cho基因敲除细胞系

1、北京维尚立德生物HO-GS-/-1isderivedfromCHO-K1cell(ATCC),andKnock-outglutamate-ammonialigasegenebyTALEN,thenadapttosuspensionculturewithserumfreeculturemedium.Cho 细胞来源：ATCCCHOK1Genotypesequence:CHOGSWT:TITrATTTATUJCTTTCirGATCCrXTATACATATCTTCrTATrTTAAAfClGCnTKTTJlAAJOGnCTrTUAAJUCACACTAArTjCGOTGAG必AATAAT区 菜T T邮

2、 感 学ACAC并3TG3TG品KCaCTOAKTOCTGCBCmCTTBBTBTICTBKCaCTOAKTOCTGCBCmCTTBBTBTICTB愉 口NTGGCCCTGKCAXCKTNTGGCCCTGKCAXCKT ：匚AICATOCCCCCAGCCiCCKTQMC向XTTCQCCAD/HAOCtMGTTOCC氏TIC啦AU3cMe啦CAAATG及CMCICOCTGCCCCAGGGTG网她的TCCAWCATGT且TATCXGT&GTGGTAaCGGAGMGKIGCGCMAAAATBC以I：HSCIG%AGCCCAA&K；T&TAGAAGJGGTKCIGAGIGGAA

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7、lt:-12345NCP1-5:differentcellwellssample;NC:negativecontrol;北京安必奇生物Knockout基因敲除细胞或动物模型一直以来是开展基因功能研究、寻找合适药物作用靶点的重要工具。CRISPR/Cas系统是细菌的一种适应性免疫机制， 用来抵抗各种外来核酸的入侵。CRISPR/Cas9技术与ZFN、TALEN相比，更为高效、便捷，成为基因编辑的一个重要工具，在基因工程领域开创了新纪元。改造优化后的CRISPR/Cas9系统由两部分组成：sgRNA和Cas9蛋白。sgRNA特异性识别靶位点后，Cas9蛋白在靶位点附近进行切割，从而形成DSB。安必

8、奇凭借先进的技术平台、专业的科研团队，将为您提供各种Knockout基因敲除细胞系服务，甚至是难转染的细胞，如原代细胞、干细胞、神经元细胞等。我们的一站式服务包括：sgRNA设计、筛选高效的sgRNA、敲除载体构建、敲除效率验证等。我们将会在最短的时间内提供给您高质量的单克隆基因敲除细胞系，以及全面的检测报告，包括靶点设计，靶点基因敲除效率检测，克隆筛选及靶基因检测全部过程。crRNAtracrRNA技术20ntHr细胞转染细胞克隆筛选CruiserrMEnzyme 酶切、 TA 克隆测序、qRT-PCRW-5tenblot 检测靶点敲除效率检测。TargetDNA设计和筛选高效的 sgRNA

9、Pool 细胞敲除效率检测服务内容靶点设计-根据目的基因设计相应的靶位点，并构建sgRNA表达质粒Cas95gRNA 表达载体构建效率检测-通过Cruiser?Enzyme酶切及pool细胞测序对设计的sgRNA进行NGG月魄检测细胞转染-将cas9和sgRNA质粒转染目的细胞。克隆筛选-挑选单克隆细胞，检测细胞基因型。敲除检测-Cruiser?Enzyme酶切、TA克隆测序、qRT-PCR、Westernblot等。我们的优势多样细胞种类-在H1299、2F-2B、4T1、786-O、9607、THP-1、MCF7/ADR、A549、V79、CHO、HepG2等多个种属细胞中成功构建Knoc

10、kout基因敲除细胞系。一站式服务-我们提供从sgRNA设计至敲除结果检测（DNA、mRNA、蛋白水平）的一站式服务，满足客户不同的需求。各种基因位点-敲除效率不受靶位点限制。敲除效率高-敲除效率达到高，且脱靶效率低，达到100%的准确率。应用前景研究基因的功能及表达调控机制。构建各种基因突变导致的疾病模型如白化病、阿尔兹海默症、镰刀型细胞贫血症等，从而研究疾病的治疗及诊断方法。染色体敲除或大片段敲除1。通过设计模版链和同源臂，插入外源基因或修复突变基因，从而进行转基因或突变基因修复实验2。利用Cas9的突变体（dCas9）只能特异性识别结合靶位点，而不能产生DSB的特点，可以进行基因表达调控

11、的研究3-4以及甲基化等表观遗传学研究5参考文献1HeZ,ProudfootC,MilehamAJ,etal.HighlyefficienttargetedchromosomedeletionsusingCRISPR/Cas9J.Biotechnologyandbioengineering,2015,112(5):1060-1064.2SchwankG,KooBK,SasselliV,etal.FunctionalrepairofCFTRbyCRISPR/Cas9inintestinalstemcellorganoidsofcysticfibrosispatientsJ.Cellstemcell,2013,13(6):653-658.3Perez-PineraP,KocakDD,VockleyCM,etal.RNA-guidedgeneactivationbyCRISPR-Cas9-basedtranscriptionfactorsJ.Naturemethods,2013,10(10):973-976.4GilbertLA,LarsonMH,MorsutL,etal.CRISPR-mediatedmodularRNA-guidedregulatio