物 RFLP位点单体

2、型连锁分析(fnx)第2页/共16页第二页，共16页。第3页/共16页第三页，共16页。Allele Specific Oligonucleotide(ASO) Hybridization第4页/共16页第四页，共16页。10kb4kbBamHBamH5353()53(-)/ /- /- -/- -/-14kb10kb地贫基因缺失的诊断 左图示16染色体上携带(xidi)有数目不同的基因，箭头示BamHI的切点；由图为用基因探针杂交的结果。缺失缺失(qu sh)的检测的检测第5页/共16页第五页，共16页。外显子 bp N P Pm 535 3 410 43 357 50 271 13 238

3、 6 202 47 181 60 139 52 113DMD基因缺失(qu sh)的多重PCR诊断。共采用9对引物，可见患者(P)有电泳带的缺失(qu sh)。Pm为启动子第6页/共16页第六页，共16页。荧光荧光(ynggung)原位杂原位杂交（交（FISH）基因组探针(tn zhn)的分离利用原位杂交的方法进行基因(jyn)定位第7页/共16页第七页，共16页。IVS-IVS- Mst部位(bwi) 1.15kb1.15kb1.35kb正常(zhngchng)1.15kb镰变1.35kb 正常(zhngchng) 镰状性状 镰状贫血1.15kb1.35kb镰状贫血的基因诊断第8页/共16页

4、第八页，共16页。Linkage Analysis第9页/共16页第九页，共16页。1212345kb5.73.42.3成人型多囊肾病的连锁(lin su)分析第10页/共16页第十页，共16页。第11页/共16页第十一页，共16页。第12页/共16页第十二页，共16页。Single Strand Conformational Polymorphism (SSCP)DNA is denatured into single strandsSingle strands fold; shape is altered by mutationsMobility of mutant and normal strands differ in gel第13页/共16页第十三页，共16页。Protein Truncation Assay（蛋白质截短检测(jin c)）DNA transcribed to mRNARNA translated to proteinProtein run on gelTruncated protein has different mobility in gel第14页