连云港中医药高等职业技术学校高职学生专题试验设计复习进程

1、连云港中医药高等职业技术学校高职学生专题试验设计专题实验专题实验目的目的v能够运用碱溶酸沉法的操作技术对槐米中的芦丁进能够运用碱溶酸沉法的操作技术对槐米中的芦丁进行提取分离行提取分离v能够运用酸水解的操作技术对槐米中芦丁进行水解能够运用酸水解的操作技术对槐米中芦丁进行水解v能运用纸色谱鉴别芦丁、槲皮素能运用纸色谱鉴别芦丁、槲皮素专题实验专题实验内容内容槐米为豆科植物槐（槐米为豆科植物槐（Sophora japonica L.Sophora japonica L.）的干燥花及花蕾。）的干燥花及花蕾。 槐花槐花槐米槐米原植物形态原植物形态 落叶乔木，高落叶乔木，高1525m。羽状。羽状复叶互生复叶

2、互生,叶轴有毛基部膨大叶轴有毛基部膨大,小小叶叶9-15，卵状长圆形，长，卵状长圆形，长2.57.5cm。宽宽1.55cm，先端尖，先端尖，基部阔楔形。下面灰白色基部阔楔形。下面灰白色，疏生，疏生短柔毛。短柔毛。 圆锥花序顶生圆锥花序顶生;萼钟状，有萼钟状，有5小小齿；花冠乳白色，其瓣阔心形，齿；花冠乳白色，其瓣阔心形，有短爪，并有紫脉，翼瓣和龙骨有短爪，并有紫脉，翼瓣和龙骨瓣边缘稍带紫色；雄蕊瓣边缘稍带紫色；雄蕊 10，分离，分离，不等长。荚果肉质，串珠状，长不等长。荚果肉质，串珠状，长2.55cm，无毛，不裂。种子，无毛，不裂。种子16，肾形。花期，肾形。花期79月，果期月，果期9-10月

3、。月。 药材外观性状药材外观性状 槐米呈卵形或椭圆形，槐米呈卵形或椭圆形，长长2-6mm2-6mm，直径，直径2-3mm2-3mm。 花萼下部有数条纵花萼下部有数条纵纹。萼的上方为黄白色纹。萼的上方为黄白色未开放的花瓣。花梗细未开放的花瓣。花梗细小。体轻，气微，味微小。体轻，气微，味微苦涩。苦涩。性状：性状：黄色针黄色针状结晶（稀乙状结晶（稀乙醇）醇）溶解度：溶解度：冷乙冷乙醇中醇中1:3001:300，热乙醇中热乙醇中1:231:23。可溶于甲醇、可溶于甲醇、丙酮、乙酸乙丙酮、乙酸乙酯、冰乙酸、酯、冰乙酸、吡啶，不溶于吡啶，不溶于水、氯仿、乙水、氯仿、乙醚、苯和石油醚、苯和石油醚。醚。槲皮素

4、介绍槲皮素介绍性状：性状：芦丁为浅黄色粉末芦丁为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，溶点为三分子的结晶水，溶点为174178174178，无水物，无水物188190188190。溶解度：溶解度：微溶于丙酮、乙微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。呈黄色。酸碱性：酸碱性：芦丁分子中具有芦丁分子中具有较多酚羟基，显弱碱性，较多酚羟基，显弱碱性，易溶于碱液中，酸化后又易溶于碱液中，酸化后又可析出。可析出。相关内容介绍相关内容介绍 芦丁芦丁专题实验专题实验药材药材槐米槐米v别名：怀花、槐花别名

5、：怀花、槐花v性能：苦，性微寒。性能：苦，性微寒。v归经：入肝、大肠经。归经：入肝、大肠经。v功效：凉血止血，清肝泻火。功效：凉血止血，清肝泻火。v应用：用于便血、痔疮出血、血痢、尿血、崩漏、应用：用于便血、痔疮出血、血痢、尿血、崩漏、吐血、衄血、高血压、肝热目赤、头痛眩晕等。吐血、衄血、高血压、肝热目赤、头痛眩晕等。 v成分：主要含有芦丁、槲皮素，还含有少量皂苷类成分：主要含有芦丁、槲皮素，还含有少量皂苷类及多糖、粘液质等。及多糖、粘液质等。专题实验专题实验器材器材v药材：槐米药材：槐米v仪器：水浴锅、研钵、烧杯、电子天平、玻璃棒、仪器：水浴锅、研钵、烧杯、电子天平、玻璃棒、抽滤瓶、布式漏斗

6、、砂布、抽滤瓶、布式漏斗、砂布、pHpH试纸、培养皿、三角试纸、培养皿、三角漏斗、铁架台、滴管、真空泵、水浴锅、培养皿、漏斗、铁架台、滴管、真空泵、水浴锅、培养皿、滤纸、细绳、试管、试管夹、量筒、药匙、滤纸、细绳、试管、试管夹、量筒、药匙、25250ml0ml圆底烧瓶、球形冷凝管、毛细管、色谱缸。圆底烧瓶、球形冷凝管、毛细管、色谱缸。v试剂：石灰乳、浓盐酸、硫酸、金属镁粉、浓盐酸、试剂：石灰乳、浓盐酸、硫酸、金属镁粉、浓盐酸、正丁醇、醋酸、正丁醇、醋酸、1 1% %三氯化铝乙醇溶液、乙醇、芦丁、三氯化铝乙醇溶液、乙醇、芦丁、槲皮素。槲皮素。 实训流程实训流程残渣滤液同法再操作一次残渣合并滤液用

7、浓盐酸调至pH=5左右，静置过夜，抽滤滤饼滤液蒸馏水洗至中性，抽干粗制芸香苷加入0.4%硼砂沸水溶液，在搅拌下缓缓加入石灰乳至pH89.在保持此PH 值条件下，微沸2030min，随时补充失去的水分，趁热用四层纱布过滤槐米粗粉50g（粉碎）按1:200悬浮于蒸馏水中，煮沸，至芸香苷溶解，趁热抽滤滤渣滤液自然冷却，析晶，抽滤滤液滤饼置空气中晾干精制芸香苷取芸香苷1g，置于250ml圆底烧瓶，加2%硫酸100ml，直火微沸回流40min，放冷，抽滤滤饼滤液水洗至中性，干燥，称重作糖的检查粗制槲皮素精制槲皮素乙醇重结晶具体操作步骤具体操作步骤芸香苷的提取芸香苷的提取v取取50g50g槐米研制成粗粉，

8、置槐米研制成粗粉，置500ml500ml烧杯中烧杯中v加入加入0.4%0.4%硼砂沸水溶液硼砂沸水溶液500ml500ml。 在搅拌下加石灰乳，调至在搅拌下加石灰乳，调至pH89pH89，加热微沸加热微沸2020分（保持分（保持pH89pH89），并随时），并随时补充蒸发掉的水分，趁热用四层纱布滤补充蒸发掉的水分，趁热用四层纱布滤过。滤渣同样操作再提取一次，合并两过。滤渣同样操作再提取一次，合并两次滤液。次滤液。 滤液在滤液在60706070用用浓盐酸调至浓盐酸调至pH5pH5左右，左右，静置过夜使沉淀完全。静置过夜使沉淀完全。 抽滤，沉淀用蒸馏抽滤，沉淀用蒸馏水洗水洗2323次至中性，抽次至

9、中性，抽干，置空气中晾干，得干，置空气中晾干，得芸香苷粗品。芸香苷粗品。芸香苷的精制 称一定重量的粗品称一定重量的粗品按约按约1:2001:200的比例浮于的比例浮于蒸馏水中，煮沸蒸馏水中，煮沸1010分钟分钟使其全部溶解，趁热抽使其全部溶解，趁热抽滤，冷却滤液，静置析滤，冷却滤液，静置析晶。晶。 抽滤，置空气中晾抽滤，置空气中晾干或干或60706070干燥，得干燥，得精制芸香苷，称重，计精制芸香苷，称重，计算得率。算得率。芸香苷的水解 取芸香苷取芸香苷1g1g，研细后，研细后置于置于250ml250ml圆底烧瓶中，加圆底烧瓶中，加入入2%2%硫酸溶液硫酸溶液100ml100ml，直火，直火微

10、沸回流微沸回流4040分钟，至析出分钟，至析出鲜黄色沉淀不再增加为止，鲜黄色沉淀不再增加为止，放冷抽滤。放冷抽滤。 滤液保留，沉淀用少滤液保留，沉淀用少量水洗去酸，抽干水分，量水洗去酸，抽干水分，晾干称重得粗制槲皮素。晾干称重得粗制槲皮素。芸香苷、槲皮素的纸色谱鉴定芸香苷、槲皮素的纸色谱鉴定 样品：样品： 1 1）自制芸香苷乙醇液）自制芸香苷乙醇液 2 2）自制槲皮素乙醇液）自制槲皮素乙醇液对照品：对照品：1 1）芸香苷标准品乙醇液）芸香苷标准品乙醇液 2 2）槲皮素标准品乙醇液）槲皮素标准品乙醇液支持剂：新华色谱滤纸（中速支持剂：新华色谱滤纸（中速 15cm15cm* *7cm7cm）展开剂

11、：展开剂：1 1）正丁醇）正丁醇- -醋酸醋酸- -水（水（4 4：1 1：5 5）上层液）上层液显色剂：在可见光下观察斑点颜色显色剂：在可见光下观察斑点颜色 盐酸盐酸- -镁粉反应镁粉反应 将样品溶于将样品溶于1ml1ml乙醇，乙醇，加入少许镁粉振摇，滴加加入少许镁粉振摇，滴加几滴浓盐酸，几滴浓盐酸，1-2min1-2min内，内，芦丁溶液颜色由黄色渐变芦丁溶液颜色由黄色渐变为红色，槲皮素溶液颜色为红色，槲皮素溶液颜色由黄色变为深红色。由黄色变为深红色。 三氯化铝反应三氯化铝反应将样品溶于将样品溶于1ml1ml乙醇，加入乙醇，加入1%1%三氯化铝甲醇溶液三氯化铝甲醇溶液2323滴，滴，芦丁溶

12、液呈鲜黄色，槲皮芦丁溶液呈鲜黄色，槲皮素溶液呈柠檬黄。素溶液呈柠檬黄。实验注意事项实验注意事项（1 1）槐米粉碎要适度，过细将影响过滤。）槐米粉碎要适度，过细将影响过滤。（2 2）加入石灰乳既可达到碱溶解芦丁的目的，）加入石灰乳既可达到碱溶解芦丁的目的，还可以除去槐米中含有的大量多糖黏液质。但还可以除去槐米中含有的大量多糖黏液质。但pHpH值不能过高，否则钙能与芦丁形成螯合物而值不能过高，否则钙能与芦丁形成螯合物而沉淀析出。沉淀析出。（3 3）用浓盐酸酸化时，避免酸性过强，以免析）用浓盐酸酸化时，避免酸性过强，以免析出的芦丁生成的盐而重新溶解，降低产品收率。出的芦丁生成的盐而重新溶解，降低产品

13、收率。（4 4）pHpH值过低会使芦丁形成氧盐重新溶解，降值过低会使芦丁形成氧盐重新溶解，降低收率（最佳低收率（最佳pHpH值为值为5 5左右）。左右）。实验小结实验小结 从本次专题实验中，我们学到了很多，实验的从本次专题实验中，我们学到了很多，实验的成功离不开大家的配合与努力。只有通过每个人主成功离不开大家的配合与努力。只有通过每个人主动的参与，才能将实验做好。动的参与，才能将实验做好。 这次实验让我们每个人都受益非凡，我们学会这次实验让我们每个人都受益非凡，我们学会了用耐心和细心去完成实验，学会了相互配合，互了用耐心和细心去完成实验，学会了相互配合，互相督促。在遇到问题的时候，学会了向老师

14、请教，相督促。在遇到问题的时候，学会了向老师请教，自己查阅资料。自己查阅资料。 以后我们会更加认真努力的做好每一件事！以后我们会更加认真努力的做好每一件事！参考文献参考文献v金利泰金利泰. .天然药物提取分离工艺学天然药物提取分离工艺学. .杭州杭州: :浙江浙江大学出版社大学出版社.2011.244-247.2011.244-247v肖崇厚肖崇厚. .中药化学中药化学. .上海上海: :上海科学技术出版上海科学技术出版社社.1997.325-326.1997.325-326v卢艳花卢艳花. .中药有效成分提取分离实例中药有效成分提取分离实例. .北京北京: :化化学工业出版社学工业出版社.2007.84-86.2007.84-86v肖崇厚肖崇厚. .中药化学中药化学. .上海上海: :上海科学技术出版上海科学技术出版社社.1997.584-585.1997.584-585v卢艳花卢艳花. .中药有效成分提取分离技术中药有效成分提取分离技术. .北京北京: :化化学工业出版社学工业出版社.2005.105-107.2005.105-107v时维静时维静, ,王甫成王甫成. .中药分析与检测中药分析与检测. .北京北京: :化学工业出化学工业出版社版社.2010.167-169.2010.167-169v杨红杨红.