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1、新概念疫苗总结名词解释新概念疫苗:与传统疫苗成分,机制,作用不同,且能激发机体特异性免疫应答的新型疫苗(1.成分不同:传统疫苗多为死疫苗/减毒活疫苗或重组亚单位疫苗,新概念疫苗则为编码无毒力抗原蛋白的病毒核酸或能激发特异性机体免疫应答的细胞疫苗2.机制不同:传统疫苗主要靠病毒的抗原蛋白刺激机体产生中和性保护抗体,新型疫苗不仅刺激机体产生中和性保护抗体,而且能激发特异性细胞免疫应答3.作用不同:传统疫苗只能起一定预防作用,新型疫苗不仅能预防疾病,且更能起到特异性治疗作用)核酸疫苗:把编码外源蛋白基因的质粒DNA直接导入到动物体内,使外源基因在活体内表达,通过产生抗原激活机体的免疫系统以引发免疫反

2、应。核酶:具有催化活性的RNA,其化学本质是核糖核酸,却具有酶的催化功能T细胞疫苗:将引起自身免疫性疾病的自身反应性T细胞或导致同种移植排斥反应的同种反应性T细胞活化并灭活后作为疫苗,可诱导机体产生针对致病性T细胞或同种反应性T细胞的免疫应答,从而消除或减轻这些细胞的致病作用.称为T细胞疫苗Th1:特征性分泌IL-2、IFN-丫、LT等细胞因子,主要介导迟发型超敏反应(DTH)和巨噬细胞活化等细胞免疫反应。Th2:特征分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13等细胞因子,主要促成B细胞增殖并分化成浆细胞,分泌特异性抗体,介导体液免疫和过敏反应。Tel:分泌Th1样细胞因子的亚群称

3、为Tc1,如IL-2、IFN-丫、LT等细胞因子。Tc2:分泌Th2样细胞因子的亚群称为Tc2,如IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13等细胞因子。T细胞表位:抗原经过抗原递呈细胞(APC)加工后,由MHC分子递呈给T细胞受体(TCR)的短肽。显性表位:在诱导宿主免疫应答时起关键作用或免疫原性强的表位称为显性表位。树突状细胞(DC)疫苗:荷载抗原的DC具有疫苗的功能,故称抗原提呈细胞:能摄取、加工处理抗原,并将抗原递呈给T淋巴细胞的一类免疫细胞,在机体免疫应答中发挥重要作用,也称辅佐细胞专耳RAPC:能组成性表达MHC-II类分子和T细胞活化的共刺激分子,抗原递呈能力强,包括巨噬

4、细胞、树突状细胞和B细胞等内源性抗原:APC内合成的,如被病毒感染细胞合成的病毒蛋白外源性抗原:来源于细胞外的抗原,如被吞噬的细胞或细菌等交叉递呈:有些APC的MHC-I类分子具有提呈外源性抗原给CD8+细胞的能力。简答题简述DNA疫苗表达产物的免疫机制:1质粒DNA直接转染体细胞表达抗原蛋白,然后通过MHC-I进行抗原递呈,诱发CD8+细胞毒性T细胞(CTL)应答的产生。2专职抗原呈递细胞(APC)递呈肌细胞表达的外源抗原肌细胞作为体内抗原库,不断地释放抗原至细胞间隙,然后被APCs吞噬、加工、递呈,进入免疫途径。3质粒DNA直接车专染APC诱导CTL应答的最有效的途径。质粒DNA在APC内

5、表达的蛋白质抗原作为内源性抗原”,经蛋白酶降解形成8-10aa组成的肽,在内质网腔内与MHC-I分子形成聚体后到达APC膜表面,被T细胞的受体识别。交叉激活核交叉递呈简述用作DNA免疫的表达载体的特点:大学便民网(1)在哺乳动物细胞内能高水平表达目的基因;(2)本身不复制;(3)不会整合到宿主染色体中简述核酸疫苗的优点(1)免疫效果好(2)易操作性和稳定性(3)能同时诱导体液免疫和细胞免疫,交叉防御(4)通过选择免疫途径或增加细胞因子,可诱发适合于特定病原体的Th1或Th2应答(5)易于构建和使用联合疫苗或嵌合疫苗(6)能产生用常规方法不能产生的有效免疫原。(7)能用各种投递疫苗的方法(8)具

6、有热稳定性,无需特别的冷藏系统,便于储存和运输(9)规模化生产,成本低廉(10)母体抗体的存在不影响新生儿免疫(11)使用相对安全简述CD28与CTLA-4的功能?90%CD4+和50%CD8+T细胞表达CD28分子,而CTLA-4只表达在活化的T细胞表面CD28和CTLA-4的天然配体都是B7分子CD28接受APC细胞B7分子提供的刺激,向T细胞提供活化的辅助信号CTLA-4仅表达于活化T细胞,其表达水平明显低于CD28,它与配体结合,向活化的T细胞传导抑制信号简述T细胞表位识别抗原的特点特异性:T细胞能识别大量的表达在APC表面的特异的肽-MHC复合体敏感性:同样的MHC分子可结合大量不同

7、的肽,但APC上T细胞表位数很低限制性:一个淋巴细胞只识别与一种类型MHC分子结合的特异性抗原肽非己性:T细胞须忽略无害的或自身抗原顺序T:T细胞仅识别多肽的顺序表位简述T细胞疫苗的制备方法1 .接种用T细胞的获取1)自身免疫性疾病从发病机体的淋巴组织、炎症浸润部位或外周血中分离,特异性自身抗原诱导,体外扩增。2)移植研究用供体抗原使受体致敏,再收集相应部位的淋巴细胞和脾细胞,制备淋巴细胞悬液,用低浓度的ConA在体外培养。2 .T细胞接种前的处理1)T细胞的活化:通过特异抗原活化,或经T细胞有丝分裂原活化2)T细胞灭活:X射线、60Co照射或丝裂霉素C处理,低浓度戊二醛处理。3)亚适量接种:

8、自身免疫性T细胞的剂量低于过继转移自身免疫性疾病所需的剂量,无需灭活。3 .接种方式自身免疫病动物实验:静脉注射临床上:皮下多点免疫同种移植实验:腹腔注射,术前术后多次特异性细胞免疫应答的体外功能检测方法有那些?1 .淋巴细胞增殖试验取T细胞或PBMC与不同稀释度的抗原或APC递呈的抗原混合培养35天,测细胞的增殖。据此判断出淋巴细胞对有关刺激的反应性与功能状态大学便民网所用方法:3HTdR掺入法、MTT法等2 .细胞因子分泌活化的T细胞会分泌一些细胞因子(IL-2、IFN-丫、TNF-“等)所用方法:流式细胞术(FACS),酶联免疫吸附试验(ELISA法),ELISPOT法,定量RT-PCR

9、3 .直接细胞毒性分析T细胞介导的细胞毒性(LMC)是细胞毒性细胞(CTL)的特性,凡致敏的T细胞再次遇到相应靶细胞抗原,均可表现出对靶细胞的破坏和溶解作用,它是评价机体细胞免疫水平的一种常用指标,特别是测定肿瘤患者CTL杀伤肿瘤的能力,常作为判断预后和观察疗效的指标之一论述题论述DNA疫苗免疫保护效果的评价?一、细胞免疫评价方法:T细胞功能和细胞因子的检测(一)淋巴细胞增殖功能的检测(淋巴细胞转化实验):3H-TdR掺入法,MTT法,Brdu检测法,CFSE标记淋巴细胞转化试验原理:T细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,经特异性抗原刺激后发生一系列的变化而转变成为淋巴母细胞,所以又称

10、为淋巴母细胞转化。淋巴细胞增殖和分化是机体免疫应答过程中的重要阶段。检测淋巴细胞增殖水平,了解核酸疫苗接种后,淋巴细胞的反应能力和免疫功能。(二)T细胞介导的细胞毒作用(即杀伤试验)杀伤性作用:抗原特异性,致敏的T细胞再次遇到相应靶细胞抗原,对靶细胞的破坏和溶解作用。杀伤机制:穿孔素和颗粒酶靶细胞的程序性死亡原则:适当的靶细胞-标记-按一定比例与淋巴细胞混合-共温一段时间-观察杀伤情况1 .放射测定法(1) 51Cr释放试验(2) 3H-TdR释放试验2 .非放射测定法乳酸脱氢酶(LDH)释放试验(三)细胞因子(cytokines)的检测定义:免疫细胞和非免疫细胞合成和分泌的具有调节多种细胞生

11、理功能的小分子多肽类因子。常见:IL、IFN、CSF、TNF、TGF(1)免疫学方法基本原理:细胞因子(或受体)与相应的特异性抗体(单克隆抗体或多克隆抗体)结合,通过同位素、荧光或酶等标记技术加以放大和显示,从而定性或定量显示细胞因子(或受体)的水平。常用检测方法:ELISA、ELISPOT、荧光标记法(FIA)、放免法(RIA)(2)生物学方法1 .细胞增殖法2 .靶细胞杀伤法3 .细胞因子诱导的产物分析法4 .减少细胞损伤法(3)分子生物学法原理:利用细胞因子的基因探针检测待定细胞因子基因表达的技术。检测法大学便民网1. 分子杂交:斑点杂交、Northernblot等。2. RT-PCR二

12、、体液免疫(一)B细胞增殖试验(1)不同刺激物诱发增殖试验抗IgM抗体、细菌脂多糖(LPS)3H-TDR、台盼蓝法或DNA特异性染色(2)葡萄球菌诱导试验葡萄球菌表面SPA含量与激发B细胞转化能力成正比。(二)抗体检测(1)抗体形成细胞计数反相溶血空斑检测(2)抗体滴度的监测1 .酶联免疫分析法(ELISA)2 .免疫荧光法:直接和间接法3 .流式细胞仪(FACS)4 .放射免疫法(RIA):液相法和固相法5 .免疫印迹法(WesternBlot)论述在自身免疫性疾病中,TCV的作用机制?1 .抗独特型反应:TCV通过活化特异性识别病理相关性自身反应性T细胞TCR的T细胞而发挥作用。病理性T细

13、胞上的TCR作为抗原表位,TCV产生的效应T细胞识别该表位,产生细胞免疫应答,抗独特型T细胞识别靶细胞TCR上的独特型表位,对靶细胞的杀伤作用受MHC限制。2 .抗活化型反应:针对TCR的抗独特型调节并不是TCV的唯一作用方式;也涉及到抗动力性免疫,即抗活化型免疫。有丝分裂原活化的T细胞制成的疫苗可以刺激机体产生针对所有活化的T细胞免疫。调控机制较抗独特型弱,作用时间短,杀彳靶细胞不受MHC限制,无特异性。机体存在对所有活化状态T细胞起反应的抗活化型T细胞3 .Th1/Th2细胞平衡的改变:TCV通过活化自身免疫应答的细胞因子表型转换,改变Th1/Th2细胞平衡。Th1促进器官特异性自身免疫病

14、的发生有关,Th2则能防止此类疾病的发生,Th1引发同种移植排斥反应,Th2可延长同种移植物的成活。部分选择题工具酶?限制性核酸内切酶?DNA连接酶?DNA聚合酶I?反转录酶?多聚核甘酸激酶?末端转移酶?碱性磷酸酶功能识别特异序列,切割DNA催化DNA中相邻的5礴酸基和3伏基形成二酯键a.合成cDNA的第二条链b.缺口平移c.测序d.补平合成cDNA催化多聚核甘酸5,羟基末端磷酸化同聚物加尾切除末端磷酸基免疫刺激序列ISS特点:具有回文结构(palindromicstructure)的六聚体一般为5,-喋吟喋吟CG喀咤喀咤-3?大学便民网CpG一般为非甲基化增强免疫的常用策略:优化载体使用肌肉

15、再生诱导剂与细胞因子联合使用免疫激活DNA序列CpGODN注射共刺激信号分子与抗原蛋白联合应用形成嵌合型或多重抗原型DNA疫苗多表位联合疫苗MVA可加强DNA疫苗抵抗疟疾电脉冲增强核酸疫苗的免疫原性与趋化因子联合微生物蛋白的佐剂效应目前,疫苗的安全性问题主要有:导致肿瘤形成长期表达抗原抗DNA抗体的形成其他因素目的基因的筛选原则?1 .选择病原的主要保护性抗原基因,最好是可对多数毒株都有保护作用的抗原基因。2 .可以是单个基因或具有协同保护功能的一组基因,也可以是编码抗原决定簇的一段核昔酸序列。3 .该抗原基因遗传的分子机制已经研究清楚。4 .基因已经被克隆,且表达调控机制较为清楚。5 .目的

16、基因在受体细胞内最好能完整地、稳定地整合到宿主细胞的染色体中,并能适时、适量表达功能性蛋白。DC与功能相关的特性:DC相对特异性表面标志:DC-SIGN表达丰富的黏附分子及共刺激因子,如ICAM、LFA-3、整合素等DC具有显著区别于其他细胞的表面标志:高表达CD83、CD80、CD86、HLA-DR、HLA-DQ等典型表面标记膜表面高表达MHCII类分子并具有一些相对特异性表面标志:小鼠DC:33D1和NLDC145、CD11c大鼠DC:OX62人DC:CD1a、CD83和BDCA2等阳性选择:排除所有非己MHC限制性T细胞阴性选择:排除或抑制自身反应性T细胞克隆大学便民网特性T细胞表位日细

17、胞表位表位受体TCRBGRMHC分子必需无需表位性质主要是线性多股天然的第肽、多糖.脂第穗.有机化合物表位大小gT2个氨基酸(CD8Tiffl施)1WT7个氨荔酸9口4*1细胞)5T5个氨基酸、5-7个单糖或卜7个核昔酸表位类型线性表位构象表位;线性表位表位位置抗原分子任意部位抗原分子表面T细胞和B细胞抗原表位的特性比较必须至少有一个T细胞表位,才能使抗原具有免疫原性新概念疫苗总结名词解释新概念疫苗:与传统疫苗成分,机制,作用不同,且能激发机体特异性免疫应答的新型疫苗(1.成分不同:传统疫苗多为死疫苗/减毒活疫苗或重组亚单位疫苗,新概念疫苗则为编码无毒力抗原蛋白的病毒核酸或能激发特异性机体免疫

18、应答的细胞疫苗2.机制不同:传统疫苗主要靠病毒的抗原蛋白刺激机体产生中和性保护抗体,新型疫苗不仅刺激机体产生中和性保护抗体,而且能激发特异性细胞免疫应答3.作用不同:传统疫苗只能起一定预防作用,新型疫苗不仅能预防疾病,且更能起到特异性治疗作用)核酸疫苗:把编码外源蛋白基因的质粒DNA直接导入到动物体内,使外源基因在活体内表达,通过产生抗原激活机体的免疫系统以引发免疫反应。核酶:具有催化活性的RNA,其化学本质是核糖核酸,却具有酶的催化功能T细胞疫苗:将引起自身免疫性疾病的自身反应性T细胞或导致同种移植排斥反应的同种反应性T细胞活化并灭活后作为疫苗,可诱导机体产生针对致病性T细胞或同种反应性T细

19、胞的免疫应答,从而消除或减轻这些细胞的致病作用.称为T细胞疫苗Th1:特征性分泌IL-2、IFN-丫、LT等细胞因子,主要介导迟发型超敏反应(DTH)和巨噬细胞活化等细胞免疫反应。Th2:特征分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13等细胞因子,主要促成B细胞增殖并分化成浆细胞,分泌特异性抗体,介导体液免疫和过敏反应。Tel:分泌Th1样细胞因子的亚群称为Tc1,如IL-2、IFN-丫、LT等细胞因子。Tc2:分泌Th2样细胞因子的亚群称为Tc2,如IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13等细胞因子。T细胞表位:抗原经过抗原递呈细胞(APC)加工后,由MHC分子递呈给

20、T细胞受体(TCR)的短肽。显性表位:在诱导宿主免疫应答时起关键作用或免疫原性强的表位称为显性表位。树突状细胞(DC)疫苗:荷载抗原的DC具有疫苗的功能,故称抗原提呈细胞:能摄取、加工处理抗原,并将抗原递呈给T淋巴细胞的一类免疫细胞,在机体免疫应答中发挥重要作用,也称辅佐细胞专耳RAPC:能组成性表达MHC-II类分子和T细胞活化的共刺激分子,抗原递呈能力强,包括巨噬细胞、树突状细胞和B细胞等内源性抗原:APC内合成的,如被病毒感染细胞合成的病毒蛋白外源性抗原:来源于细胞外的抗原,如被吞噬的细胞或细菌等交叉递呈:有些APC的MHC-I类分子具有提呈外源性抗原给CD8+细胞的能力。大学便民网简答

21、题简述DNA疫苗表达产物的免疫机制:1质粒DNA直接转染体细胞表达抗原蛋白,然后通过MHC-I进行抗原递呈,诱发CD8+细胞毒性T细胞(CTL)应答的产生。2专职抗原呈递细胞(APC)递呈肌细胞表达的外源抗原肌细胞作为体内抗原库,不断地释放抗原至细胞间隙,然后被APCs吞噬、加工、递呈,进入免疫途径。3质粒DNA直接车专染APC诱导CTL应答的最有效的途径。质粒DNA在APC内表达的蛋白质抗原作为内源性抗原”,经蛋白酶降解形成8-10aa组成的肽,在内质网腔内与MHC-I分子形成聚体后到达APC膜表面,被T细胞的受体识别。交叉激活核交叉递呈简述用作DNA免疫的表达载体的特点:(1)在哺乳动物细

22、胞内能高水平表达目的基因;(2)本身不复制;(3)不会整合到宿主染色体中简述核酸疫苗的优点(1)免疫效果好(2)易操作性和稳定性(3)能同时诱导体液免疫和细胞免疫,交叉防御(4)通过选择免疫途径或增加细胞因子,可诱发适合于特定病原体的Th1或Th2应答(5)易于构建和使用联合疫苗或嵌合疫苗(6)能产生用常规方法不能产生的有效免疫原。(7)能用各种投递疫苗的方法(8)具有热稳定性,无需特别的冷藏系统,便于储存和运输(9)规模化生产,成本低廉(10)母体抗体的存在不影响新生儿免疫(11)使用相对安全简述CD28与CTLA-4的功能?90%CD4+和50%CD8+T细胞表达CD28分子,而CTLA-

23、4只表达在活化的T细胞表面CD28和CTLA-4的天然配体都是B7分子CD28接受APC细胞B7分子提供的刺激,向T细胞提供活化的辅助信号CTLA-4仅表达于活化T细胞,其表达水平明显低于CD28,它与配体结合,向活化的T细胞传导抑制信号简述T细胞表位识别抗原的特点特异性:T细胞能识别大量的表达在APC表面的特异的肽-MHC复合体敏感性:同样的MHC分子可结合大量不同的肽,但APC上T细胞表位数很低限制性:一个淋巴细胞只识别与一种类型MHC分子结合的特异性抗原肽非己性:T细胞须忽略无害的或自身抗原顺序T:T细胞仅识别多肽的顺序表位简述T细胞疫苗的制备方法大学便民网1 .接种用T细胞的获取1)自

24、身免疫性疾病从发病机体的淋巴组织、炎症浸润部位或外周血中分离,特异性自身抗原诱导,体外扩增。2)移植研究用供体抗原使受体致敏,再收集相应部位的淋巴细胞和脾细胞,制备淋巴细胞悬液,用低浓度的ConA在体外培养。2 .T细胞接种前的处理1)T细胞的活化:通过特异抗原活化,或经T细胞有丝分裂原活化2)T细胞灭活:X射线、60Co照射或丝裂霉素C处理,低浓度戊二醛处理。3)亚适量接种:自身免疫性T细胞的剂量低于过继转移自身免疫性疾病所需的剂量,无需灭活。3 .接种方式自身免疫病动物实验:静脉注射临床上:皮下多点免疫同种移植实验:腹腔注射,术前术后多次特异性细胞免疫应答的体外功能检测方法有那些?1 .淋

25、巴细胞增殖试验取T细胞或PBMC与不同稀释度的抗原或APC递呈的抗原混合培养35天,测细胞的增殖。据此判断出淋巴细胞对有关刺激的反应性与功能状态所用方法:3HTdR掺入法、MTT法等2 .细胞因子分泌活化的T细胞会分泌一些细胞因子(IL-2、IFN-丫、TNF-“等)所用方法:流式细胞术(FACS),酶联免疫吸附试验(ELISA法),ELISPOT法,定量RT-PCR3 .直接细胞毒性分析T细胞介导的细胞毒性(LMC)是细胞毒性细胞(CTL)的特性,凡致敏的T细胞再次遇到相应靶细胞抗原,均可表现出对靶细胞的破坏和溶解作用,它是评价机体细胞免疫水平的一种常用指标,特别是测定肿瘤患者CTL杀伤肿瘤

26、的能力,常作为判断预后和观察疗效的指标之一论述题论述DNA疫苗免疫保护效果的评价?一、细胞免疫评价方法:T细胞功能和细胞因子的检测(一)淋巴细胞增殖功能的检测(淋巴细胞转化实验):3H-TdR掺入法,MTT法,Brdu检测法,CFSE标记淋巴细胞转化试验原理:T细胞表面具有识别抗原的受体和有丝分裂原受体,经特异性抗原刺激后发生一系列的变化而转变成为淋巴母细胞,所以又称为淋巴母细胞转化。淋巴细胞增殖和分化是机体免疫应答过程中的重要阶段。检测淋巴细胞增殖水平,了解核酸疫苗接种后,淋巴细胞的反应能力和免疫功能。(二)T细胞介导的细胞毒作用(即杀伤试验)杀伤性作用:抗原特异性,致敏的T细胞再次遇到相应

27、靶细胞抗原,对靶细胞的破坏和溶解作用。杀伤机制:穿孔素和颗粒酶靶细胞的程序性死亡原则:适当的靶细胞-标记-按一定比例与淋巴细胞混合-共温一段时间-观察杀伤情况1 .放射测定法(1) 51Cr释放试验(2) 3H-TdR释放试验大学便民网2 .非放射测定法乳酸脱氢酶(LDH)释放试验(三)细胞因子(cytokines)的检测定义:免疫细胞和非免疫细胞合成和分泌的具有调节多种细胞生理功能的小分子多肽类因子。常见:IL、IFN、CSF、TNF、TGF(1)免疫学方法基本原理:细胞因子(或受体)与相应的特异性抗体(单克隆抗体或多克隆抗体)结合,通过同位素、荧光或酶等标记技术加以放大和显示,从而定性或定

28、量显示细胞因子(或受体)的水平。常用检测方法:ELISA、ELISPOT、荧光标记法(FIA)、放免法(RIA)(2)生物学方法1 .细胞增殖法2 .靶细胞杀伤法3 .细胞因子诱导的产物分析法4 .减少细胞损伤法(3)分子生物学法原理:利用细胞因子的基因探针检测待定细胞因子基因表达的技术。检测法1. 分子杂交:斑点杂交、Northernblot等。2. RT-PCR二、体液免疫(一)B细胞增殖试验(1)不同刺激物诱发增殖试验抗IgM抗体、细菌脂多糖(LPS)3H-TDR、台盼蓝法或DNA特异性染色(2)葡萄球菌诱导试验葡萄球菌表面SPA含量与激发B细胞转化能力成正比。(二)抗体检测(1)抗体形

29、成细胞计数反相溶血空斑检测(2)抗体滴度的监测1 .酶联免疫分析法(ELISA)2 .免疫荧光法:直接和间接法3 .流式细胞仪(FACS)4 .放射免疫法(RIA):液相法和固相法5 .免疫印迹法(WesternBlot)论述在自身免疫性疾病中,TCV的作用机制?1 .抗独特型反应:TCV通过活化特异性识别病理相关性自身反应性T细胞TCR的T细胞而发挥作用。病理性T细胞上的TCR作为抗原表位,TCV产生的效应T细胞识别该表位,产生细胞免疫应答,抗独特型T细胞识别靶细胞TCR上的独特型表位,对靶细胞的杀伤作用受MHC限制。2 .抗活化型反应:针对TCR的抗独特型调节并不是TCV的唯一作用方式;也

30、涉及到抗动力性免疫,即抗活化型免疫。有丝分裂原活化的T细胞制成的疫苗可以刺激机体产生针对所有活化的T细胞免疫。调控机制较抗独特型弱,作用时间短,杀彳靶细胞不受MHC限制,无特异性。机体存在对所有活化状态T细胞起反应的抗活化型T细胞3 .Th1/Th2细胞平衡的改变:TCV通过活化自身免疫应答的细胞因子表型转换,改变Th1/Th2细胞平衡。Th1促进器官特异性自身免疫病的发生有关,Th2则能防止此类疾病的发生,Th1引发同种移植排斥反应,Th2可延长同种移植物的成活。大学便民网部分选择题工具酶?限制性核酸内切酶?DNA连接酶?DNA聚合酶I?反转录酶?多聚核甘酸激酶?末端转移酶?碱性磷酸酶功能识

31、别特异序列,切割DNA催化DNA中相邻的5礴酸基和3伏基形成二酯键a.合成cDNA的第二条链b.缺口平移c.测序d.补平合成cDNA催化多聚核甘酸5,羟基末端磷酸化同聚物加尾切除末端磷酸基免疫刺激序列ISS特点:具有回文结构(palindromicstructure)的六聚体一般为5,-喋吟喋吟CG喀咤喀咤-3?CpG一般为非甲基化增强免疫的常用策略:优化载体使用肌肉再生诱导剂与细胞因子联合使用免疫激活DNA序列CpGODN注射共刺激信号分子与抗原蛋白联合应用形成嵌合型或多重抗原型DNA疫苗多表位联合疫苗MVA可加强DNA疫苗抵抗疟疾电脉冲增强核酸疫苗的免疫原性与趋化因子联合微生物蛋白的佐剂效

32、应目前,疫苗的安全性问题主要有:导致肿瘤形成长期表达抗原抗DNA抗体的形成其他因素目的基因的筛选原则?1 .选择病原的主要保护性抗原基因,最好是可对多数毒株都有保护作用的抗原基因。2 .可以是单个基因或具有协同保护功能的一组基因,也可以是编码抗原决定簇的一段核昔酸序列。3 .该抗原基因遗传的分子机制已经研究清楚。4 .基因已经被克隆,且表达调控机制较为清楚。5 .目的基因在受体细胞内最好能完整地、稳定地整合到宿主细胞的染色体中,并能适时、适量表达功能性蛋白。DC与功能相关的特性:DC相对特异性表面标志:DC-SIGN表达丰富的黏附分子及共刺激因子,如ICAM、LFA-3、整合素等DC具有显著区

33、别于其他细胞的表面标志:高表达CD83、CD80、CD86、HLA-DR、HLA-DQ等典型表面标记大学便民网膜表面高表达MHCII类分子并具有一些相对特异性表面标志:小鼠DC:33D1和NLDC145、CD11c大鼠DC:OX62人DC:CD1a、CD83和BDCA2等阳性选择:排除所有非己MHC限制性T细胞阴性选择:排除或抑制自身反应性T细胞克隆特性T细胞表位日细胞表位表位受体TCRBCRMHC分子必需无需表位性质主要是线性多股天然的第肽、多糖、脂第穗.有机化合物表位大小8T2个氨基酸(CD8T*ffl胞)1WT7个制基酸(CD4+T细胞)5T5个氨基酸、5-7个单糖或上7个核昔酸表位类型线性表位构象表位;线性表位表位位置抗原分子任意部位抗原分子表面T细胞和白细胞抗原表位的特性比较播i必须至少有一个T细胞表位,才能使抗原具有免疫原性,名词解释1) Vaccine2) 新概念疫苗(新型疫苗)3) 抗原提呈细胞(antigen-presentingcell,APC)4) 内源性抗原5) 外源性抗原6) 交叉递呈7) 免疫突触8) 自身免疫(autoimmunity)9) 直接致敏10)间接致敏11)RNA瘤苗问答题

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