第三章蛋白质化学

1、第一节第一节 蛋白质分子的组成成分蛋白质分子的组成成分第四节第四节 肽肽第二节第二节 氨基酸的性质氨基酸的性质第三节第三节 氨基酸的分离与鉴定氨基酸的分离与鉴定第五节第五节 蛋白质的分类蛋白质的分类第六节第六节 蛋白质的一级结构蛋白质的一级结构第七节第七节 蛋白质的高级结构蛋白质的高级结构第八节第八节 几种蛋白质的结构与功能几种蛋白质的结构与功能第九节第九节 蛋白质的结构与功能的关系蛋白质的结构与功能的关系第十节第十节 蛋白质的性质蛋白质的性质第十一节第十一节 蛋白质的分离、纯化与鉴定蛋白质的分离、纯化与鉴定一一. .蛋蛋 白白 质质 的的 元元 素素 组组 成成三三. .蛋白质的基本单位蛋白

2、质的基本单位氨基酸氨基酸 二二. .蛋蛋 白白 质质 的的 水水 解解每克样品中的含氮量每克样品中的含氮量6.256.25100 100 蛋白质含量（蛋白质含量（% %）蛋白质与糖、脂肪不同，除碳、氢、蛋白质与糖、脂肪不同，除碳、氢、氧外，还氧外，还含有氮元素。含有氮元素。生物体内的氮量可当作全部为蛋白质生物体内的氮量可当作全部为蛋白质所有，体内大多数所有，体内大多数蛋白质的含氮量接蛋白质的含氮量接近于近于16%16%，故可以通过测定生物样品故可以通过测定生物样品中的含氮量算出蛋白质含量中的含氮量算出蛋白质含量16%16%1 1 式中式中6.25 =6.25 =公式为：公式为：一一. .蛋蛋

3、白白 质质 的的 元元 素素 组组 成成三三. .蛋白质的基本单位蛋白质的基本单位氨氨 基基 酸酸 蛋白质是分子质量很大的一类高分子化合物，蛋白质与蛋白质是分子质量很大的一类高分子化合物，蛋白质与糖糖、脂肪不同之处在于蛋白质由脂肪不同之处在于蛋白质由一种基本单位一种基本单位组成。组成。组成蛋白质的基本单位组成蛋白质的基本单位 是是氨基酸氨基酸(amino acid (amino acid 简写为简写为AA),AA),结构如下结构如下H2 因此氨基酸的结构通式为：因此氨基酸的结构通式为：天然氨基酸都是天然氨基酸都是- -氨基酸氨基酸，式中式中R R表示不同的化学基团，表示不同的化学基团，R R基

4、不同则形成不同的氨基酸基不同则形成不同的氨基酸R RCHCHCOOHCOOHNHNH2 2三三. .蛋白质的基本单位蛋白质的基本单位氨氨 基基 酸酸 (一一)构成蛋白质的氨基酸构成蛋白质的氨基酸(二二)非蛋白氨基酸非蛋白氨基酸氨基酸是具有氨基的羧酸氨基酸是具有氨基的羧酸,其中氨基是其中氨基是连在与连在与羧基相邻的碳原子上羧基相邻的碳原子上。用希腊字母表示与羧基相邻的碳原子用希腊字母表示与羧基相邻的碳原子组成蛋白质的氨基酸有组成蛋白质的氨基酸有2020种种，名称和符号如下名称和符号如下:氨基酸氨基酸中性氨基酸中性氨基酸酸性氨基酸酸性氨基酸碱性氨基酸碱性氨基酸(一一)构成蛋白质的氨基酸构成蛋白质的

5、氨基酸2020种氨基酸按酸碱性质分为三类种氨基酸按酸碱性质分为三类: :氨基酸的简写符号名 称符号符号asn 和/或 Asp半胱氨酸（cysteine）谷氨酰胺（glutamine）谷 氨 酸 (glutamic acid）Gln 和/或 Glu甘氨酸（glycine）组氨酸（histidine）异亮氨酸（isoleucine）AlaArgAsnAspAsxCysGlnGluGlxGlyHisILeARNDBCQEZGHI亮氨酸 （leucine）赖氨酸 （lysine）甲 硫 氨 酸 （ 蛋 氨 酸 ）（methionine）苯丙氨酸（phenylalanine）脯氨酸 （proline）丝

6、氨酸 （serine）苏氨酸（threonine）色氨酸（tryptophan）酪氨酸 （tyrosine）缬氨酸 （valine）LeuLysMetPheProSerThrTrpTyrValLKMFPSTWYV氨 基 酸 的 简 写 符 号名 称符 号符 号丙 氨 酸 （ alanine）精 氨 酸 （ arginine）天 冬 酰 胺（ asparagine）天 冬 氨 酸 (aspartic acid）asn 和 /或 Asp半 胱 氨 酸 （ cysteine）谷 氨 酰 胺 （ glutamine）谷 氨 酸 (glutamic acid ）Gln 和 /或 Glu甘 氨 酸 （ g

7、lycine）组 氨 酸 （ histidine）异 亮 氨 酸 （ isoleucine）AlaArgAsnAspAsxCysG lnG luG lxG lyH isILeARNDBCQEZGHI亮 氨 酸 （ leucine）赖 氨 酸 （ lysine）甲 硫 氨 酸 （ 蛋 氨 酸 ）（ methionine）苯 丙 氨 酸 （ phenylalanine）脯 氨 酸 （ proline）丝 氨 酸 （ serine）苏 氨 酸 （ threonine）色 氨 酸 （ tryptophan）酪 氨 酸 （ tyrosine）缬 氨 酸 （ valine）LeuLysM etPhePro

8、SerThrTrpTyrValLKMFPSTWYV中性氨基酸是指含中性氨基酸是指含一氨基和一羧基一氨基和一羧基的氨基酸的氨基酸按侧链基团的不同，分为五类：按侧链基团的不同，分为五类：中性氨中性氨基酸基酸脂肪族氨基酸脂肪族氨基酸芳香族氨基酸芳香族氨基酸含羟基氨基酸含羟基氨基酸含硫氨基酸含硫氨基酸亚氨基酸亚氨基酸甘、丙、缬、甘、丙、缬、亮、异亮亮、异亮苯丙、酪、色苯丙、酪、色丝、苏丝、苏半胱、半胱、甲硫（蛋）甲硫（蛋）脯脯1.1.中性氨基酸中性氨基酸非极性氨基酸非极性氨基酸极性氨基酸极性氨基酸酰胺类氨基酸酰胺类氨基酸天胺、谷胺天胺、谷胺谷酰胺天冬酰胺苏氨酸丝氨酸谷酰胺天冬酰胺苏氨酸丝氨酸脯氨酸半胱

9、氨酸脯氨酸半胱氨酸甘氨酸丙氨酸缬氨酸亮氨酸异甘氨酸丙氨酸缬氨酸亮氨酸异亮氨酸酪氨酸甲硫氨酸苯丙氨酸亮氨酸酪氨酸甲硫氨酸苯丙氨酸色氨酸色氨酸上述五类氨基酸可按极性强弱排序：上述五类氨基酸可按极性强弱排序：要点要点1.1.非极性氨基酸非极性氨基酸2.2.极性氨基酸极性氨基酸主要为脂肪族和芳香族氨基酸主要为脂肪族和芳香族氨基酸主要为含羟基和含硫氨基酸主要为含羟基和含硫氨基酸1.1.中性氨基酸中性氨基酸谷氨酸天冬氨酸谷氨酸天冬氨酸酸性强弱为：酸性强弱为：2.2.酸性氨基酸酸性氨基酸含一氨基和两羧基的氨基酸称为酸性氨含一氨基和两羧基的氨基酸称为酸性氨基酸，有基酸，有谷氨酸和天冬氨酸谷氨酸和天冬氨酸两种两

10、种上述两种酸性氨基酸的羧基化后产生两上述两种酸性氨基酸的羧基化后产生两种中性酰胺：种中性酰胺：天冬酰胺和谷氨酰胺天冬酰胺和谷氨酰胺赖氨酸组氨酸精氨酸赖氨酸组氨酸精氨酸碱性强弱为：碱性强弱为：3.3.碱性氨基酸碱性氨基酸含含两氨基和一羧基两氨基和一羧基的氨基酸称为碱性氨的氨基酸称为碱性氨基酸，有基酸，有精氨酸，赖氨酸，组氨酸精氨酸，赖氨酸，组氨酸三种三种问题问题12020种氨基酸中有多少种极性氨基酸？种氨基酸中有多少种极性氨基酸？1.R-基不带电荷的基不带电荷的AA（中性（中性AA）：）：Ser、Thr、Cys、Asn、Gln、Pro 3.R-基带负电荷的基带负电荷的AA（酸性（酸性AA）：）：

11、Glu, Asp 2.R-基带正电荷的基带正电荷的AA（碱性（碱性AA）：）：Lys、Arg、His 极性极性AA共有共有11种：种：由于酸碱性氨基酸属于最强极性由于酸碱性氨基酸属于最强极性问题问题22020种氨基酸在水中的溶解性程度如何？种氨基酸在水中的溶解性程度如何？极性与溶解性关系为：极性与溶解性关系为：相似相溶相似相溶即极性物质溶于极性溶剂中，即极性物质溶于极性溶剂中，非极性物质溶于非极性溶剂非极性物质溶于非极性溶剂因此因此2020种氨基酸在水中的溶解性为种氨基酸在水中的溶解性为酸碱性氨基酸酸碱性氨基酸极性氨基酸极性氨基酸非极性氨基酸非极性氨基酸酸碱性氨基酸为最强极性，其次酸碱性氨基酸

12、为最强极性，其次为极性氨基酸和非极性氨基酸为极性氨基酸和非极性氨基酸一一. .氨基酸的光学活性和光吸收性质氨基酸的光学活性和光吸收性质二二. .氨基酸的解离和两性性质氨基酸的解离和两性性质三三. .氨氨 基基 酸酸 的的 化化 学学 反反 应应规定：规定： - - 氨基排布在不对称碳原子氨基排布在不对称碳原子左边的为左边的为L L型，在右边的为型，在右边的为D D型型. .H HC CNHNH2 2R RCOOHCOOHNHNH2 2C CH HR RCOOHCOOH L L氨基酸氨基酸 D D氨基酸氨基酸由结构可知，氨基酸的由结构可知，氨基酸的碳原子为不对称碳原子为不对称碳原子碳原子，故氨基

13、酸有立体构型和旋光异构体，故氨基酸有立体构型和旋光异构体. .如图：如图：1.1.光学活性光学活性要点要点从天然蛋白质分离得到的从天然蛋白质分离得到的氨基酸都是氨基酸都是L L氨基酸氨基酸 NHNH2 2C CH HH HCOOHCOOH甘氨酸甘氨酸2020种氨基酸中只有种氨基酸中只有甘氨酸甘氨酸的的R R基为氢原子。基为氢原子。因此甘氨酸的因此甘氨酸的碳原子不是不碳原子不是不对称碳原子，对称碳原子，甘氨酸没有甘氨酸没有DLDL构型构型故组成蛋白质的氨基酸在结构故组成蛋白质的氨基酸在结构上都为上都为L L- -氨基酸氨基酸要点要点1.1.光学活性光学活性共轭双键：指单双键交替的结构共轭双键：指

14、单双键交替的结构例例2.2.光吸收性质光吸收性质CHCH3 3CHCHCHCHCHCHCHCH2 21 1，3-3-二戊烯二戊烯苯苯氨基酸在可见光区都没有光吸收，在氨基酸在可见光区都没有光吸收，在紫外区紫外区只有色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸只有色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸具有光吸收具有光吸收能力能力. .因为这三种氨基酸有苯环（因为这三种氨基酸有苯环（共轭双键共轭双键）结构结构. .此性质此性质可用于鉴定此三种氨基酸可用于鉴定此三种氨基酸苯丙苯丙酪酪色色按酸碱的定义，由于氨基酸具有酸性的羧按酸碱的定义，由于氨基酸具有酸性的羧基和碱性的氨基，因此具有酸碱两性。基和碱性的氨基，因此具有酸碱两性。二二. .

15、氨基酸的解离和两性性质氨基酸的解离和两性性质1.1.氨基酸的解离氨基酸的解离2.2.氨基酸的等电点氨基酸的等电点R RCHCH NH NH2 2COOHCOOHR RCHCH NH NH2 2COOCOO- -R RCHCH NH NH3 3+ +COOHCOOH氨基酸在水溶液中既可以氨基酸在水溶液中既可以作为酸释作为酸释放质子放质子，带负电荷，带负电荷H H+ + + + 也可以也可以作为碱接受质子作为碱接受质子，带正电荷：，带正电荷：R RCHCH NH NH2 2COOHCOOH+ H+ H+ +1.1.氨基酸的解离氨基酸的解离故氨基酸具有两性，在水溶液中故氨基酸具有两性，在水溶液中以以

16、兼性离子形式兼性离子形式存在存在: :此时氨基酸净电荷为零此时氨基酸净电荷为零要点要点1.1.氨基酸的解离氨基酸的解离非电离式非电离式兼性离子兼性离子当氨基酸兼性离子处于当氨基酸兼性离子处于酸性环境酸性环境中时，氨中时，氨基酸可作为碱接受质子，从而基酸可作为碱接受质子，从而带正电荷带正电荷R RCHCH NH NH3 3+ +COOCOO- -R RCHCH NH NH3 3+ +COOCOO- -R RCHCH NH NH2 2COOCOO- -R RCHCH NH NH3 3+ +COOHCOOH反之，当氨基酸处于反之，当氨基酸处于碱性环境碱性环境时，时，可作为酸释放质子，从而可作为酸释放

17、质子，从而带负电荷带负电荷H H+ + H+ H+ +2.2.氨基酸的等电点氨基酸的等电点氨基酸兼性离子同氨基酸一样也具有两性氨基酸兼性离子同氨基酸一样也具有两性故故肯定存在某一肯定存在某一pHpH值，此时氨基酸的净电荷为零，值，此时氨基酸的净电荷为零，正负电荷相等正负电荷相等，氨基酸以兼性离子形式存在，氨基酸以兼性离子形式存在. .此时的此时的pHpH值称为值称为等电点等电点，用，用pIpI表示表示 定义：定义：使氨基酸所带使氨基酸所带正电荷和负电荷相等正电荷和负电荷相等，即净电荷为零时的即净电荷为零时的pHpH值称为等电点值称为等电点即氨基酸即氨基酸在酸性环境中带正电，在在酸性环境中带正电

18、，在碱性环境中带负电碱性环境中带负电即随着即随着pHpH值升高，氨基酸由带正电逐渐变为带负电值升高，氨基酸由带正电逐渐变为带负电2.2.氨基酸的等电点氨基酸的等电点pI = 1/2pI = 1/2（ pKpK1 1+ pK+ pK2 2）要点要点各种氨基酸的各种氨基酸的pKpK1 1和和pKpK2 2见表见表3-53-5，可据此算出各氨基酸的可据此算出各氨基酸的pIpI值值酸性氨基酸天冬氨酸酸性氨基酸天冬氨酸有三个解离基团：有三个解离基团：对含有三个解离基团的氨基酸，则有三个对含有三个解离基团的氨基酸，则有三个pKpK值值,此此时时pI值由兼性离子值由兼性离子(A A) )两侧的两侧的pKpK

19、值算出值算出NHNH3 3+ +CHCH CH CH2 2COOHCOOHCOOHCOOH解离过程为从解离过程为从正离子开始正离子开始，pKpK值小的值小的基团先解离，基团先解离，pKpK值大的基团后解离值大的基团后解离例例要点要点等电点的推导和计算等电点的推导和计算NHNH3 3+ +CHCH CH CH2 2COOHCOOHCOOHCOOHNHNH3 3+ +CHCH CH CH2 2COOCOO- -COOHCOOHNHNH3 3+ +CHCH CH CH2 2COOCOO- -COOCOO- -NHNH2 2CHCH CH CH2 2COOCOO- -COOCOO- -pKpK1 1p

20、KpK2 2pKpK3 3A AA A- -A A+ +A A2-2-pI=pI=pKpK1 1+ pK+ pK2 22 2则则解离方程为：解离方程为：= 1/2= 1/2（2.09 + 3.862.09 + 3.86）= 2.98= 2.98对对pKpK3 3的解离及的解离及A A2-2-离子离子的存在则忽略不计的存在则忽略不计等电点的推导和计算等电点的推导和计算环境环境 pH pH pIpI时，氨基酸带负电荷时，氨基酸带负电荷. pHpH与与pIpI相差越大，带电荷越多相差越大，带电荷越多环境环境 pH pH pIpI时，氨基酸带正电荷时，氨基酸带正电荷. . pHpH与与pIpI相差越大

21、，带电荷越多相差越大，带电荷越多引入等电点后，环境引入等电点后，环境 pHpH与氨基与氨基酸的带电关系可重新描述为：酸的带电关系可重新描述为：要点要点等电点的推导和计算等电点的推导和计算问题问题写出碱性氨基酸赖氨酸的解离写出碱性氨基酸赖氨酸的解离方程，以及方程，以及pIpI的计算公式？的计算公式？则碱性氨基酸为则碱性氨基酸为pI=pI=pKpK2 2+ pK+ pK3 32 2NHNH3 3+ +CHCH （CHCH2 2）4 4COOHCOOHNHNH3 3+ +NHNH3 3+ +CHCH （CHCH2 2）4 4COOCOO- -NHNH3 3+ +NHNH2 2CHCH （CHCH2

22、2）4 4COOCOO- -NHNH3 3+ +NHNH2 2CHCH （CHCH2 2）4 4COOCOO- -NHNH2 2pKpK1 1pKpK2 2pKpK3 3A AA A- -A A+ +A A2+2+故二式可合并为：故二式可合并为： 在在（4）式式中，中，分母的分母的A A释放质子，分子的释放质子，分子的A A- -接受质子接受质子在在（3）式式中，中，分母的分母的A A+ +释放质子，分子的释放质子，分子的A A接受质子接受质子A A+ +H H+ + + A + AK K1 1A ApKpK1 1+pH =pH =A A+ +比较两式比较两式A AA A- -pKpK2 2+

23、pH =pH = A AA A- - + H + H+ +K K2 2（3）式）式（4）式）式氨基酸氨基酸pH的计算的计算因此已知因此已知了解离基团，质子供了解离基团，质子供体和受体的浓度体和受体的浓度，就可算出此，就可算出此时氨基酸溶液的时氨基酸溶液的pHpH值值 式中式中pKpK的选择取决于氨基酸的选择取决于氨基酸由由COOHCOOH还是还是NHNH3 3+ +解离解离是是COOHCOOH解离则选择解离则选择pKpK1 1 ，是是NHNH3 3+ +解离则选择解离则选择pKpK2 2氨基酸氨基酸pH的计算的计算质子供体质子供体质子受体质子受体pK+pK+pH =pH =可知由可知由COOC

24、OO- -接受质子，解离常数应接受质子，解离常数应选择选择pKpK1 1，查表，查表pKpK1 1 =2.34 =2.34R RCHCH NH NH3 3+ +COOCOO- -R RCHCH NH NH3 3+ +COOHCOOH+ H+ H+ +解：处于等电点时丙氨酸为兼性解：处于等电点时丙氨酸为兼性离子离子A A , ,故由故由A A来接受质子来接受质子方程为方程为 问题问题向向1L1L浓度为浓度为1mol/L1mol/L处于等电点的丙氨酸溶液中加处于等电点的丙氨酸溶液中加入入0.4mol0.4mol的的HClHCl（体积忽略），问溶液（体积忽略），问溶液pHpH为多少为多少? ?= 2

25、.52= 2.52= 2.34 += 2.34 +0.40.40.60.6=pKpK1 1+A A+ +A AA A+ H+ H+ +A A+ + 反应前反应前1 10.40.40 0反应平衡时反应平衡时1-0.41-0.40 00.40.4故故pHpH =pKpK1 1+质子供体质子供体质子受体质子受体脯氨酸和羟脯氨酸脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应与茚三酮反应不释放不释放NHNH3 3直接直接生成黄色化合物生成黄色化合物此反应是氨基酸的特异反应，此反应是氨基酸的特异反应，可用于定性定量测定可用于定性定量测定茚三酮在微酸性溶液中与氨基酸加热，发茚三酮在微酸性溶液中与氨基酸加热，发生氧化脱羧、生氧

26、化脱羧、 脱氨作用脱氨作用生成蓝紫色化合物生成蓝紫色化合物 茚三酮反应茚三酮反应（三）由氨基和羧基同时参与的反应（三）由氨基和羧基同时参与的反应氨基酸的侧链基团具有一些特殊性质与氨基酸的侧链基团具有一些特殊性质与反应，尤其是个具特殊的颜色反应，这反应，尤其是个具特殊的颜色反应，这些反应些反应常用作各种氨基酸的测定常用作各种氨基酸的测定一些侧链基团的反应和用途见下表一些侧链基团的反应和用途见下表（四）由（四）由R R基参与的反应基参与的反应表表3-2 氨基酸侧链基团的部分反应氨基酸侧链基团的部分反应 R R基名称基名称化学反应化学反应 用途用途 苯环苯环 （苯丙氨酸）（苯丙氨酸）黄色反应：与黄色

27、反应：与HNOHNO3 3作用产作用产生黄色物质生黄色物质鉴定苯丙氨酸鉴定苯丙氨酸 酪氨酸酪氨酸 酚基酚基 （酪氨酸）（酪氨酸）MillonMillon反应：反应：与与HNOHNO3 3 HgNOHgNO3 3反应呈红色反应呈红色鉴定酪氨酸鉴定酪氨酸吲哚基（色氨吲哚基（色氨酸）酸）乙醛酸反应：紫红色乙醛酸反应：紫红色鉴定色氨酸鉴定色氨酸胍基胍基 （精氨（精氨酸）酸）坂口反应：产生红色坂口反应：产生红色作精氨酸的测作精氨酸的测定定咪唑基咪唑基 （组氨酸）（组氨酸）PaulyPauly反应：与重氮盐生反应：与重氮盐生成棕红色成棕红色组氨酸的测定组氨酸的测定巯基巯基 （半胱氨酸）（半胱氨酸）亚硝基亚

28、铁氰酸钠反应：亚硝基亚铁氰酸钠反应：生成红色生成红色作半胱氨酸和作半胱氨酸和胱氨酸测定胱氨酸测定一一. .层层 析析 法法三三. .氨基酸的显色反应氨基酸的显色反应二二. .电电 泳泳 法法此方法此方法以滤纸为支持物以滤纸为支持物，以滤纸纤维所吸，以滤纸纤维所吸附的水为固定相，以水饱和的有机溶剂为附的水为固定相，以水饱和的有机溶剂为移动相移动相.将氨基酸的混合样品点于滤纸上将氨基酸的混合样品点于滤纸上滤纸层析滤纸层析当有机溶剂经过样品时，当有机溶剂经过样品时，各组分氨基酸就在水和各组分氨基酸就在水和有机相中分配有机相中分配.由于由于水被固定而有机相不断前进，水被固定而有机相不断前进，不同氨基酸

29、在水和有机相中的不同氨基酸在水和有机相中的分配情况分配情况（即（即溶解溶解度度）不同，）不同，则各氨基酸随有机相前进的速度就不则各氨基酸随有机相前进的速度就不一样一样，经一定时间后，即可分离，经一定时间后，即可分离.分配系数分配系数 =溶质在水中的溶解度溶质在水中的溶解度溶质在有机溶剂中的溶解度溶质在有机溶剂中的溶解度分配情况用分配系数表示分配情况用分配系数表示：由于混合物中各组分的分配系数不同，由于混合物中各组分的分配系数不同，经过经过一定时间的一定时间的多次分配多次分配后，各组分即后，各组分即可完全分开可完全分开滤纸层析滤纸层析各种物质在层析中前进的速率可用各种物质在层析中前进的速率可用R

30、fRf（比移值）（比移值）来表示来表示 原点到溶剂前沿的距离原点到溶剂前沿的距离原点到层析点中心的距离原点到层析点中心的距离Rf Rf =样品混合液样品混合液（原点）（原点）溶剂前沿溶剂前沿层析点中心层析点中心原点到层原点到层析点中心析点中心的距离的距离原点到溶剂原点到溶剂前沿的距离前沿的距离滤纸层析滤纸层析则氨基酸的分离即取决于氨基酸的在则氨基酸的分离即取决于氨基酸的在有机相和水相中的溶解度有机相和水相中的溶解度. 非极性氨基酸易溶于有机溶剂，非极性氨基酸易溶于有机溶剂，前进速度快，前进速度快，RfRf 值大值大.故非极性越强，故非极性越强，移动距离越远，移动距离越远，RfRf值越大值越大

31、极性氨基酸易溶于水，前进速极性氨基酸易溶于水，前进速度慢，度慢， RfRf值小值小.故极性越强，故极性越强， 移动移动距离越短，距离越短，RfRf值值越小越小要点要点因此因此RfRf值值的不同导致氨基酸的分离，的不同导致氨基酸的分离， RfRf值值越大，说越大，说明该物质前进速度越快，即在有机相中溶解度越大明该物质前进速度越快，即在有机相中溶解度越大滤纸层析滤纸层析故滤纸层析的分离规律如下：滤纸从下至上故滤纸层析的分离规律如下：滤纸从下至上非极性氨基酸非极性氨基酸极性氨基酸极性氨基酸酸碱性氨基酸酸碱性氨基酸混合氨基酸样品混合氨基酸样品滤纸层析滤纸层析问题问题纸层析分离丙、精、亮、丝、苏氨酸时，

32、纸层析分离丙、精、亮、丝、苏氨酸时，各氨基酸分离结果如何？各氨基酸分离结果如何？( (滤纸从上到下滤纸从上到下) )由前述氨基酸分类由前述氨基酸分类精氨酸为碱性氨基酸精氨酸为碱性氨基酸则则RfRf值大小次序为值大小次序为亮氨酸亮氨酸精氨酸精氨酸丝氨酸丝氨酸丙氨酸丙氨酸苏氨酸苏氨酸丝、苏氨酸为极性氨基酸丝、苏氨酸为极性氨基酸丙、亮氨酸为非极性氨基酸丙、亮氨酸为非极性氨基酸则分离结果按滤纸从上到下依次为则分离结果按滤纸从上到下依次为:亮氨酸亮氨酸,丙氨酸丙氨酸,苏氨酸苏氨酸,丝氨酸丝氨酸,精氨酸精氨酸离子交换层析是用一种离子交换树脂填装于柱离子交换层析是用一种离子交换树脂填装于柱内进行层析的方法内

33、进行层析的方法.有有阳离子树脂阳离子树脂和阴离子树脂和阴离子树脂两种。阳离子树脂含有酸性基两种。阳离子树脂含有酸性基COOHCOOH或或SOSO3 3H H ，可，可释放释放H H+ + ， H H+ +可和溶液中其他阳离可和溶液中其他阳离 子发生交换子发生交换，使阳离子结合到树脂上去。使阳离子结合到树脂上去。2.离子交换层析离子交换层析由于由于各种氨基酸各种氨基酸PIPI值和大小不同值和大小不同，故在同一，故在同一pHpH下所带电荷不同，下所带电荷不同，与树脂的亲和能力也不与树脂的亲和能力也不同同，当，当pHpH改变时，则改变时，则各种氨基酸因洗脱顺序各种氨基酸因洗脱顺序不同而分离不同而分离

34、阳离子树脂阳离子树脂层析分为层析分为上样、交换、洗上样、交换、洗脱脱三个步骤三个步骤 极性相同时，分子量小的先洗下极性相同时，分子量小的先洗下 对中性氨基酸，对中性氨基酸，非极性氨基酸与树脂非极性氨基酸与树脂的亲和力大，则后被洗下的亲和力大，则后被洗下；极性氨基酸与；极性氨基酸与树脂的亲和力小，则先被洗下树脂的亲和力小，则先被洗下 在酸性环境下，在酸性环境下，碱性氨基酸碱性氨基酸PIPI最大，带电最最大，带电最多多，与酸根结合力最强，故，与酸根结合力最强，故最后被洗下最后被洗下。酸性氨酸性氨基酸基酸pIpI最小，所带电荷最少最小，所带电荷最少，所以，所以最先被洗下最先被洗下；对对阳离子交换层析

35、阳离子交换层析具有如下规律具有如下规律2.离子交换层析离子交换层析则阳离子交换层析的则阳离子交换层析的洗脱顺序洗脱顺序先后如下：先后如下：要点要点酸性氨基酸酸性氨基酸极性氨基酸极性氨基酸非极性氨基非极性氨基酸酸碱性氨基酸碱性氨基酸2.离子交换层析离子交换层析问题问题以阳离子树脂分离天冬、丙、精、以阳离子树脂分离天冬、丙、精、亮、丝氨酸，则洗脱顺序如何？亮、丝氨酸，则洗脱顺序如何？五种氨基酸中五种氨基酸中天冬氨酸为酸性氨基酸天冬氨酸为酸性氨基酸精氨酸为碱性氨基酸精氨酸为碱性氨基酸丝氨酸为极性氨基酸丝氨酸为极性氨基酸丙、亮为非极性氨基酸，亮氨酸丙氨酸丙、亮为非极性氨基酸，亮氨酸丙氨酸故洗脱顺序为：

36、故洗脱顺序为：天冬氨酸天冬氨酸丝氨酸丝氨酸丙氨酸丙氨酸亮氨酸亮氨酸精氨酸精氨酸由前述氨基酸分类由前述氨基酸分类电泳法是利用电泳法是利用带电质点在电场中移动的带电质点在电场中移动的方向和速度的不同方向和速度的不同而进行分离的方法而进行分离的方法二二. .电电 泳泳 法法 定义：定义：电泳是指带电质点在电场中向电泳是指带电质点在电场中向电荷相反方向移动的现象电荷相反方向移动的现象带电质点在电场中受静电引力向电荷相反带电质点在电场中受静电引力向电荷相反方向移动，方向移动，引力与质点所带电荷成正比引力与质点所带电荷成正比同时质点受介质阻力同时质点受介质阻力，阻力与质点大小成反比阻力与质点大小成反比由于

37、混和样品中由于混和样品中各组分的各组分的大小和所带电荷不同大小和所带电荷不同，因，因此利用此利用移动速度和方向的移动速度和方向的不同可以将各组分分开不同可以将各组分分开+电场电场二二. .电电 泳泳 法法电泳时采用纤维薄膜或凝胶电泳时采用纤维薄膜或凝胶作为介质作为介质,可可垂直或水平电泳垂直或水平电泳当两种氨基酸的当两种氨基酸的pIpI值相差很小（值相差很小（0.010.01）时，移）时，移动速度取决于分子量，分子量越小，移动越快动速度取决于分子量，分子量越小，移动越快 环境环境pHpHpIpI时时，氨基酸带正电荷，氨基酸带正电荷，向电场负极向电场负极移动，移动， pHpH和和pIpI相差越大

38、，相差越大，带电越多带电越多，移动越快，移动越快 环境环境pHpHpIpI时时，氨基酸带负电荷，氨基酸带负电荷，向电场正极向电场正极移动移动， pHpH和和pIpI相差越大，相差越大，带电越多带电越多，移动越快，移动越快氨基酸的电泳速度取决于带电多少和分子氨基酸的电泳速度取决于带电多少和分子量大小，具有如下规律：量大小，具有如下规律：要点要点二二. .电电 泳泳 法法问题问题以下氨基酸在以下氨基酸在pH=4pH=4条件下电泳条件下电泳时，电泳行为和次序如何？时，电泳行为和次序如何？缬氨酸，谷氨酸，赖氨酸，亮氨酸，丝氨酸缬氨酸，谷氨酸，赖氨酸，亮氨酸，丝氨酸pIpI值分别为值分别为5.975.9

39、73.223.229.749.745.985.985.685.68谷氨酸谷氨酸pIpH，带负电荷，向电场正极移动，带负电荷，向电场正极移动缬、赖、亮、丝缬、赖、亮、丝pIPh，带正电荷，向负极移动，带正电荷，向负极移动到达电场负极的次序为：到达电场负极的次序为：赖氨酸赖氨酸缬氨酸缬氨酸亮氨酸亮氨酸丝氨酸丝氨酸而缬氨酸和亮氨酸而缬氨酸和亮氨酸pIpI值相差不大值相差不大,分子量分子量亮氨酸大于缬氨酸亮氨酸大于缬氨酸一一. .肽肽 的的 结结 构构二二. .天天 然然 活活 性性 肽肽 定义：定义：由两个以上的氨基酸通过由两个以上的氨基酸通过肽键肽键连接连接起来的化合物，称为肽起来的化合物，称为肽

40、肽是由氨基酸通过肽是由氨基酸通过固定方式固定方式连接而成的化合物，连接而成的化合物，可由可由蛋白质水解产生，也有天然存在的肽蛋白质水解产生，也有天然存在的肽 一一. .肽肽 的的 结结 构构 两个以上氨基酸形成肽时，是由两个以上氨基酸形成肽时，是由一个氨基酸一个氨基酸的的-氨基和另一个氨基酸的氨基和另一个氨基酸的-羧基缩合失去一羧基缩合失去一分子水而形成的分子水而形成的，所生成的化学键叫，所生成的化学键叫肽键肽键肽键的结构式肽键的结构式应应包括形成包括形成肽键肽键的的四个原子，且四个原子，且H和和O呈反式排列呈反式排列C CN NH HO O即即肽键肽键书写时通常将书写时通常将N N末端写在左

41、，末端写在左，C C末端写在右末端写在右H H2 2N NCHCHCOCONHNHCHCHCOCONHNHCHCHCOOHCOOH R R1 1 R R3 3R R2 2丝丝甘甘苏苏每一个肽的一端都有一个每一个肽的一端都有一个游离的游离的-氨基，称氨基，称为氨基末端（为氨基末端（N N 末端末端），另一端有一个），另一端有一个游离游离的的-羧基，称为羧基末端（羧基，称为羧基末端（C C末端）末端） 肽键肽键要点要点N N末端末端C C末端末端一一. .肽肽 的的 结结 构构（一）谷胱甘肽（一）谷胱甘肽谷胱甘肽是一种三肽，广泛存在谷胱甘肽是一种三肽，广泛存在于动植物和微生物细胞内，在体于动植物和

42、微生物细胞内，在体内的氧化还原反应中起重要作用内的氧化还原反应中起重要作用谷胱甘肽由谷胱甘肽由L L谷氨酸、谷氨酸、 L L半胱氨酸和半胱氨酸和甘氨酸甘氨酸组成，因含有巯基组成，因含有巯基SHSH，常简写，常简写为为G GSHSH，可参与氧化还原反应，可参与氧化还原反应2G2GSHSHG GS SS SG G-2H-2H+2H+2H二二. .天然活性肽天然活性肽因此因此G GSHSH的巯基可作为体内的还原剂保护某些的巯基可作为体内的还原剂保护某些蛋白质和酶的巯基免遭一些有机毒物的氧化蛋白质和酶的巯基免遭一些有机毒物的氧化三三. .蛋白质的一级结构的测定蛋白质的一级结构的测定测定蛋白质的测定蛋白

43、质的 氨基酸顺序步骤如下：氨基酸顺序步骤如下：肽链末端分析，确定蛋白质肽链末端分析，确定蛋白质由几条肽链组成由几条肽链组成测定各个片段的测定各个片段的氨基酸的顺序氨基酸的顺序测定肽链的氨基酸测定肽链的氨基酸组成（如前述）组成（如前述）将肽链水解为小片段并分离将肽链水解为小片段并分离拆开蛋白质的几条拆开蛋白质的几条肽链并分离肽链并分离拼凑出整个肽链的顺序拼凑出整个肽链的顺序（一）肽链末端分析（一）肽链末端分析一条肽链只具有一个一条肽链只具有一个N N末端和末端和 C C 末末端，故分析肽链末端氨基酸的数目可确端，故分析肽链末端氨基酸的数目可确定蛋白质由几条肽链构成）。肽链末端定蛋白质由几条肽链构

44、成）。肽链末端分析包括分析包括N N末端分析末端分析和和C C末端分析末端分析F FNONO2 2O O2 2N N二硝基氟苯法（二硝基氟苯法（DNFBDNFB法法) )（二硝基氟苯）二硝基氟苯）1. N1. N末端分析末端分析所得的所得的DNPDNP氨基酸为黄色氨基酸为黄色，可用，可用乙醚抽提乙醚抽提。然后用。然后用纸层析法定性纸层析法定性DNFBDNFB可与肽链可与肽链N N末端的自由氨基反应，生成末端的自由氨基反应，生成硝基苯衍生物称为硝基苯衍生物称为DNPDNP肽链，其中肽链，其中DNFBDNFB与氨与氨基的键比肽键稳定，故用酸水解时，肽键全基的键比肽键稳定，故用酸水解时，肽键全被破坏

45、，生成被破坏，生成一个一个DNPDNP氨基酸和其余所有氨氨基酸和其余所有氨基酸的混合物基酸的混合物苯异硫睛法苯异硫睛法(EdmanEdman法法)所得所得PTHPTH氨基酸用氨基酸用乙酸乙酯乙酸乙酯抽提抽提后，可用后，可用纸层析鉴定纸层析鉴定优点：用优点：用PITCPITC法法得到的剩余肽链，还可重复应得到的剩余肽链，还可重复应用此法，测定递减一位的氨基酸，以至测定整用此法，测定递减一位的氨基酸，以至测定整个片段的顺序，个片段的顺序，这种方法叫这种方法叫EdmanEdman法。法。现已有现已有根据此原理设计的根据此原理设计的氨基酸顺序自动分析仪氨基酸顺序自动分析仪1. N1. N末端分析末端分

46、析苯异硫睛（苯异硫睛（PITCPITC）与肽链与肽链N N末端的自由氨基反末端的自由氨基反应，形成苯氨基硫甲酰衍生物，简称应，形成苯氨基硫甲酰衍生物，简称PTCPTC肽链，肽链， PTCPTC肽链在酸性溶液中环化得肽链在酸性溶液中环化得PTHPTH氨基酸氨基酸和少和少一个一个N N末端氨基酸的肽链末端氨基酸的肽链肼解法肼解法2. C C 末端分析末端分析肼解下来的肼解下来的C C 末端末端氨基酸借氨基酸借DNFBDNFB作作用转变为用转变为黄色的黄色的DNPDNP氨基酸氨基酸，然后然后用用乙醚抽提并用层析鉴定乙醚抽提并用层析鉴定多肽与肼在无水条件下加热可断裂所多肽与肼在无水条件下加热可断裂所有

47、肽键，除有肽键，除C C 末端末端氨基酸外，其他氨基酸外，其他氨基酸都变成相应的酰肼衍生物氨基酸都变成相应的酰肼衍生物 羧肽酶是一种专门水解肽链羧肽酶是一种专门水解肽链C C 末端末端氨基酸的蛋白水解酶，不同的羧肽酶氨基酸的蛋白水解酶，不同的羧肽酶有不同作用方式。有不同作用方式。常用羧肽酶有两种常用羧肽酶有两种羧肽酶羧肽酶B B：只水解释放肽链：只水解释放肽链C C末末端为端为Arg(Arg(精精),Lys(),Lys(赖赖) )的氨基酸的氨基酸羧肽酶羧肽酶A A：除肽链：除肽链C C末端为末端为Pro(Pro(脯脯),Arg(),Arg(精精),Lys(),Lys(赖赖) )氨基酸氨基酸外，

48、外，能水解释放能水解释放 C C末端其他氨基酸末端其他氨基酸 羧肽酶法羧肽酶法要点要点2. C C 末端分析末端分析(二）肽链的拆开和分离二）肽链的拆开和分离由蛋白质由蛋白质N N末端数目可知蛋白质末端数目可知蛋白质由几条肽链组成，由几条肽链组成，故须把肽链分离故须把肽链分离,再分别测定每条肽链的顺序再分别测定每条肽链的顺序肽链间通常由肽链间通常由二硫键连接，故须把二硫键二硫键连接，故须把二硫键打开使肽链分离。打开使肽链分离。二硫键是一种二硫键是一种共价键共价键，常用方法为常用方法为氧化还原法氧化还原法非共价键非共价键的如氢键、离子键、疏水的如氢键、离子键、疏水键、范德华力键、范德华力4种，可

49、用种，可用尿素或盐酸尿素或盐酸胍胍等有机溶液来拆分。等有机溶液来拆分。S SS SS SS S C C C C N N N N SHSHSHSH C C N N C C N N HSHSHSHS+SCHSCH2 2COOHCOOHSCHSCH2 2COOHCOOH C C N N C C N N HOOCCHHOOCCH2 2S SHOOCCHHOOCCH2 2S S+HOCHHOCH2 2CHCH2 2SHSH（巯基乙醇）（巯基乙醇）ICHICH2 2COOHCOOH（碘醋酸）（碘醋酸）氧化还原法：氧化还原法： 通常用通常用巯基乙醇巯基乙醇处理，处理，然后用然后用碘醋酸碘醋酸保护还原生成的半

50、胱氨酸保护还原生成的半胱氨酸的巯基，防止被重新氧化的巯基，防止被重新氧化（三）将肽链水解为小片段并分离（三）将肽链水解为小片段并分离2.若肽链含氨基酸很多，则须将肽链分解若肽链含氨基酸很多，则须将肽链分解为几个小片段，测定片段顺序为几个小片段，测定片段顺序肽链水解的肽链水解的的方法有以下两种：的方法有以下两种：溴化氰裂解溴化氰裂解和和酶解法酶解法。多肽经部分水解产生的大小肽段，可应用多肽经部分水解产生的大小肽段，可应用层析和电泳的方法加以分离提纯层析和电泳的方法加以分离提纯1.若肽链较短，则可用前述若肽链较短，则可用前述EdmanEdman法法直接测序，但直接测序，但EdmanEdman法最多

51、能测定几法最多能测定几十十 个（个（60607070）氨基酸）氨基酸HNHNCHCHCOCONHNHCHCHCOCONHNHCHCHCOCO R R1 1 R R2 2R R3 3胰蛋白酶：胰蛋白酶： R R1 1= Lys= Lys（赖）（赖） ArgArg（精）（精）胃蛋白酶：胃蛋白酶： R R1 1和和R R2 2 = Phe = Phe（苯丙），（苯丙），LeuLeu（亮）（亮）, ,TrpTrp（色），（色），TyrTyr（酪）（酪）弹性蛋白酶弹性蛋白酶:R R1 1 = Ala, Val,Leu= Ala, Val,Leu溴化氰溴化氰:R R1 1 = Met= Met作用点作用点

52、糜蛋白酶糜蛋白酶:R R1 1 = Phe, Trp,Tyr= Phe, Trp,Tyr溴化氰能切断溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸（肽链中甲硫氨酸（MetMet）羧基端的肽键羧基端的肽键，产物为，产物为C C末端都是甲末端都是甲硫氨酸的肽片段硫氨酸的肽片段（肽链（肽链C C末端除外）末端除外）1. 溴化氰裂解溴化氰裂解作用点作用点HNHNCHCHCOCONHNHCHCHCOCONHNHCHCHCOCO R R1 1 R R2 2R R3 3R R1 1：甲硫氨酸基团：甲硫氨酸基团CHCH2 2CHCH2 2S SCHCH3 3 酶解法采用蛋白酶水解，不同的蛋白水酶解法采用蛋白酶水解，不同的蛋白水解

53、酶作用点不同，产生的片段大小和末解酶作用点不同，产生的片段大小和末端均不一样，更容易用于肽链的分析。端均不一样，更容易用于肽链的分析。 常用的蛋白酶有：常用的蛋白酶有：胰蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶糜蛋白酶和弹性蛋白酶和弹性蛋白酶2. 酶解法酶解法胰蛋白酶：胰蛋白酶： 只切断肽链中只切断肽链中赖氨酸赖氨酸(Lys)Lys)和精氨酸和精氨酸(Arg)Arg)的羧基端肽键的羧基端肽键，产生以，产生以LysLys或或ArgArg为为C C 末端的末端的肽片段肽片段糜蛋白酶糜蛋白酶:切断切断含苯环氨基酸含苯环氨基酸（苯丙（苯丙Phe,Phe,色色Trp,Trp,酪酪TyrTyr）的羧

54、基端肽键的羧基端肽键，产生以，产生以上述氨基酸为为上述氨基酸为为C C末端的肽片段末端的肽片段胃蛋白酶胃蛋白酶：要求被断裂键要求被断裂键两侧的残基都是两侧的残基都是疏水性氨基酸疏水性氨基酸，如，如苯丙苯丙PhePhe，色，色Trp,Trp,亮亮 LeuLeu弹性蛋白酶弹性蛋白酶:切断切断小分子疏水性氨基酸小分子疏水性氨基酸（丙（丙Ala,Ala,亮亮Leu,Leu,缬缬Val)Val)的羧基端肽键的羧基端肽键，产生以，产生以上述氨基酸为为上述氨基酸为为C C末端的肽片段末端的肽片段可用可用EdmanEdman法法测定片段的氨基酸顺测定片段的氨基酸顺序，再推断出整个多肽链的顺序序，再推断出整个多

55、肽链的顺序（四）测定每一片段的氨基酸顺序（四）测定每一片段的氨基酸顺序但有时肽链的但有时肽链的末端氨基酸与片段切末端氨基酸与片段切口的氨基酸相同时口的氨基酸相同时，则不能一次推，则不能一次推断出肽链的顺序。断出肽链的顺序。 此时此时需用几种方需用几种方法来断裂多肽样品，产生法来断裂多肽样品，产生几套片段几套片段，通过比较片段的切口重叠情况来推通过比较片段的切口重叠情况来推断出氨基酸顺序断出氨基酸顺序则该多肽的氨基酸顺序为：则该多肽的氨基酸顺序为：苏苏亮亮谷精谷精苯丙苯丙N N丙丙酪酪C C赖赖某多肽经测定某多肽经测定N N末端为丙氨酸，末端为丙氨酸，C C 末端为酪末端为酪氨酸，经氨酸，经胰蛋

56、白酶胰蛋白酶水解产生三个片段，一个含水解产生三个片段，一个含有谷，丙，精氨酸，第二个片段含亮，赖，苏有谷，丙，精氨酸，第二个片段含亮，赖，苏氨酸，此片段与氨酸，此片段与DNFBDNFB反应得反应得DNPDNP苏氨酸，第三个苏氨酸，第三个片段含有酪，苯丙氨酸。判断此多肽顺序片段含有酪，苯丙氨酸。判断此多肽顺序问题问题则通过片段重叠法推得此多肽顺序为：则通过片段重叠法推得此多肽顺序为：亮亮某多肽经测定某多肽经测定N N末端为丙氨酸，末端为丙氨酸，C C末端为酪氨末端为酪氨酸，经酸，经胰蛋白酶胰蛋白酶水解为四个片段，顺序分别为：水解为四个片段，顺序分别为：丙酪苏赖，缬苯丙丝精，谷酪，丙亮精。丙酪苏赖

57、，缬苯丙丝精，谷酪，丙亮精。若将此多肽经若将此多肽经糜蛋白酶糜蛋白酶水解，产生四个片段，顺序水解，产生四个片段，顺序分别为：丙亮，苏赖缬苯丙，精丙酪，丝精谷酪分别为：丙亮，苏赖缬苯丙，精丙酪，丝精谷酪N N 丙丙酪酪C C谷谷丝精丝精缬苯丙缬苯丙苏赖苏赖丙酪丙酪精精问题问题一一. .蛋白质各级结构的概念蛋白质各级结构的概念二二. .构型与构象构型与构象三三. .蛋白质的二级结构蛋白质的二级结构四四. .超二级结构和结构域超二级结构和结构域五五. .蛋白质的三级结构蛋白质的三级结构六六. .蛋白质的四级结构蛋白质的四级结构七七. .蛋白质一级结构对高级结构的影响蛋白质一级结构对高级结构的影响一一

58、. .蛋白质各级结构的概念蛋白质各级结构的概念蛋白质具有不同的结构层次，分别为蛋白质具有不同的结构层次，分别为一级结构、二级结构、三级结构和四一级结构、二级结构、三级结构和四级结构级结构。其中其中一级结构称为初级结构一级结构称为初级结构，二、三、四级结构称为高级结构。二、三、四级结构称为高级结构。各各级结构的级结构的形状和维持力都不同形状和维持力都不同一级结构一级结构定义定义一级结构指肽链中一级结构指肽链中的氨基酸排列顺序的氨基酸排列顺序维系此结构的维系此结构的化学键是肽键化学键是肽键 二级结构二级结构定义定义多肽链按照一定的方式规则多肽链按照一定的方式规则的旋转或折叠，称为蛋白质的旋转或折叠

59、，称为蛋白质的二级结构的二级结构二级结构不涉及侧链二级结构不涉及侧链R R基，基，维系此结构的化学键是氢键维系此结构的化学键是氢键三级结构三级结构定义定义螺旋形的肽链非几何的进一步折叠或卷曲螺旋形的肽链非几何的进一步折叠或卷曲 构构成复杂的空间结构，整个分子成为球状或颗成复杂的空间结构，整个分子成为球状或颗粒状，称为三级结构粒状，称为三级结构盐键、疏水作用、盐键、疏水作用、范德华力参与三级范德华力参与三级结构的形成结构的形成四级结构四级结构由两条或两条以上多肽链构成的蛋白质分由两条或两条以上多肽链构成的蛋白质分子，其每条单位肽链叫亚基，亚基与亚基子，其每条单位肽链叫亚基，亚基与亚基之间的结合方

60、式称为四级结构之间的结合方式称为四级结构定义定义三三. .蛋白质的二级结构蛋白质的二级结构蛋白质的二级结构蛋白质的二级结构只限于主链原子的局只限于主链原子的局部空间排列部空间排列，不包括与肽链其他区段的，不包括与肽链其他区段的关系和侧链关系和侧链R R基基构象构象,蛋白质蛋白质借助氢键借助氢键盘盘旋折叠而形成局部空间结构旋折叠而形成局部空间结构二级结构包括：二级结构包括： -螺旋螺旋、 折叠折叠、 转角转角和和无规卷曲无规卷曲几种形式几种形式-螺旋结构的理论要点：螺旋结构的理论要点：1.1.组成肽键的四个原子在同一平面上组成肽键的四个原子在同一平面上，称为称为肽平面肽平面，四个原子呈反式排列，