大肠杆菌的培养和分离ppt课件

1、大肠杆菌的培育和分别大肠杆菌的培育和分别1 1、微生物、微生物一、微生物的根底知识一、微生物的根底知识(1)(1)定义定义(2)种类种类(3)用途用途2、菌落、菌落1概念概念2菌落是鉴定菌种的重要根据。菌落是鉴定菌种的重要根据。菌落细菌的菌细菌的菌落特征因落特征因种而异种而异 3 3、培育基、培育基1 1成分成分细菌培育：蛋白胨、酵母提取液、氯化钠细菌培育：蛋白胨、酵母提取液、氯化钠霉菌培育：无机物或添加蔗糖的豆芽汁霉菌培育：无机物或添加蔗糖的豆芽汁2 2种类种类分别分别( (纯化纯化) )细菌、细菌、保管菌种保管菌种固体培育基固体培育基液体培育基液体培育基凝固剂凝固剂琼脂琼脂作用作用扩展培育

2、细菌扩展培育细菌液体培育基：液体培育基：外表生长外表生长均匀混浊生长均匀混浊生长沉淀生长沉淀生长固体培育基：菌落，菌苔固体培育基：菌落，菌苔4 4、生活环境、生活环境霉菌：中性偏酸霉菌：中性偏酸 细菌：中性偏碱细菌：中性偏碱1.1.无菌操作的目的无菌操作的目的 防止培育基被其他微生物污染防止培育基被其他微生物污染(及防止操作者被微生物感染及防止操作者被微生物感染)2、无菌技术包括、无菌技术包括(1)(1)将实验器具和培育基：高压蒸汽灭菌将实验器具和培育基：高压蒸汽灭菌 (2)(2)接种环接种环( (针针) )、试管口、试管口: : 灼烧灼烧 灭菌灭菌 (3)实验操作空间：酒精实验操作空间：酒精

3、+紫外线紫外线 消毒消毒接种室接种室(箱箱)、超净任务台、超净任务台(4) (4) 双手双手: : 酒精酒精 消毒消毒 (5) 实验操作应在实验操作应在 酒精灯火焰酒精灯火焰 旁进展旁进展(6)防止已灭菌处置的资料器具与防止已灭菌处置的资料器具与 周围物品周围物品 相接触。相接触。(7)(7)棉塞棉塞( (封口膜封口膜):):只让空气经过，而空只让空气经过，而空气中的微生物不能经过。气中的微生物不能经过。灼烧灭菌灼烧灭菌高压蒸汽灭菌锅高压蒸汽灭菌锅消毒定义：消毒定义：利用化学或物理方法，杀死大部份致病利用化学或物理方法，杀死大部份致病微生物的过程。微生物的过程。3.3.消毒与灭菌消毒与灭菌2

4、2灭菌的定义：灭菌的定义：以化学剂或物理方法消灭一切微生物，以化学剂或物理方法消灭一切微生物，包括一切细菌的繁衍体、芽孢、霉菌及病包括一切细菌的繁衍体、芽孢、霉菌及病毒，而到达完全无菌之过程。毒，而到达完全无菌之过程。 灭菌与消毒技术是微生物有关任务中灭菌与消毒技术是微生物有关任务中最普通也是最重要的技术。最普通也是最重要的技术。三、分别细菌方法三、分别细菌方法2、涂布分别法、涂布分别法1、划线分别法、划线分别法 1、划线分别法、划线分别法2、涂布分别法、涂布分别法2、涂布分别法、涂布分别法2、培育：在、培育：在LB液体培育基上扩展培育液体培育基上扩展培育四、大肠杆菌的培育和分别1、大肠杆菌(1)特性： 革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌(2)用途： 基因工程技术中被广泛采用的工具3 3、分别、分别 灭菌灭菌 倒平板倒平板 培养培养 划线分离划线分离 LBLB液体和固体培养基及培养皿高压液体和固体培养基及培养皿高压蒸汽灭菌蒸汽灭菌将固体培养基倒入将固体培养基倒入4 4个灭菌后的培养个灭菌后的培养皿中，制备平面培养基皿中，制备平面培养基在装有液体培养基的三角瓶中接种在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌，培养大肠杆菌，培养12h12h平板划线法平板划线法培养皿倒置，培养皿倒置，37恒温培养恒温培养1224小