氨基酸的薄层层析ppt课件

1、如何分别鉴定氨基酸混合液？如何分别鉴定氨基酸混合液？生物化学与分子生物学实验教学中心生物化学与分子生物学实验教学中心氨基酸的薄层层析氨基酸的薄层层析(Thin layer chromatography of amino acids)生物化学与分子生物学实验教学中心生物化学与分子生物学实验教学中心实验目的实验目的l掌握薄层层析法的普通原理。掌握薄层层析法的普通原理。l掌握氨基酸薄层层析法的根本操作技术。掌握氨基酸薄层层析法的根本操作技术。l掌握如何根据挪动速率掌握如何根据挪动速率Rf值来鉴定被分别值来鉴定被分别的物质即氨基酸混合液。的物质即氨基酸混合液。层析技术层析技术l概念：是利用化合物中各组

2、分的物理性质的差概念：是利用化合物中各组分的物理性质的差别如溶解度、吸附才干、分子外形和大小、别如溶解度、吸附才干、分子外形和大小、分子极性等使各组分在两相中的分布不同，分子极性等使各组分在两相中的分布不同，从而使各组分以不同速度随流动相向前挪动而从而使各组分以不同速度随流动相向前挪动而到达分别的目的。到达分别的目的。l特点：分别效率高，能分别各种性质相类似的特点：分别效率高，能分别各种性质相类似的物质。不仅可用于少量物质的分别纯分，也可物质。不仅可用于少量物质的分别纯分，也可用于大量物质的分别纯化和制备。用于大量物质的分别纯化和制备。层析法的分类层析法的分类l气相层析以气体为流动相的层析法气

3、相层析以气体为流动相的层析法l液相层析以液体为流动相的层析法，此为生液相层析以液体为流动相的层析法，此为生物化学领域里常用的方法物化学领域里常用的方法l 1.吸附层析：薄层吸附层析、吸附柱层析吸附层析：薄层吸附层析、吸附柱层析l 2.分配层析：纸层析、柱层析、薄层层析分配层析：纸层析、柱层析、薄层层析l 3.离子交换层析离子交换层析l 4.凝胶层析：柱层析、薄膜层析凝胶层析：柱层析、薄膜层析l 5.亲和层析亲和层析l 实验原理实验原理实验原理实验原理实验原理实验原理实验资料实验资料l吸附剂：硅胶吸附剂：硅胶l粘合剂：粘合剂： 0.5%的羧甲基纤维素钠的羧甲基纤维素钠l氨基酸的异丙醇溶液氨基酸的

4、异丙醇溶液l 丙氨酸、精氨酸、甘氨酸丙氨酸、精氨酸、甘氨酸l展开展开-显色剂正丁醇、乙酸、茚三酮溶液显色剂正丁醇、乙酸、茚三酮溶液l分析样品：氨基酸混合液分析样品：氨基酸混合液器材器材l层析板、尺子、铅笔层析板、尺子、铅笔l烧杯、量筒烧杯、量筒l喷雾器、吹风机喷雾器、吹风机l毛细管、层析缸毛细管、层析缸l药匙药匙l烘烤箱烘烤箱2cm1cm Ala Arg Gly MixAla Arg Gly MixRf =斑点至原点间隔斑点至原点间隔溶剂前缘至原点间隔溶剂前缘至原点间隔结果计算结果计算 小心量出斑点中心至原点中心间隔，小心量出斑点中心至原点中心间隔，再量出原点中心至溶剂前沿的间隔，计算再量出原点中心至溶剂前沿的间隔，计算出它们的出它们的 值。值。 根据值，鉴定出混合样品中氨基根据值，鉴定出混合样品中氨基酸的种类，并绘出层析图谱。酸的种类，并绘出层析图谱。本卷须知本卷须知复习思索题复习思索题l硅胶的吸附力与含水量的问题硅胶的吸附力与含水量的问题l吸附实验中吸附剂的选择根据吸附