麻醉学研究生毕业答辩交流幻灯

1、 专业：麻醉学专业：麻醉学 姓名：郭文义姓名：郭文义 2010-4-24Company Company Logo前前 言言材料与方法材料与方法研研 究究 结结 果果讨讨 论论结结 论论Company name 前前 言言手术中发生心跳骤停的概率不仅威胁着每一位接受手术治疗的患者的生命安全，其造成的脑缺血再灌注损伤也对现代临床麻醉的心肺脑复苏技术提出了课题和挑战；近年来国内外关于脑缺血再灌注损害的研究普遍关注于各种预处理方法的脑保护作用，而本课题则主要研究甘露醇在脑缺血再灌注损伤后的干预效果；目前，临床急救中甘露醇脱水属于心肺脑复苏的后处理措施，其给药时间问题还没有学者关注。本课题主要通过动物实

2、验探讨甘露醇在心肺脑复苏中的最佳用药时机。Company name心跳骤停心跳骤停后再灌注脑损后再灌注脑损伤为临床伤为临床急救复苏急救复苏中中经常面临经常面临的问题的问题如何减轻甚至如何减轻甚至逆转逆转脑损伤？脑损伤？Company name多为预先给药，临床实际差距较大采用采用再灌注后再灌注后给药？给药？近年来脑保护的措施Company nameCompany name在临床心肺复苏中在临床心肺复苏中一直列为一直列为心肺复苏心肺复苏后处理措施后处理措施早期应用甘露醇早期应用甘露醇液体梯度对抗复苏后液体梯度对抗复苏后建立的血压梯度建立的血压梯度甘露醇应甘露醇应用的最佳用的最佳时机是？时机是？C

3、ompany name材料与方法材料与方法Company name实验动物实验动物 健康昆明小鼠36只，体重355克，雌雄随机，由山西省肿瘤研究所实验动物中心提供。Company name实验分组和干预实验分组和干预取健康小鼠36只随机将其分为6组各组6只分别为： A组： 假手术组，手术但不给药B组： 缺血再灌注损伤对照组，分离双侧颈总动脉，穿线但不结扎也不给药C组： 再灌注即刻甘露醇干预组，恢复灌注即刻尾静脉注射甘露醇D组： 再灌注30min甘露醇干预组，恢复灌注30min后给予甘露醇E组： 再灌注1h甘露醇干预组，恢复灌注1h后给予甘露醇F组： 再灌注1.5h甘露醇干预组，恢复灌注1.5h

4、后给予甘露醇Company name实验路线图Company name模型制备模型制备 过程过程麻醉颈部正中切口下颌下腺上翻分离双侧颈总动脉活结结扎动脉实现缺血松开活结恢复灌注Company name 模型制备成功标准模型制备成功标准 在结扎小鼠双侧颈总动脉后,以出现惊厥、呼吸深慢、心跳加快为缺血成功标准； 松开线结以血管远端充盈、变红、观察到搏动为恢复灌注成功标准。 Company name观察指标和统计分析观察指标和统计分析 1 小鼠的行为学改变 2 存活细胞数 3 变性细胞率 4 观察描述海马CA1区细胞形态学变化 实验数据以均数标准差表示，采用单因素方差分析，组间进行多重比较，SPSS

5、17统计软件分析，P0.05认为有显著性差异。Company name研究结果研究结果Company name各组小鼠行为学改变各组小鼠行为学改变A组 小鼠自发活动，刺探，梳理毛发，翻正反射存在，无运动失调。B组 小鼠活动减少，运动失调，翻正反射消失，疼痛反射消失，甚至昏迷。C组 小鼠活动自如，多无运动失调，翻正反射存在，疼痛反射存在。D、E、F组 小鼠活动减少，翻正反射和疼痛反射减弱或消失，精神困倦。Company name存活细胞数和变性细胞率存活细胞数和变性细胞率 甘露醇即刻干预组小鼠海马CA1区存活细胞数明显高于缺血再灌注对照组（P0.05）（如表1）；变性细胞率明显低于缺血再灌注对照

6、组（P0.05）（如表2），而与假手术组无显著差别（P0.05），30min后甘露醇干预组与缺血再灌注对照组比较均无显著差别（P0.05）。 Company name组别 存活细胞数（个）A 假手术组 23.000.89* *B 缺血再灌注对照组 9.002.10C 甘露醇即刻干预组 22.001.05* *D 甘露醇30min干预组 10.831.60E 甘露醇1h 干预组 10.082.22F 甘露醇1.5h干预组 9.081.99表表1 各实验组小鼠海马各实验组小鼠海马CA1区正常细胞数的比较区正常细胞数的比较Company name组别 变性细胞率（%）A 假手术组 7.330.82*

7、 *B 缺血再灌注对照组 30.671.75C 甘露醇即刻干预组 8.170.41* *D 甘露醇30min干预组 29.501.05E 甘露醇1h 干预组 29.830.75F 甘露醇1.5h干预组 30.160.75表表2 各实验组小鼠海马各实验组小鼠海马CA1区变性细胞率的比较区变性细胞率的比较Company name A组 海马CA1区锥体细胞有层次分明的45层细胞结构,胞质均质红染,核大而圆，核膜完整，核仁清晰。细胞层向心侧间质呈纤维束样结构，排列整齐。 B组 细胞层明显挤压状，仅见3层细胞结构，排列散乱。正常锥体细胞数明显减少，可见大量的变性坏死细胞，细胞肿胀，胞浆内有空泡形成，胞

8、质嗜酸性增强，坏死细胞核呈梭形或三角形固缩，深染成蓝紫色。细胞间质水肿明显，呈团块状，纤维结构消失。 形态学结果（见图1）Company nameC 组 绝大多数椎体细胞保持正常形态，45层细胞结构完好。纤维结构清晰可辨。细胞间质无水肿表现，比较A组更显稀松，呈现脱水表现。 D、E、F组细胞层均存在受压表现，仅见34层细胞结构，排列散乱。虽然比较B组间质水肿有所改善，但纤维束样结构凌乱不清晰，并有断续现象。变性和坏死细胞数明显增多。Company name 图图1：各组小鼠海马：各组小鼠海马CA1区神经细胞的形态学改变区神经细胞的形态学改变 A A组组 假手术组假手术组 B B组组 缺血再灌注

9、损伤组缺血再灌注损伤组 C C组组 即刻甘露醇干预组即刻甘露醇干预组 D D组组 3030分钟甘露醇干预组分钟甘露醇干预组 E E组组 6060分钟甘露醇干预组分钟甘露醇干预组 F F组组 9090分钟甘露醇干预组分钟甘露醇干预组Company name 本课题成功复制了郗东锋报告的昆明小鼠脑缺血再灌注损害实验动物模型，该实验动物模型与其他同类研究的动物模型相比成本低廉，简单易行，成功率高，重复性好，能够获得相关研究结果，并能够进行脑缺血再灌注损伤后医学干预的评价研究。本课题实践结果与王雪红、邢春平等作者的报告一致。 讨讨 论论Company name 本实验选取小鼠对缺血最敏感的海马CA1区

10、为观察对象，采用甘露醇对小鼠脑缺血再灌注后的不同时间点进行医学干预。观察结果表明：再灌注即刻甘露醇干预可使小鼠海马CA1区细胞形态，组织结构接近正常，无间质水肿表现，而恢复灌注30min,1h,1.5h后甘露醇干预的效果不明显。证实早期给予甘露醇能够有效的逆转脑缺血再灌注损伤后细胞的变性水肿，但是再灌注30分钟后细胞水肿较为严重，再给予甘露醇救治基本无效，从而为临床心肺脑复苏合理用药时间提供理论依据。Company name 结结 论论根据本课题观察结果作者认为：1. 恢复血流灌注后血压梯度重新建立是细胞水肿形成的必备条件。再灌注早期及时应用甘露醇建立反相的渗透压梯度，可以有效防止脑缺血再灌注

11、后细胞水肿的形成；2. 神经细胞水肿是脑缺血再灌注损伤的始动环节，有效防止细胞水肿的形成可以避免过氧化物、钙离子超载等不可逆细胞损害机制的发生；3. 本观察组发现：再灌注30分钟后给与甘露醇效果不明显，似说明细胞水肿已经形成，多种细胞损害机制均已启动，再给予甘露醇救治基本无效；有待进一步研究证实。Company name参考文献参考文献1 李泽东,马静萍. 阿司匹林预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 J . 中西医结合心脑血管病杂志，2009，7（1）：56-57. 2 程谦涛,项洁,李继珍.辛伐他汀预处理对大鼠局灶性脑缺血不同灌注时间窗脑损伤的保护作用及机制研究 J . 徐州医学院学报，

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