杭州免疫学会议发言ppt课件

1、静脉免疫球蛋白对早产儿脐血静脉免疫球蛋白对早产儿脐血T T淋巴细胞功能的影响淋巴细胞功能的影响 青岛大学医学院附属医院儿科 张秋业 常红 盛红玲 庄超引引 言言研究目的研究目的静脉免疫球蛋白静脉免疫球蛋白(IVIG)(IVIG)被广泛应用于感染性和免疫相关性疾病的治疗。被广泛应用于感染性和免疫相关性疾病的治疗。IVIGIVIG在新生儿尤其早产儿感染预防与重症感染治疗中疗效确切，但其安在新生儿尤其早产儿感染预防与重症感染治疗中疗效确切，但其安全性也日益受到关注。全性也日益受到关注。近年研究发现足月新生儿应用大剂量近年研究发现足月新生儿应用大剂量IVIGIVIG后，后，T T、B B淋巴细胞增殖反

2、应下淋巴细胞增殖反应下降。而有关早产儿应用降。而有关早产儿应用 IVIGIVIG对其免疫功能影响的研究资料较少。对其免疫功能影响的研究资料较少。本研究目的：采用体外实验，选择不同剂量本研究目的：采用体外实验，选择不同剂量IVIGIVIG作用于早产儿脐血单个作用于早产儿脐血单个核细胞，观察其对核细胞，观察其对ThTh细胞和调节性细胞和调节性T T细胞功能的影响，从免疫学角度探细胞功能的影响，从免疫学角度探讨讨IVIGIVIG早产儿用药安全性。早产儿用药安全性。 材料与方法材料与方法研究对象研究对象 选择2019年6月2019年12月在青岛大学医学院附属医院母孕3234周娩出的早产儿15例为研究对

3、象，出生体重1300g2450g，平均(1923349)g。其母亲分娩前4周内无明显感染史，未使用免疫增强或抑制剂等药物。所有受试的早产儿母亲均知情同意。材料与方法材料与方法研究方法研究方法标本采集标本采集CBMC制备制备CBMC培养培养 (设置设置A组、组、B组、组、C组）组） CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞细胞IFN-r、IL-4、IL-10、TGF-1材料与方法材料与方法分分 组组 IVIG的浓度选择的浓度选择 37、饱和湿度、饱和湿度、5%CO2条件培条件培养养72h A A组组（近生理状态组）（近生理状态组）B B组组（低剂量组）（低剂量组）C C组组（高剂量组）（高剂量

4、组）6mg/ml9mg/ml12mg/ml材料与方法材料与方法统计学处理统计学处理 采用SPSS17.0统计软件进行统计学处理。实验数据呈正态分布且方差齐，以xs表示。采用单因素方差分析，LSD检验，P0.05为差异有统计学意义，P0.01为差异有显著统计学意义。结结 果果组别组别 例数例数 IFN- IFN- IL-4IL-4A A组组15 15 175.68175.6886.82 86.82 29.0429.048.27 8.27 B B组组15 15 124.51124.5156.06 56.06 18.0118.015.72 5.72 C C组组15 15 32.5932.5926.8

5、226.82 14.4414.445.18 5.18 注：与注：与B B组和组和A A组比较组比较, P0.01, P0.01；与与B B组和组和C C组比较，组比较，P0.01P0.01结结 果果组别组别例数例数 IFN-/IL-4IFN-/IL-4A A组组15 15 5.615.612.38 2.38 B B组组15 15 8.228.224.214.21 C C组组15 15 2.412.411.721.72 注：注：与与B B组和组和A A组比较，组比较，P0.01P0.01；与；与A A组比较，组比较， P0.05.P0.05) 。结结 果果4、IVIG对早产儿对早产儿CBMC体外

6、产生体外产生IL-10和和TGF-1水水 平的影响：平的影响： C组组CBMC分泌分泌IL-10水平明显低于水平明显低于B组组(P0.05)，显著低于，显著低于A组组(P0.01)；B组组CBMC分泌分泌IL-10水平也明显低于水平也明显低于A组组(P0.05)。 C组组CBMC分泌分泌TGF-1水平显著低于水平显著低于A组组(P0.05)；B组组CBMC分泌分泌TGF-1水平明显低于水平明显低于A组组(P0.05)。 图图3 IVIG对早产儿对早产儿CBMC体外培体外培养后养后CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达的影响细胞表达的影响结结 果果图图4 IVIG对早产儿对早产儿CBMC

7、体外培体外培养后养后IL-10和和TGF-1水平影响水平影响讨讨 论论 IVIGIVIG除免疫替代外可通过多种机制发挥免疫除免疫替代外可通过多种机制发挥免疫调节作用、用于治疗多种免疫相关性疾病调节作用、用于治疗多种免疫相关性疾病 中和清除致病抗原，特别是超抗原中和清除致病抗原，特别是超抗原 改变免疫复合物的特性，减少免疫复合物改变免疫复合物的特性，减少免疫复合物的沉积的沉积 免疫封闭巨噬细胞和免疫封闭巨噬细胞和B B淋巴细胞，抑制巨噬淋巴细胞，抑制巨噬细胞的吞噬功能和细胞的吞噬功能和B B淋巴细胞的活化淋巴细胞的活化 恢复独特型恢复独特型- -抗独特型网络，抑制自身抗体抗独特型网络，抑制自身抗

8、体的产生的产生 抑制抑制T T淋巴细胞活化，减少各种细胞因子的淋巴细胞活化，减少各种细胞因子的产生等产生等 新生儿包括早产儿新生儿包括早产儿Thl/Th2Thl/Th2功能状态特点功能状态特点 足月儿足月儿T T淋巴细胞功能呈生理性低下状态，淋巴细胞功能呈生理性低下状态，且其且其ThTh细胞亚群功能发育不平衡，细胞亚群功能发育不平衡，Th2Th2类细胞类细胞功能相对占优势功能相对占优势 早产儿早产儿IFN-IFN-、IL-4IL-4的水平明显低于足月儿，的水平明显低于足月儿，以以IFN-IFN-更为突出更为突出 ，即仍然，即仍然Th2Th2亚群功能相对亚群功能相对占优势占优势 IVIGIVIG

9、对新生儿对新生儿T T细胞功能的影响：细胞功能的影响： 体外实验显示：体外实验显示：IVIG10mg/mlIVIG10mg/ml可以明可以明显抑制显抑制PHA-PPHA-P诱导的足月新生儿诱导的足月新生儿CBMCCBMC分分泌泌IFN-IFN-，也可以抑制，也可以抑制CBMCCBMC中中IL-4 IL-4 mRNAmRNA的表达；同时抑制的表达；同时抑制PHAPHA诱导的足月诱导的足月新生儿新生儿CBMCCBMC分泌分泌IL-10IL-10与与TGF-1TGF-1。 IVIGIVIG能抑制脂多糖诱导的新生儿单能抑制脂多糖诱导的新生儿单核巨噬细胞的活化，从而抑制其分泌核巨噬细胞的活化，从而抑制其

10、分泌IL-6IL-6，而，而IL-6IL-6能促进能促进T T细胞的活化及向细胞的活化及向ThlThl、Th2Th2分化，间接证明了分化，间接证明了IVIGIVIG对对T T细细胞尤其是胞尤其是ThlThl、Th2Th2细胞因子的抑制作细胞因子的抑制作用用 IVIG IVIG对新生儿肺炎似无明显疗效，大剂量使用对新生儿肺炎似无明显疗效，大剂量使用IVIGIVIG可可能因其至少短期内具有抑制能因其至少短期内具有抑制T T、B B淋巴细胞功能作用而淋巴细胞功能作用而加重新生儿期暂时免疫缺陷。加重新生儿期暂时免疫缺陷。 对极低出生体重儿过大剂量或短期内反复使用对极低出生体重儿过大剂量或短期内反复使用

11、IVIGIVIG预预防感染无明显疗效，而且可能加重暂时免疫低应答反防感染无明显疗效，而且可能加重暂时免疫低应答反应，影响细胞免疫的自然发育过程。应，影响细胞免疫的自然发育过程。 本实验研究结果：本实验研究结果： 与近似生理状态组比较，低剂量与近似生理状态组比较，低剂量IVIG组组CBMC分泌分泌IL-4显著降低，而显著降低，而IFN-变化轻变化轻微；较大剂量微；较大剂量IVIG组组IFN-和和IL-4的水平皆的水平皆明显降低，但以明显降低，但以IFN-降低更为显著降低更为显著 结果提示：结果提示：IVIG可抑制早产儿脐血可抑制早产儿脐血Thl、Th2细胞功能，并且与其剂量相关。低剂量细胞功能，

12、并且与其剂量相关。低剂量时主要抑制时主要抑制Th2细胞功能，较大剂量时细胞功能，较大剂量时Th1、Th2细胞均受抑，但以细胞均受抑，但以Th1细胞更为显著细胞更为显著 本实验研究结果显示：本实验研究结果显示： 早产儿早产儿CBMC经不同剂量经不同剂量IVIG干预后，其干预后，其CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表达率无显著差异。细胞表达率无显著差异。较大剂量较大剂量IVIG组组CBMC分泌分泌IL-10水平明显低于低剂量组水平明显低于低剂量组和近生理状态组，低剂量组也明显低于近生理状态组；和近生理状态组，低剂量组也明显低于近生理状态组；较大和低剂量组较大和低剂量组CBMC分泌分泌TGF

13、-1水平均明显低于近生水平均明显低于近生理状态组，但较大剂量组与低剂量组比较无显著性差异。理状态组，但较大剂量组与低剂量组比较无显著性差异。结果提示：结果提示：IVIG对早产儿对早产儿CBMC中天然中天然Treg细胞的数量细胞的数量并无影响并无影响 。 但但IVIG能抑制早产儿能抑制早产儿CBMC IL-10和和TGF-1的分泌。的分泌。IVIG浓度越高，浓度越高，IL-10分泌越少；而分泌越少；而TGF-1当当IVIG达到一达到一定浓度后其抑制分泌程度无进一步加重。定浓度后其抑制分泌程度无进一步加重。正常正常过敏体质伴炎症反应过敏体质伴炎症反应过敏体质未伴炎症反应过敏体质未伴炎症反应123T

14、H1/TH17/TH2/Treg细胞细胞 综合国内外文献和本研究结果：综合国内外文献和本研究结果： 早产儿应用较大剂量早产儿应用较大剂量IVIG对其对其T细胞功能细胞功能有明显影响，可进一步加重有明显影响，可进一步加重Th1/Th2失衡，失衡，抑制抑制Treg细胞功能，加重暂时免疫低应答细胞功能，加重暂时免疫低应答反应，影响细胞免疫的自然发育过程，可反应，影响细胞免疫的自然发育过程，可能增加日后变态反应性疾病的发生。提示能增加日后变态反应性疾病的发生。提示早产儿应用早产儿应用IVIG需选择适宜剂量。需选择适宜剂量。结结 论论 IVIGIVIG可抑制早产儿脐血可抑制早产儿脐血ThlThl、Th2Th2细胞功能，并且细胞功能，并且与其剂量相关。低剂量时主要抑制与其剂量相关。低剂量时主要抑制Th2Th2细胞功能，细胞功能，较大剂量时较大剂量时Th1Th1、Th2Th2细胞均受抑，但以细胞均受抑，但以Th1Th1细胞更细胞更为显著。为显著。 IVIGIVIG不能直接影响早产儿脐血天然不能直接影响早产儿脐血天然TregTreg细胞的数细胞的数量，但可以通过调节细胞因子量，但可以通过调节细胞因子IL-10IL-10和和TGF-1TGF-1的的分泌抑制分泌抑制TregTreg细胞的功能且有剂量依赖