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文档简介
1、缺氧环境肝癌SMMC-7721细胞ABCG2和HIF-l的表达及其关系研究背景 1、 ABCG2是近年来发现的三磷腺苷结合盒( ATP binding cassette,ABC)转运体蛋白家族新成员。研究表明,ABCG2参与了多种肿瘤的发生、发展及耐药,并能维持干细胞特性。缺氧诱导因子一1(hypoxia inducible factor-1 alpha,HIF-1)是目前发现的介导细胞低氧反应最关键的核转录因子,它可促进血管形成,维持细胞氧及代谢平衡,以保证肿瘤生长,并导致化疗耐受。 2、 本实验研究了在缺氧条件下人肝癌SMMC-7721细胞ABCG2和 HIF-1表达的变化,探索二者表达的
2、关系,并进一步探讨缺氧诱导ABCG2表达的可能机制,为抗肿瘤治疗提供理论依据。研究方法 1、SMMC-7721细胞在含10% 小牛血清的RPMI 1640培养基中培养,将其分为对照组及缺氧组。缺氧组又分为缺氧24h组、缺氧48h组、缺氧72h组。 2、收集细胞,检测HIF-1和ABCG2蛋白,选GAPDH为内参。 3、缺氧72 h组SMMC一7721细胞加入HIF-1抑制剂YC-1,按浓度分别为1.0 molL、2.0 molL、4.0 molL组,将不含YC一1的缺氧72的SMMC一7721细胞设为YC-1对照组。各组分别处理24 h后,用Western blot检测各组细胞中HIF-1、A
3、BCG2蛋白的含量。 4、用统计学方法分析。实验结果结论 缺 氧 环 境 中 , S M M C - 7 7 2 1 细 胞 A B C G 2 和 H I F - l 的 表 达 上并 随 时 间 延 长 而 增 加 , Y C - 1 抑 制 H I F - 1 后 可 有 效 下 调A B C G 2 的 表 达 。 本 实 验 表 明 缺 氧 时 S M M C - 7 7 2 细 胞 生 存耐 药 的 机 制 可 能 是 通 过 缺 氧 诱 导 H I F - l 的 表 达 而 实 现 , 后 者上调ABCG2的表达,增强了肿瘤细胞对缺氧环境的 适 应 能 力 及 化 疗 抵 抗 能 力 。 抑 制 H I F - 1 a A B C G 2 这 一
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