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文档简介

1、饮料中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定HPLC法1、掌握HPLC测定饮料中糖精钠、苯甲酸钠和山梨酸钾的原理和方法。2、了解HPLC的结构，学习HPLC的操作方法。3、掌握HPLC的定性定量方法o糖精钠是最古老的甜味剂。糖精于1878年被美国科学家发现，很快就被食品工业界和消费者接受。糖精的甜度为蔗糖的300倍到500倍，它不被人体代谢吸收，在各种食品生产过程中都很稳定 。o据国外资料记载，1977年加拿大进行的一项多代大鼠喂养实验发现，摄入大量的糖精钠可以导致雄性大鼠膀胱癌。因此，美国等发达国家的法律规定，在食物中使用糖精时，必须在标签上注明“使用本产品可能对健康有害，本产品合有可以导致实验动物癌

2、症的糖精”的警示。o山梨酸（钾）能有效地抑制霉菌，酵母菌和好氧性细菌的活性，从而达到有效地延长食品的保存时间，并保持原有食品的风味。o由于山梨酸（钾）是一种不饱和脂肪酸（盐）它可以被人体的代谢系统吸收而迅速分解为二氧化碳和水，在体内无残留。o苯甲酸通常用作定香剂或防腐剂。也用作果汁饮料的保香剂。可作为膏香用入薰香香精。还可用于巧克力、柠檬、橘子、子浆果、坚果、蜜饯型等食用香精中。烟用香精中亦常用之。o食品添加剂使用卫生标准（GB27601996）规定：碳酸饮料，最大使用量为0.2g/kg实验步骤1o按照下列高效液相色谱参考条件和仪器操作说明开机，设定。o检测器：紫外检测器，230nm波长，o色

3、谱柱：C18 4.6250mm, 5m不锈钢柱o流动相：甲醇：乙酸铵溶液（0.02 mol/L）=5:95（先100%甲醇运行10分钟后再设定次比例）o流速：1 mL/mino进样量：10 L 实验步骤2o样品处理每组派一个同学称取汽水10.00g，放入小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，加水定容至50 mL，用水系0.22um滤膜过滤至离心管待用。实验步骤3o标准溶液配制每组派一个同学，从混合标准贮备液（浓度1.0mg/mL），用移液管准确取适量（？），到25mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此混合标准溶液浓度为0.1mg/mL。 后用水系0.22um滤膜过滤至离心管待用。实验步骤4o先进混和标准溶液（ 0.1mg/mL）一针分析，记录色谱图及各峰面积保留时间。o进汽水样品溶液，根据保留时间定性，外标峰面积法定量。以其峰面积求出样液中被测物质的含量，供计算。数据处理o以糖精钠为例 o式中 X-试样中糖精钠含量，g/kg;o A-进样体积中糖精钠的质量，mg；o V2-进样体积，mL；o V1-试样稀释液总体积，mL；o m-试样质量，g。NoImage仪器关机o测定结束后，点停止，停止泵运行。把A瓶中的滤头取出，放入超纯水中，设定水：甲醇=90：1

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