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1、1会计学氨基酸纸层析氨基酸纸层析2022-5-222022-5-232022-5-24二、定义二、定义 层析技术层析技术是根据被分离的混合物中各组分的是根据被分离的混合物中各组分的理理化性质化性质(分子的形状和大小、分子极性、吸附力、(分子的形状和大小、分子极性、吸附力、分子亲和力、分配系数等)的不同,使各组分在两分子亲和力、分配系数等)的不同,使各组分在两相(一相为固定的,称为相(一相为固定的,称为固定相固定相;另一相流过固定;另一相流过固定相,称为相,称为流动相流动相)中进行分配。)中进行分配。 层析的基本概念层析的基本概念2022-5-25层析的基本概念层析的基本概念2022-5-262

2、022-5-272022-5-28 溶质在溶质在固定相固定相的浓度的浓度(Cs)(Cs)分配系数分配系数= 溶质在溶质在流动相流动相的浓度(的浓度(Cl)Cl)2022-5-292022-5-2102022-5-2112022-5-2122022-5-213(4 4)滤纸:)滤纸: 层析滤纸由高纯度棉花制成,层析滤纸由高纯度棉花制成,要求滤纸要清洁要求滤纸要清洁,质地均一,厚薄一致,纤维松紧度适中,具有一定的质地均一,厚薄一致,纤维松紧度适中,具有一定的机械强度,要被溶剂所饱和。不同型号的滤纸,其厚机械强度,要被溶剂所饱和。不同型号的滤纸,其厚薄程度、纤维松紧度各不相同,因此,滤纸纤维结合薄程

3、度、纤维松紧度各不相同,因此,滤纸纤维结合水的量不一样,两相的体积比也就不同,水的量不一样,两相的体积比也就不同,R Rf f也不同;也不同; 另外,滤纸的杂质也会影响另外,滤纸的杂质也会影响R Rf f,必要时进行预处,必要时进行预处理(可用理(可用0.010.010.4M0.4M的的HClHCl处理除去金属离子)处理除去金属离子). . 2022-5-2142022-5-215(6 6)展开方式:)展开方式: 上行法上行法R Rf f小;小;下行法下行法(层析缸上部有一盛展开剂(层析缸上部有一盛展开剂的液槽,滤纸点样端向上进入槽中,重现性差,斑点的液槽,滤纸点样端向上进入槽中,重现性差,斑

4、点易扩散)易扩散) R Rf f大大;环行法环行法(最好用无方向性的特制滤(最好用无方向性的特制滤纸)用圆形滤纸层析时,由于内圈较外圈小,限制了纸)用圆形滤纸层析时,由于内圈较外圈小,限制了溶剂的流动,溶剂的流动,R Rf f较小。较小。(7 7)样品溶液中杂质:)样品溶液中杂质: 如氯化钠的存在会影响氨基酸的如氯化钠的存在会影响氨基酸的R Rf f值。值。2022-5-2162022-5-2172022-5-2182022-5-2192022-5-2202022-5-2212022-5-2222022-5-223 2022-5-2242022-5-2251 1、分析影响分配系数的因素有哪些?

5、、分析影响分配系数的因素有哪些?2 2、何谓分配层析法,分配系数?、何谓分配层析法,分配系数?3 3、 茚三酮丙酮溶液的作用机制?茚三酮丙酮溶液的作用机制?2022-5-2262022-5-2272022-5-2282022-5-2292022-5-2302022-5-231(6 6)展开方式:)展开方式: 上行法上行法R Rf f小;小;下行法下行法(层析缸上部有一盛展开剂(层析缸上部有一盛展开剂的液槽,滤纸点样端向上进入槽中,重现性差,斑点的液槽,滤纸点样端向上进入槽中,重现性差,斑点易扩散)易扩散) R Rf f大大;环行法环行法(最好用无方向性的特制滤(最好用无方向性的特制滤纸)用圆形滤纸层析时,由于内圈较外圈小,限制了纸)用圆形滤纸层析时,由于内圈较外圈小,限制了溶剂的流动,溶剂的流动,R Rf f较小。较小

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