液相色谱吸附色谱学习资料

1、液相色谱吸附色谱分离机制：注：注：Ka与组分的性质、吸附剂的活性、流动相的性质与组分的性质、吸附剂的活性、流动相的性质 及温度有关及温度有关分离机制： 各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心 利用吸附剂对不同组分的吸附能力差异而实现分离吸附解吸再吸附再解吸无数次洗脱分开 m. 流动相；流动相；a. 吸附剂；吸附剂；Xm. 流动相中溶质分子；流动相中溶质分子；Ym. 流动相分子；流动相分子；Xa. 被吸附的溶质分子被吸附的溶质分子 吸附等温线可用来描述分配系数吸附等温线可用来描述分配系数K（吸附（吸附平衡常数）随组分浓度变化的规律。即在一定平衡常数）随组分浓度变化的规律。即在一定温度下，组分在

2、吸附剂上达到平衡时，用组分温度下，组分在吸附剂上达到平衡时，用组分在固定相中的量（在固定相上被吸附着的浓度）在固定相中的量（在固定相上被吸附着的浓度）对组分在流动相中的浓度（未被吸附）作图，对组分在流动相中的浓度（未被吸附）作图，即得吸附等温线。即得吸附等温线。1、线性等温线、线性等温线T K=tg= CS/Cm M特点特点：T 组分的组分的K为一常数，不随为一常数，不随组分的浓度而变化；组分的浓度而变化；T虽然组分的前沿、中心、虽然组分的前沿、中心、尾部浓度不等，但由于尾部浓度不等，但由于K与浓度无关，是常数，所与浓度无关，是常数，所以组分的分子以相同的速以组分的分子以相同的速度迁移，得到完

3、全对称的度迁移，得到完全对称的峰；峰；T组分的保留时间，不随样组分的保留时间，不随样品的浓度而变化。品的浓度而变化。2、凸型等温线、凸型等温线（Langmuir型等温线）型等温线）M特点：特点：TK是浓度的函数，随浓度而变是浓度的函数，随浓度而变化；化；T当组分浓度增大时，当组分浓度增大时，K减小，减小，组分更多地分配于流动相中；组分更多地分配于流动相中；T对于组分谱带中，不同浓度对于组分谱带中，不同浓度区域的分子（前、中、后），区域的分子（前、中、后），因浓度不同，因浓度不同，K不同；中心的不同；中心的浓度高，浓度高，K小，迁移快；两头小，迁移快；两头浓度低，浓度低，K大，迁移慢，形成大，迁

4、移慢，形成拖尾峰；拖尾峰；T造成谱带不对称，造成谱带不对称，tR值偏移，值偏移，谱带展宽。谱带展宽。M原因：原因：T吸附剂上常存在一些强烈的活性中心，当组分在吸附剂吸附剂上常存在一些强烈的活性中心，当组分在吸附剂上被吸附时，先占据活性能力最强的活性中心，然后占上被吸附时，先占据活性能力最强的活性中心，然后占据次强的、弱的、最弱的，这样，当样品量大时，少部据次强的、弱的、最弱的，这样，当样品量大时，少部分占据强吸附中心；其它的在弱吸附中心，则移动快，分占据强吸附中心；其它的在弱吸附中心，则移动快，K值小，所以随浓度的增大，值小，所以随浓度的增大，K减小，移动快。减小，移动快。M克服方法：克服方法

5、：Ta、 减少上样量，使之在线性容量内（线性容量，即吸减少上样量，使之在线性容量内（线性容量，即吸附等温线为线性的区间所对应的组分的浓度区间）。附等温线为线性的区间所对应的组分的浓度区间）。Tb、覆盖强活性中心（用极性物质），增大线性容量、覆盖强活性中心（用极性物质），增大线性容量T用某种物质覆盖强活性中心，减低其吸附能力的过程，用某种物质覆盖强活性中心，减低其吸附能力的过程，叫减活。叫减活。3、 凹型等温线（反凹型等温线（反langmuir型等温线）型等温线）T随浓度大，随浓度大，K大；大；T则浓度大的区域移动慢，则浓度大的区域移动慢，形成伸舌头峰。形成伸舌头峰。M原因：原因：Ta、化学吸附

6、、化学吸附Tb、相对于流动相超载，即、相对于流动相超载，即当样品量过大时，局部浓当样品量过大时，局部浓度过高，流动相对其溶液度过高，流动相对其溶液能力有限，只能洗脱少量，能力有限，只能洗脱少量，所以浓度低处移动快。所以浓度低处移动快。M克服：克服：T减少上样量。减少上样量。（一）吸附剂的类型（一）吸附剂的类型M1、极性吸附剂、极性吸附剂M2、非极性吸附剂、非极性吸附剂（二）吸附剂的吸附能力（活性）（二）吸附剂的吸附能力（活性）M1、影响吸附剂吸附能力的因素：、影响吸附剂吸附能力的因素：M2、吸附能力的定量指标、吸附能力的定量指标活度活度M3、活度级别、活度级别M4、活化、活化T将吸附剂加热，去

7、除其吸附的水的过程。将吸附剂加热，去除其吸附的水的过程。M5、减活、减活T加入减活剂，降低吸附剂活性加入减活剂，降低吸附剂活性（三）常用吸附剂硅胶、氧化铝 结构：内部硅氧交联结构多孔结构 表面有硅醇基氢键作用吸附活性中心 游离羟基游离羟基 键合羟基键合羟基 硅醚结构（非极性，硅醚结构（非极性，对极性化合物不保留）对极性化合物不保留） 特性：特性： 1）与极性物质或不饱和化合物形成氢键）与极性物质或不饱和化合物形成氢键 物质极性物质极性，吸附能力，吸附能力强极性吸附中心，不易洗强极性吸附中心，不易洗脱脱 2）吸水）吸水失活失活 105110OC烘干烘干30分钟分钟(可逆失水可逆失水)吸附力最大吸

8、附力最大 500OC烘干烘干(不可逆失水不可逆失水)活性丧失，无吸附力活性丧失，无吸附力适用：适用： 分析酸性或中性物质分析酸性或中性物质 2、氧化铝：分离亲脂性成分 活化：400，6h 级 加入相应的水 级T 碱性氧化铝碱性氧化铝 pH 910 适于分析碱性、中性物质适于分析碱性、中性物质T 中性氧化铝中性氧化铝 pH7.5 适于分析酸性碱性和中性物质适于分析酸性碱性和中性物质T 酸性氧化铝酸性氧化铝 pH 45 适于分析酸性、中性物质适于分析酸性、中性物质 （四）极性吸附剂对化合物的选择性（四）极性吸附剂对化合物的选择性M1 1、极性吸附剂选择性吸附极性大的化合物、极性吸附剂选择性吸附极性

9、大的化合物M2 2、化合物的极性大小，由化合物的官能团决定、化合物的极性大小，由化合物的官能团决定1.1.3 3、非极性吸附剂给出相反顺序。、非极性吸附剂给出相反顺序。 （一）洗脱剂的洗脱强度（对组分（一）洗脱剂的洗脱强度（对组分K值的影响）值的影响）（二）洗脱剂的选择性（二）洗脱剂的选择性（一）洗脱剂（流动相）对组分（一）洗脱剂（流动相）对组分K值的影响值的影响M1、在固定相上与组分分子的竞争作用、在固定相上与组分分子的竞争作用M2、流动相对组分的溶解能力、流动相对组分的溶解能力M3、各种溶剂的极性顺序（即强度顺序）、各种溶剂的极性顺序（即强度顺序）M4、混合溶剂的强度。、混合溶剂的强度。（

10、二）洗脱剂（流动相）的选择性M1、溶剂与组分分子之间的作用力T色散作用、偶极作用、氢键作用、介电作用色散作用、偶极作用、氢键作用、介电作用M2、溶剂的分类T以上四种作用力中，主要考虑偶极、氢键作用力，以上四种作用力中，主要考虑偶极、氢键作用力，按它们的大小，把常用的溶剂分类按它们的大小，把常用的溶剂分类常用溶剂分类常用溶剂分类组别组别溶剂名称溶剂名称I I脂肪族醚、三烷基胺脂肪族醚、三烷基胺IIII脂肪醇脂肪醇IIIIII吡啶衍生物、吡啶衍生物、THFTHF、酰胺（除甲酰胺外）、乙二醇醚、亚砜、酰胺（除甲酰胺外）、乙二醇醚、亚砜IVIV乙二醇、苯甲醇、甲酰胺、乙酸乙二醇、苯甲醇、甲酰胺、乙酸V

11、 VCHCH2 2ClCl2 2、二氯乙烷、二氯乙烷VIVI酮、酯、腈、聚酯酮、酯、腈、聚酯VIIVII卤代芳氢、芳氢、芳香醚、硝基化合物卤代芳氢、芳氢、芳香醚、硝基化合物VIIIVIII水、氯仿、间甲苯酚、氟烷醇水、氯仿、间甲苯酚、氟烷醇M3、溶剂选择性、溶剂选择性M4、改善选择性、改善选择性M3、溶剂选择性、溶剂选择性M4、改善选择性、改善选择性吸附剂、被分离物质、流动相的选择原则（一）选择固定相（吸附剂）（一）选择固定相（吸附剂）（二）洗脱剂的选择（流动相的选择）（二）洗脱剂的选择（流动相的选择）（一）选择固定相（吸附剂）（一）选择固定相（吸附剂）M1、固定相的吸附能力、固定相的吸附能力

12、：T极性固定相：组分分子极性官能团多，极性固定相：组分分子极性官能团多，则吸附作用强。则吸附作用强。 分离极性组分分离极性组分T非极性固定相：分离非极性组分非极性固定相：分离非极性组分M3、固定相的预处理、固定相的预处理T活度级别、活化、减活活度级别、活化、减活（二）洗脱剂的选择（流动相的选择）（二）洗脱剂的选择（流动相的选择）选择流动相时，需同时对固定相、流动相及组分的性质全选择流动相时，需同时对固定相、流动相及组分的性质全面考虑。面考虑。M1、对溶剂的要求、对溶剂的要求:T稳定、粘度低、能溶解样品，浸润固定相、高纯度、挥稳定、粘度低、能溶解样品，浸润固定相、高纯度、挥发性好、安全价廉发性好

13、、安全价廉M2、一般步骤、一般步骤T根据固定相和组分的性质，选择一合适强度的溶剂，使根据固定相和组分的性质，选择一合适强度的溶剂，使K值在值在25范围内，即选用不同溶剂调节范围内，即选用不同溶剂调节K= 25。T若在一定若在一定n下，不能很好分离，则需改善系统的选择性，下，不能很好分离，则需改善系统的选择性，此时可根据组分的性质，选用二元溶剂系统来改善选择此时可根据组分的性质，选用二元溶剂系统来改善选择性，同时保持一定的溶剂强度，即使性，同时保持一定的溶剂强度，即使K在在25。 可通过实验选择不同组别的溶剂来筛选。可通过实验选择不同组别的溶剂来筛选。若二元溶剂仍不凑效，可试用三元溶剂。若二元溶剂仍不凑效，可试用三元溶剂。M1、装柱：将固定相装入柱管内、装柱：将固定相装入柱管内柱管：玻璃柱、石英柱、尼龙柱，柱管：玻璃柱、石英柱、尼龙柱，柱径柱径:柱长柱长1:1020T方法：方法：干法装柱干法装柱湿法装柱湿法装柱T注意事项注意事项:倾入时，一次性连续倾入柱子，以免由于颗粒大小不同，倾入时，一次性连续倾入柱子，以免由于颗粒大小不同，沉降速度不同，引起柱