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文档简介
1、会计学1实验一小鼠睾丸附睾及输精管精子采集运动实验一小鼠睾丸附睾及输精管精子采集运动能力检测与结构观察能力检测与结构观察第一页,编辑于星期一:十九点 四十分。认识雄性小鼠睾丸、附睾、输精管等生认识雄性小鼠睾丸、附睾、输精管等生殖器官结构及位置特点;殖器官结构及位置特点; 掌握小鼠睾丸、附睾及输精管精子采掌握小鼠睾丸、附睾及输精管精子采集方法;集方法;掌握血细胞计数板法精子计数和运动能掌握血细胞计数板法精子计数和运动能力检查的方法;力检查的方法;通过睾丸、附睾及输精管精子运动能力通过睾丸、附睾及输精管精子运动能力检测,认识精子在睾丸产生后,在附睾检测,认识精子在睾丸产生后,在附睾内成熟的过程;内
2、成熟的过程;实验目的实验目的第1页/共24页第二页,编辑于星期一:十九点 四十分。5. 5. 掌握精子抹片方法;掌握精子抹片方法;6. 6. 掌握染色法进行精子结构观察和顶体掌握染色法进行精子结构观察和顶体 结构观察的方法,认识精子的正常结构;结构观察的方法,认识精子的正常结构;7. 7. 使学生得到小鼠精子操作的基础训练。使学生得到小鼠精子操作的基础训练。实验目的实验目的第2页/共24页第三页,编辑于星期一:十九点 四十分。实验原理实验原理第3页/共24页第四页,编辑于星期一:十九点 四十分。实验原理实验原理第4页/共24页第五页,编辑于星期一:十九点 四十分。实验用品实验用品2. 2. 药
3、品、试剂:药品、试剂: 精子操作液(精子操作液(CZB液或液或KSOM液)、液)、0.5%龙胆龙胆紫酒精液、紫酒精液、36%甲醛溶液、磷酸缓冲液()、甲醛溶液、磷酸缓冲液()、精子固定液(福尔马林磷酸盐缓冲液)、吉精子固定液(福尔马林磷酸盐缓冲液)、吉姆萨工作液。姆萨工作液。第5页/共24页第六页,编辑于星期一:十九点 四十分。实验用品实验用品3. 3. 实验动物:实验动物: 选择选择60日龄以上,体重达到日龄以上,体重达到32-35g的昆明种公的昆明种公鼠。鼠。第6页/共24页第七页,编辑于星期一:十九点 四十分。丸、附睾及输精管周围的系膜及丸、附睾及输精管周围的系膜及脂肪,并冲洗干净,以免
4、血液或脂肪,并冲洗干净,以免血液或脂肪球混入液体妨碍精子观察。脂肪球混入液体妨碍精子观察。实验方法实验方法第7页/共24页第八页,编辑于星期一:十九点 四十分。科剪轻轻挤压睾丸组织块,把精科剪轻轻挤压睾丸组织块,把精子挤入培养液中,去掉组织块。子挤入培养液中,去掉组织块。置置3737、5%CO5%CO2 2、饱和湿度培、饱和湿度培养箱孵育养箱孵育20min20min,使精子自行散,使精子自行散开。开。实验方法实验方法第8页/共24页第九页,编辑于星期一:十九点 四十分。实验方法实验方法纵向撕开输精管,精子会浮游到纵向撕开输精管,精子会浮游到培养液中。将大块输精管组织拨培养液中。将大块输精管组织
5、拨开,用吸管连同精子吸出液体部开,用吸管连同精子吸出液体部分,装于分,装于2ml具塞试管中暂存。具塞试管中暂存。第9页/共24页第十页,编辑于星期一:十九点 四十分。在在50 50 条件下条件下5 510min10min杀死精杀死精子,计数总精子数子,计数总精子数X X2 2值,(值,( X X2 2 X X1 1 )/ X/ X2 2为表示精子运动能力为表示精子运动能力的精子活力值。计数时每份精子的精子活力值。计数时每份精子用用3 3个计数板重复计数个计数板重复计数3 3次,取平次,取平均值。均值。实验方法实验方法第10页/共24页第十一页,编辑于星期一:十九点 四十分。(如头部巨大、瘦小、
6、细长、圆(如头部巨大、瘦小、细长、圆形、轮廓不明显、皱缩、缺损、形、轮廓不明显、皱缩、缺损、双头等)、颈部畸形双头等)、颈部畸形实验方法实验方法第11页/共24页第十二页,编辑于星期一:十九点 四十分。实验方法实验方法第12页/共24页第十三页,编辑于星期一:十九点 四十分。子。镜下可观察到大多数精子子。镜下可观察到大多数精子顶顶体结构正常体结构正常,部分精子,部分精子顶体异常顶体异常,精子顶体异常主要表现为肿胀、精子顶体异常主要表现为肿胀、缺损、部分或完全脱落。缺损、部分或完全脱落。实验方法实验方法第13页/共24页第十四页,编辑于星期一:十九点 四十分。实验注意事项实验注意事项第14页/共
7、24页第十五页,编辑于星期一:十九点 四十分。实验结果及分析实验结果及分析 2.2.绘制小鼠精子结构图?绘制小鼠精子结构图? 3.3.从外观上看小鼠精子由哪几部分组成?你都观从外观上看小鼠精子由哪几部分组成?你都观察到了哪几种畸形结构?将典型的畸形结构进行察到了哪几种畸形结构?将典型的畸形结构进行图示。图示。第15页/共24页第十六页,编辑于星期一:十九点 四十分。第16页/共24页第十七页,编辑于星期一:十九点 四十分。第17页/共24页第十八页,编辑于星期一:十九点 四十分。第18页/共24页第十九页,编辑于星期一:十九点 四十分。第19页/共24页第二十页,编辑于星期一:十九点 四十分。第20页/共24页第二十一页,编辑于星期一:十九点
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