基因工程高考题2

1、1、(2012全国卷新课标版)40.现代生物科技专题(15分)根据基因工程的有关知识，回答下列问题：(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有和。(2)质粒运载体用EcoRI切割后产生的片段如下：AATTCOGCTTAA为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoRI切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须具有的特点是。(3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即DNA连接酶和DNA连接酶。(4)反转录作用的模板是,产物是。若要在体外获得大量反转录产物，常采用(5)基因工程中除质粒外，和也可作为运载体。(6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况

2、下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是。3、(2012福建卷)32.现代生物科技专题肺细胞中的let-7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实验表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。请回答:”4基四*7步因阳2(1)进行过程时，需用酶切开载体以插入let-7基因。载体应用RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动let-7基因转录，该部位称为。(2)进行过程时，需用酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。(3)研究发现，let-7基因能影响RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞提取

3、进行分子杂交，以直接检测let-7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中(RASmRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。4、(2012天津卷，)(13分)生物分子间的特异性结合的性质广泛用于生命科学研究。以下实例为体外处理“蛋白质-DNA复合体”获得DNA片段信息的过程图。据图回答：(1)过程酶作用的部位是键，此过程只发生在非结合区DNA,过程酶作用的部位是键。(2)、两过程利用了酶的特性。(3)若将得到的DNA片段用于构建重组质粒，需要过程的测序结果与酶的识别序列进行对比，已确定选用何种酶。(4)如果复合体中的蛋白质为RNA酶聚合，则其识别、结合DNA序列位基因的5、(2012江

4、苏卷)32.图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspI、BamHI、MboI、SmaI4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为CJCGG、GJGATCC、JGATC、CCCJGGG。请回答下列问题：rIl'i!iIl卬CGGGCCCGGGCCTAGOG!GGCCCGGGCCCIILill疝IL.i534bpJ4-7966弱bpGGATCCCCTAGG(1)图1的一条脱氧核甘酸链中相邻两个碱基之间依次由连接。(2)若用限制酶SmaI完全切割图1中DNA片段，产生的末端是末端，其产物长度为(3)若图1中

5、虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因do从杂合子分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaI完全切割，产物中共有种不同DNA片段。(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是。6、(2013新课标卷I)40.【生物一一选彳3现代生物科技专题】(15分)阅读如下材料：材料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵在，得到了体型巨大的超级小鼠”科学家采用农杆菌转化

6、法培育出转基因烟草。材料乙：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家又编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97为的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性。材料丙：兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体，科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内，成功产出兔甲的后代，证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育。回答下列问题：（1）材料甲属于基因工程的范畴。将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用法。构建基因表达载体常用的工具酶有和。在培育转基因植物是，常用农杆菌转化发，农杆菌的作用是。（2）材料乙属于工程范畴。该工程是指以

7、分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对进行改造，或制造制造一种的技术。在该实例中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的序列发生了改变。（3）材料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到种的、生理状况相同的另一个雌性动物体内，使之继续发育成新个体的技术。在资料丙的实例中，兔甲称为体，兔乙称为体。7、（2013北京卷）30.（18分）斑马鱼的酶D由17号染色体上的D基因编码。具有纯合突变基因（dd）的斑马鱼胚胎会发出红色荧光。利用转基因技术将绿色荧光蛋白（G）基因整合到斑马鱼17号染色体上，带有G基因的胚胎能够发出绿色荧光。未整合G基因的染色体的对应位点表

8、示为go用个体M和N进行如下杂交实验。亲代M（肺胞明无焚光J（肝胎用然色觉沁个体号染色体.上相关基岗州成代胚后士嫁色荧光红色荧光无荧光红，绿变光（1）在上述转基因实验中，将G基因与质粒重组，需要的两类酶是和。将重组质粒显微注射到斑马鱼中，整合到染色体上的G基因后，使胚胎发出绿色荧光。（2）根据上述杂交实验推测：亲代M的基因型是（选填选项前的符号）。a.DDggb.Ddgg子代中只发出绿色荧光的胚胎基因型包括（选填选项前的符号）。a.DDGGb.DDGgc.DdGGd.DdGg（3）杂交后，出现红绿荧光（既有红色又有绿色荧光）胚胎的原因是亲代（填"M或"N）的初级精（卵）母细

9、胞在减数分裂过程中，同源染色体的发生了交换，导致染色体上的基因重组。通过记录子代中红绿荧光胚胎数量与胚胎总数，可计算得到该亲本产生的重组配子占其全部配子的比例，算式为。8、（2013广东卷）28.（16分）地中海贫血症属于常染色体遗传病。一对夫妇生有一位重型3地中海贫血症患儿，分析发现，患儿血红蛋白3链第39位氨基酸的编码序列发生了突变（C-T）。用PCR扩增包含如图11（a）。目前患儿母亲再次怀孕,该位点白一段DNA片段l,突变序列的扩增片段可用一种限制酶酶切为大小不同的两个片段m和s；但正常序列的扩增片段不能被该酶酶切，并接受了产前基因诊断。家庭成员及胎儿的PCR扩增产物酶切电泳带型示意图

10、见图11(b)。XXAlTG8CCGC-3A(TGTJ"cFGr4-LR11ati(终止密码子为UAA、UAG、UGA。)jE.V嗝«*r小，I邦票挟瓶梃一、I*-P，T-TN=-/+4序同转录假板鞋口一产示PCH5E*圉IIS11(b)'|(1)在获得单链模板的方式上，PCR扩增与体内DNA复制不同，前者通过解开双链，后者通过解开双链。(2)据图分析，胎儿的基因型是(基因用A、a表示)。患儿患病可能的原因是的原始生殖细胞通过过程产生配子时，发生了基因突变；从基因表达水平分析，其患病是由于。(3)研究者在另一种贫血症的一位患者3链基因中检测到一个新的突变位点，该突变

11、导致3链第102位的天冬酰胺替换为苏氨酸。如果，但,则为证明该突变位点就是这种贫血症的致病位点提供了一个有力证据。9、2014(课标H卷)40.生物选修3:现代生物科技专题(15分)植物甲具有极强的耐旱性，其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因，并将其转移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题：(1)理论上，基因组文库含有生物的基因；而cDNA文库中含有生物的基因。(2)若要从植物甲中获得耐旱基因，可首先建立该植物的基因组文库，再从中出所需的耐旱基因。(3)将耐旱基因导入农杆菌，并通过农杆菌转化法将其导入植物的体细胞中，经过一系列的过程得到再生植株。要确认该耐旱

12、基因是否在再生植株中正确表达，应检测此再生植株中该基因的,如果检测结果呈阳性，再在田间试验中检测植株的是否得到提高。(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交，子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3：1时，则可推测该耐旱基因整合到了(填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)注：国中限制的的识别序列及切制形成的黏性末端均不相向10、2014(天津卷)8.(12分)嗜热土壤芽胞杆菌产生的葡萄糖昔酶(Bg旧)是一种耐热纤维素酶，为使其在工业生产中更好地应用，开展了以下试验：4I.利用大肠杆国表达BglB酶(1)PCR扩增bglB基因时，选用基因组DNA作模板。(2)右图为质粒限制酶酶切图谱。b

13、glB基因不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒，扩增的bglB基因两端需分别引入和不同限制酶的识别序列。(3)大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为。n.温度对BglB酶活性的影响(4)据图1、2可知，80c保温30分钟后，BglB酶会;为高效利用BglB酶降解纤维素，反应温度最好控制在(单选)。A.50CB.60CC.70CD.80C温国CI时坤分梆图I湿度耐agia院活性的影晦&2b吕阳院的捻隹定性注；曲的热旗定性是布在一定温度卜；保温一段时其活性的度的出.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性在PCR扩

14、增bglB基因的过程中，加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选，可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。(5)与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高，其原因是在PCR过程中(多选)。A.仅针对bglB基因进行诱变B.bglB基因产生了定向突变C.bglB基因可快速累积突变D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变11、(2014山东卷)36.(12分)【现代生物科技专题】人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：(1)htPA基因与载体用切割后，通过DNA1接酶连接，

15、以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA可采用技术。(2)为获取更多的卵(母)细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其采集的精子需要经过,才具备受精能力。(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的。(4)若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到,说明目的基因成功表达。12、2014(海南卷)31生物一选彳3:现代生物科技专题(15分)下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备工程菌”的示意图。请据图回答:获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在酶的催化

16、下，合成互补的单链DNA,然后在作用下合成双链DNA,从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的序列，再通过化学方法合成所需基因。利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有、4种脱氧核甘酸三磷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。由A和载体B拼接形成的C通常称为。在基因工程中，常用Ca2+处理D,其目的是。13、201640.生物一一选修3:现代生物科技专题（15分）图（a）中的三个DNA片段上以此表示出了EcoRI、BamHI和Sau3AI三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图

17、（b）为某种表达载体示意图（载体上的EcoRI、Sau3AI的切点是唯一的）。根据基因工程的有关知识，回答下列问题：（1）经BamHI酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被酶切后的产物连接，理由是。（2）若某人利用图（b）所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图（c）所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的额,不能表达的原因是。（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。14、201640.【生物生一选修*II块3:现代生物科技专题】（15分）某一质粒载体如图所示，外源DNA分子插入到Ampr或Tet

18、r中会导致相应的基因失活（Ampr表示氨茉青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因）。有人将此质粒载体用BamHI酶切后，与用BamHI酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有(答出两点即可)而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。(2)如果用含有氨茉青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含环状目的基因的细胞不能区分的，其原因是;并且和的细胞也是不能区分的，其原因是。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落，还需使用含有的固体培养基。(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自15、(2016江苏卷)33.(9分)下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:限制崎咕H1Hfi1Hiifriill浜别序刻及切割f