磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定

1、磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定一、实一、实 验验 目目 的的1.1.掌握磺胺类药物血浆药物浓度的测定方法掌握磺胺类药物血浆药物浓度的测定方法2.2.掌握药物半衰期的计算方法掌握药物半衰期的计算方法3.3.了解药物血浆半衰期测定及计算的临床意了解药物血浆半衰期测定及计算的临床意 义义二、实二、实 验验 原原 理理1.1.多数药物在体内按一级动力学规律消除多数药物在体内按一级动力学规律消除, ,静脉注射静脉注射后，如以血浆药物浓度的对数值为纵坐标，时间为后，如以血浆药物浓度的对数值为纵坐标，时间为横坐标，其时量关系常呈直线。横坐标，其时量关系常呈直线。 2.2.药

2、物血浆半衰期（药物血浆半衰期（half lifehalf life，T T1/21/2）为：）为：eKT693. 02/1tKCCet303. 2loglog0Ke=2.303(logCKe=2.303(logC1 1-logC-logC2 2)/t)/t2 2-t-t1 1二、实二、实 验验 原原 理理3.3.呈色原理：呈色原理： 磺胺类药物在酸性溶液中，与亚硝酸钠起重氮反应，磺胺类药物在酸性溶液中，与亚硝酸钠起重氮反应，生成重氮盐。此重氮盐在碱性溶液中与酚类生成重氮盐。此重氮盐在碱性溶液中与酚类 化合物起偶联反应，生成橙红色的偶氮化合物。化合物起偶联反应，生成橙红色的偶氮化合物。 偶氮化合

3、物的显色深浅与磺胺的浓度有关。偶氮化合物的显色深浅与磺胺的浓度有关。 偶氮染料（橙红色）麝香草酚重氮盐磺胺药碱三氯醋酸NaOHNaNO2测定管光密度标准管光密度标准管浓度血浆中磺胺的浓度%mg%mg三、实三、实 验验 动动 物物家兔（体重左右）家兔（体重左右）四、实四、实 验验 器器 材材 和和 药药 品品1. 1. 器材：分光光度计、离心机、兔手术台、手术器器材：分光光度计、离心机、兔手术台、手术器 械、动脉夹、动脉插管、磅秤、注射器、械、动脉夹、动脉插管、磅秤、注射器、 移液管、离心管、试管等移液管、离心管、试管等 分光光度计分光光度计 离心机离心机四、实四、实 验验 器器 材材 和和 药

4、药 品品2.2.药品：药品：20%20%磺胺嘧啶钠溶液、磺胺嘧啶钠溶液、1%1%肝素钠溶液、肝素钠溶液、 0.02%0.02%磺胺嘧啶钠溶液（标准液）、磺胺嘧啶钠溶液（标准液）、 7.5% 7.5%三氯醋酸溶液、三氯醋酸溶液、0.5%0.5%亚硝酸钠溶液、亚硝酸钠溶液、 0.5% 0.5%麝香草酚溶液、麝香草酚溶液、20%NaOH20%NaOH溶液、溶液、 20% 20%乌拉坦溶液、蒸馏水乌拉坦溶液、蒸馏水五、实五、实 验验 步步 骤骤 （一）动物基本操作（一）动物基本操作 （二）测定液和标准液的配制（二）测定液和标准液的配制 （三）比色管的配制（三）比色管的配制 （四）比色与计算（四）比色与

5、计算（一）动物基本操作（一）动物基本操作( (血液标本的采集）血液标本的采集）1.1. 抓取家兔抓取家兔1 1只，称重，用只，称重，用2020乌拉坦溶液乌拉坦溶液5mL/kg5mL/kg行耳缘静脉麻醉，然后固定于手术台行耳缘静脉麻醉，然后固定于手术台上。上。2.2.气管插管气管插管 手术区手术区剪毛，沿正中线剪开颈部剪毛，沿正中线剪开颈部皮肤，钝性分离皮下组织及肌肉，找皮肤，钝性分离皮下组织及肌肉，找出并游离气管，穿一根线备用。确定出并游离气管，穿一根线备用。确定甲状软骨的位置，在其下甲状软骨的位置，在其下34环装环装软骨处切一倒软骨处切一倒“T”形切口，插管固定。形切口，插管固定。( (一一

6、) )动物基本操作动物基本操作( (血液标本的采集）血液标本的采集）3 3. .游离颈总动脉：游离颈总动脉：分开肌分开肌肉层后，肉层后，找出一侧颈总找出一侧颈总动脉并分离约动脉并分离约2 23cm3cm左左右，右，在其下穿线两根线在其下穿线两根线备用备用。（一）动物基本操作（一）动物基本操作4.4.全身肝素化：耳缘静脉注射肝素全身肝素化：耳缘静脉注射肝素5ml5ml。 线线1 1结扎远心端，待血管充盈后，动脉夹夹闭结扎远心端，待血管充盈后，动脉夹夹闭近心端近心端 远心端剪一远心端剪一“V”V”形口，动脉插管，线形口，动脉插管，线2 2结扎结扎固定（二次固定）固定（二次固定）5.5.动脉插管（肝

7、素润洗）动脉插管（肝素润洗）（一）动物基本操作（一）动物基本操作6.6.取血：打开动脉夹取空白血样取血：打开动脉夹取空白血样2ml2ml置于用肝置于用肝素浸过的试管中待用；然后由耳缘静脉注射素浸过的试管中待用；然后由耳缘静脉注射2020磺胺嘧啶钠溶液磺胺嘧啶钠溶液2ml/kg2ml/kg，于给药后，于给药后10min10min及及40min40min各取血各取血2ml2ml，分别置于同上试管中待，分别置于同上试管中待用用（二）测定液和标准液的配制（二）测定液和标准液的配制测定液的配制：用测定液的配制：用1ml1ml注射器抽取上述血液各，置于注射器抽取上述血液各，置于已盛有已盛有 三氯醋酸溶液的

8、玻璃试管中，充分摇匀，三氯醋酸溶液的玻璃试管中，充分摇匀，然后以然后以1500r/min1500r/min，离心，离心5min5min待用。待用。标准液的配制：取磺胺嘧啶钠溶液，加入已装有标准液的配制：取磺胺嘧啶钠溶液，加入已装有 三氯醋酸溶液试管中，摇匀待用三氯醋酸溶液试管中，摇匀待用。成分成分空白管空白管（mL）标准管标准管（mL）测定管（测定管（mL）给药前给药前给药给药10min给药给药40min测定液测定液/1.51.51.5标准液标准液/1.5/蒸馏水蒸馏水1.5/0.5NaNO2 0.50.50.50.50.50.5麝麝香草酚香草酚 1.01.01.01.01.0（三）各比色管的

9、配制（三）各比色管的配制蒸馏水蒸馏水0.02%NaSD1 1组标本各取加入组标本各取加入2 2组组2组各试管先加组各试管先加三氯乙酸三氯乙酸2组测定液各取清组测定液各取清液加入液加入3组组加2 2加1ml1ml麝香草酚 标本标本（1 1组）组） 测定液测定液（2 2组）组） 比色液比色液（3 3组）组）空白管空白管标准管标准管给药前给药前药后药后1010药后药后4040取取1313支试管支试管分别用记号笔分别用记号笔标记标记（四）比色与计算（四）比色与计算 用用72722 2型分光光度计进行比色，选波长型分光光度计进行比色，选波长520nm520nm，以空白管调，以空白管调“0”“0”点，读出

10、标准管及点，读出标准管及各测定管光密度，并各测定管光密度，并记录记录。 六、实六、实 验验 结结 果果标准管标准管测定管测定管给药前给药前 给药后给药后10min10min给药后给药后40min40min光密度值光密度值1.1.各比色管的各比色管的光密度值光密度值六、实六、实 验验 结结 果果2.2.计算计算Ke Ke 及及T T1/21/2tKCCet303. 2loglog0eKT693. 02/1Ke=2.303(logCKe=2.303(logC1 1-logC-logC2 2)/t)/t2 2-t-t1 1C CNaSDNaSD=C=C标标/OD/OD标标（ODOD给药后给药后-OD-OD给药前给药前） 七、注七、注 意意 事事 项项1.1.麻醉时一定把握好速度。麻醉时一定把握好速度。2.2.每次取血之前要先将残血放掉。每次取血之前要先将残血放掉。3.3.各盛血的试管及动脉插管要