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1、病原生物学教研室病原生物学教研室张莹张莹一、革兰氏染色一、革兰氏染色1 1、原理、原理G:肽聚糖层薄且缺五肽交联桥,交联度低,外:肽聚糖层薄且缺五肽交联桥,交联度低,外膜层含较多脂质,用乙醇等有机溶剂脱色时,外膜膜层含较多脂质,用乙醇等有机溶剂脱色时,外膜中类脂质融解,添加了细胞的通透性,薄而松散的中类脂质融解,添加了细胞的通透性,薄而松散的肽聚糖网不能阻挠结晶紫和碘复合物溶出,菌体呈肽聚糖网不能阻挠结晶紫和碘复合物溶出,菌体呈现复染后的红色。现复染后的红色。G:细胞壁厚肽聚糖网层多且交联致密,用脱色:细胞壁厚肽聚糖网层多且交联致密,用脱色剂处置时,肽聚糖层孔径减少,且不含类脂,通透剂处置时,
2、肽聚糖层孔径减少,且不含类脂,通透性降低,结晶紫和碘复合物结实结合在细胞壁上,性降低,结晶紫和碘复合物结实结合在细胞壁上,菌体呈现初染时的紫色。菌体呈现初染时的紫色。初染初染-媒染媒染-脱色脱色-复复染染2 2、步骤、步骤 1 1涂片涂片2 2枯燥枯燥3 3固定固定 取菌NS 初染:结晶紫初染:结晶紫1 1分钟,水冲甩干;分钟,水冲甩干;媒染:卢戈氏碘液媒染:卢戈氏碘液1 1分钟,水冲甩干;分钟,水冲甩干;脱色:脱色:95%95%酒精酒精3030秒钟,水冲甩干;秒钟,水冲甩干;复染:稀释复红复染:稀释复红1 1分钟,水冲甩干;分钟,水冲甩干;5 5滤纸吸干,油镜察看滤纸吸干,油镜察看4 4染色染色3 3、结果、结果柠檬色葡萄球菌:蓝紫色柠檬色葡萄球菌:蓝紫色G+ 变变 形形 杆杆 菌:菌: 红色红色G 变形杆菌革兰染色革兰染色 X1000 柠檬色葡萄球菌革兰染色革兰染色 X1000X10004、意义、意义鉴别细菌鉴别细菌指点临床用药指点临床用药研讨细菌的致病性研讨细菌的致病性G+G-G+:青霉素、头孢类青霉素、头孢类等等G-:链霉素、卡那霉素等G+:外毒素G-:内毒素 变形杆菌鞭毛变形杆菌鞭毛 鞭毛染色鞭毛染色 X1000 炭疽杆菌芽胞 革兰染色革兰染色 X1000 炭疽杆菌荚膜 革兰染色革兰染色 X1000绘绘 图图
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